病理学与法医学教研室延边大学医学院
| 货号： | F549S |
| 供应商： | 广州硕恒生物 |
| 数量： | 大量 |
| 规格： | 5u |
倍，是保真度最好的热稳定聚合酶，从而使之成为克隆或其他需要高保真性实验的首选。而该酶的独特结构使其即便在有PCR抑制剂存在的情况下，也能快速有效的得到目的产物。对研究者而言，这意味着方便和可信。此外，PhusionDNA聚合酶相较于其他酶而言，可用更少的酶得到更多的产物。
PhusionHigh-FidelityPCRmastermix是便捷的2X溶液，只需添加模板和引物即可进行实验，从而最大限度的减少了手动步骤，使用更为方便。Phusion高保真PCR试剂盒则包含了PCR所必需的所有试剂，包括对照模板和引物。
• 保真度高（在PhusionHF缓冲液中的错配率为4.4×10-7）
• 延伸时间短（15-30秒/kb）
• 功能强劲，只需最少的优化
• 更少的酶，更高的产量
应用：
• 高性能PCR
• 高保真PCR
• 克隆
• 测序（模板扩增）
优势：
1.错配率极低
PhusionDNA聚合酶的错配率极低，为高保真PCR建立了新标准。使用改良的lacI方法检测，PhusionDNA聚合酶的错配率比TaqDNA聚合酶低约50倍,比PfuDNA聚合酶低6倍（见下图）。
2.反应失败率最低
PhusionDNA聚合酶能够最大限度地容忍各种抑制剂和其它复杂的反应条件。这不但保证把反应的失败率降到最低，而且能够利用非纯化的材料直接进行PCR。在为人源样本和血液样本设计的ThermoScientific直接PCR试剂盒中，PhusionDNA聚合酶是主要成分。
以多种未经DNA提纯的人源样本为模板进行直接PCR（图1）
不同的样品直接置于20μlPCR反应体系中。利用Phusion人源样本直接PCR试剂盒含有的对照引物成功扩增一段237bp的DNA。PCR反应使用的是ThermoScientificUTW反应管和Piko热循环仪。
PhusionDNA聚合酶集超高保真度、快速和强劲的性能于一体（图2）
从Thermussp.基因组文库中随机挑选16个克隆进行扩增。结果显示了PhusionDNA聚合酶的强劲性能和快速。在用PhusionDNA聚合酶扩增时，94%的DNA片段被成功扩增，酶的用量更少，产量也更高。PfuDNA聚合酶的成功率只有56%，TapDNA聚合酶为62%，而且产量明显较少。
3.高保真快速PCR
与其他酶相比，PhusionDNA聚合酶在每次与DNA的结合反应中都能够掺入更多的核苷酸。其高处理能力大大缩短了延伸步骤的时间，进而加快了整个反应的进行。使用PhusionFlashHigh-FidelityPCRMasterMix（Phusion快速高保真PCRMasterMix）的反应时间最短，此试剂盒是专门针对快速PCR而研发的产品。由于其结构独特，PhusionDNA聚合酶的效率非常高。在任何PCR反应中，该酶的用量显著低于其他常见的聚合酶。PhusionDNA聚合酶的高速度和高效率使得它能在最短时间内获得大量产物。
用更少的酶——获得更多的产物（图3）
使用3种不同的DNA聚合酶扩增一个长为3.8kb的人β球蛋白基因。使用PhusionDNA聚合酶可成功扩增出此3.8kb的基因组片段，退火和延长步骤仅需1分钟，明显快于其他两种聚合酶。一个单位的PhusionDNA聚合酶所获得的产物高于2.5或5个单位的PfuDNA聚合酶的产量。
既快速又高产的PhusionFlash（图4）
在Piko热循环仪上，三种不同的聚合酶用不同的延伸时间（10-60s）扩增一段1.5kb的人类cathepsinK基因。只有PhusionFlash能够使用10秒和20秒这样极短的延伸时间完成实验。与其他测试的酶相比，它的特异性产物的产量也非常高。
几种高性能酶对比：
| 对比项目 | Phusion高保真DNA聚合酶 | Phusion热启动II高保真DNA聚合酶 | PhusionFlash高保真DNA聚合酶 | Phire热启动IIDNA聚合酶 | |
| 特点 | 平端或3’A端 | 平端 | 平端 | 平端 | 平端 |
| 目标片段长度 | ≤20kb | ≤20kb | ≤20kb | ≤7.5kb | |
| 热启动 | 否 | 是 | 是 | 是 | |
| 推荐延伸时间 | 15-30s/kb | 15-30s/kb | 15s/kb | 10-15s/kb | |
| 校正功能 | 是 | 是 | 是 | 一般 | |
| 保真度vs.Taq | 52X | 52X | 25X | 2X | |
| 形式 | 单酶1 | √ | √ | --- | √ |
| Mastermix2 | √ | --- | √ | --- | |
| 试剂盒3 | √ | --- | --- | --- | |
1.单酶：DNA聚合酶，缓冲液，DMSO和MgCl2
2.MasterMix：2Xmastermix
3.试剂盒：所有必需的PCR反应成分包括对照模板和引物
产品组成：
Phusion高保真DNA聚合酶（F-530）：PhusionDNA聚合酶2U/μl、5xPhusionHFBuffer、5xPhusionGCBuffer、DMSO和50mMMgCl2。PhusionHFBuffer和PhusionGCBuffer都在最终1X的浓度中提供了1.5mM的MgCl2。
Phusion高保真PCRmastermix（F-531和F-532）：PhusionDNA聚合酶、dNTP(400μMeach)以及2xPhusionHFBuffer（F-531）或2xPhusionGCBuffer（F-532）。该产品在最终的反应液浓度中提供了1.5mM的MgCl2和200μMdNTP。随产品还单独提供一管DMSO。
Phusion高保真PCR试剂盒（F-553）：PhusionDNA 聚合酶2U/µl、5xPhusionGC和HFBuffer、1.3kb和10kbprimers（4µMeach）、对照模板（λDNA）、dNTPmix（10mMeach）,MgCl2溶液（50mM）,DNA分子量标准、DMSO。
Pfu 修饰的Pfu PhusionDNA
（5U） （2.5U） 聚合酶（1U）
温馨提示：不可用于临床治疗。
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发布于 ： 2019-03-13
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