DescriptionT4 DNA Ligase catalyzes the formation of a phosphodiester bond between juxtaposed 5"-phosphate and 3"-hydroxyl termini in duplex DNA or RNA. This enzyme will join blunt-end and cohesive end termini as well as repair single stranded nicks in duplex DNA, RNA, or DNA-RNA hybrids.
Concentrations 50 - 200u/μl
Features
- Ultrapure recombinant protein
- Seals single-stranded nicks in duplex DNA, RNA or DNA-RNA hybrids.
- ATP is an essential cofactor for the reaction.
Supplied With10X Buffer T4 Ligase 50mM Tris-HCl (pH7.8 at 25˚C), 10mM MgCl2, 10mM DTT, 1mM ATP and 25μg/ml BSA. Store at -20˚C.
Storage Buffer 10mM Tris-HCl (pH7.5), 50mM NaCl, 0.1mM EDTA, 10mM 2-mercaptoethanol and 50% glycerol. Store at -20˚C.
Thermal Inactivation 65˚C for 15 minutes
Unit Definition 1u (*Cohesive End Ligation Unit) is defined as the amount of enzyme that is required to give 50% ligation of Hind III fragments of lambda DNA (5" DNA termini concentration of 0.12μM [300μg/ml]) in 20μl of 1X T4 DNA Ligase Buffer in 30 minutes at 16˚C.*One Cohesive End Ligation Unit is equal to 0.015 Weiss units. Equivalently, one Weiss unit is equal to 67 Cohesive End Ligation Units.
Application
- Catalyzes the linkage of 5" or 3" blunt/cohesive ends of double-stranded DNA by formation of phosphodiester bond.
- Joining of oligonucleotide linkers or adapters to blunt ends.
- Repair nicks formation in duplex nucleic acids.
Quality ControlAll preparations are assayed for contaminating endonuclease, exonuclease and non-specific DNase activities.
Ordering Information
| Catalog No | Description | Pack Size |
|---|---|---|
| ME4303 | T4 DNA Ligase | 4000u |
| ME4304 | T4 DNA Ligase | 20000u |
DownloadManual
T4 DNA Ligase
PublicationThis Product Has Been Used In:Mahboudi et al. (2018)Prospect and Competence of Quantitative Methods via Real-time PCR in a Comparative Manner: An Experimental Review of Current Methods, . The Open Bioinformatics Journal,11:1-11. Dehnaiv, E., Fathi-Roudsari,M., Mirzaie, S., Arab., S.S., Siadat, S.O.R., Khajeh, K. (2017)Engineering disulfide bonds in Selenomonas ruminantium B-xylosidase by experimental and computational methods. International Journal of Biological Macromolecules. 95. Pp.248-255Mohandesi, N., Haghbeen, K., Ranaei, O., Arab, S.S., Hassani, S. (2017) Catalytic Efficiency and thermostability improvement of SUC2 invertase through rational site-directed mutagenesis. Enzyme and Microbial Technology.96. pp14-22Busayapongchai, P., Siri, S.(2017). Sensitive detection of estradiol based on ligand binding domain of estrogen receptor and gold nanoparticles. Analytical biochemistry. 518, pp.60-68.Kohnehrouz, B.B., & Nayeri, S. (2016)Design, Cloning and In silico Analysis of Efficient siRNA-inducing Casette for Silencing Wheat γ-gliadins. Jordan Journal of Biological Sciences9(1), p.35-40. Meidaninikkjeh, S., Vaziri,F., Siadat, S.D. (2015) Cloning of conserved regions of nontypeable Haemophilus influenzae hmw1 core binding domain. International Journal of Molecular and Clinical Microbiology.5(1) pp.510-515
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
DNA聚合酶和DNA连接酶作用的位点都是3'5'磷酸二酯键；但DNA连接酶是作用在游离的DNA片段间，使其连接成为一条完整的DNA链，而DNA聚合酶则是将游离的脱氧核糖核苷酸连接成DNA片段。
不同点：
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物，而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能，而DNA聚合酶没有，当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性，而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性，还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对，所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程；DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程。
DNA连接酶作用于基因工程，用于连接两个DNA片段间的磷酸二酯键。
最近，我看了很多这方面的资料，但是我对这个方面不是很了解，所以现在搞得头昏眼花的，不知道该选什么酶和载体，希望大家多多帮忙
在此十分感谢
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶；(2)依赖RNA的DNA聚合酶；(3)依赖DNA的RNA聚合酶；(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶，它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ，PolⅡ和PolⅢ等)；DNA聚合酶只能在有引物的基础上，即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸，这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外，还需要Mg2+ 、模板DNA和引物，迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样，上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶，它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物，并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下，在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′，5′-磷酸二酯键，其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105，由5条多肽链组成，分别命名为α，α，β，β′，和γ，全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105，由10～12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外，在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。
B、酶大部分是蛋白质、少量是RNA，故某种酶的基本组成单位是氨基酸或核糖核苷酸，B错误；
C、内分泌细胞能产生激素，活的细胞能产生酶，故能产生激素的细胞就能产生酶，C正确；
D、酶通常是蛋白质，蛋白质在低温条件下更加稳定，利于保存，而且低温不会使酶失活，因此在最适温度保存没有意义，D错误．
相同点：都能以DNA为模板，从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物，而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能，而DNA聚合酶没有，当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性，而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性，还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对，所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程；DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程
但是也有以RNA为模板的DNA聚合酶和RNA聚合酶 （也就是反转录酶和RNA依赖的RNA聚合酶）,它们的结合位点在RNA上.
也就是说，模版是谁，结合位点就在谁上。
2.结合位点就是启动合成DNA或者RNA的碱基序列，如RNA聚合酶结合位点是转录起始位点,是一段特殊的位于编码基因上游的DNA序列.这段DNA序列可以结合RNA聚合酶,从而起始转录过程.经典的RNA聚合酶结合位点是TATA box.
TATA box是编码序列前的4个碱基.在大多数生物的基因前面都有TATA着4个碱基序列的存在,它就是一个RNA聚合酶结合位点.
聚合酶就是多功能的dna的制作机器
