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Excellgen/T4 RNA Ligase 2 Truncated/EG-1053/20,000 Units
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Excellgen/T4 RNA Ligase 2 Truncated/EG-1053/20,000 Units
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DescriptionT4RNALigase2truncatedcatalyzesphosphodiesterbondformationbetweenapre-adenylated5′phosphate(DNAorRNA)andthe3′hydroxylofRNA.Thetruncatedenzymecontainingthefirst249aminoacidsisunabletoadenylatethe5´endofthesubstrate,thusitcannotligatethephosphorylated5´endofRNAorDNAtothe3´endofRNA.Suchapropertyisusefulforcertainapplicationssuchaslinkerligationswithpre-adenylated5′DNAto3′hydroxylRNA,suchasmicroRNAs.Thistruncatedenzymesignificantlyreducesunwantedbackgroundligationasitcanonlyuseadenylatedprimers.
Applications
  • Ligateapre-adenylatedDNAorRNAsequencetagtoanyRNA3´-end
  • JoinasinglestrandedadenylatedprimertosmallRNAsforCDNAlibrarycreation
  • JoinasinglestrandedadenylatedprimertoRNAforstrand-specificcDNAlibraryconstruction
SourcePurifiedfromarecombinantE.colistraincarryingtheT4phageRNALigase2Rnl2(gp24.1)(1-249)gene
Components
  • T4RNALigase2truncated:200,000units/mlinstoragebuffer:10mMTris-HCl,100mMNaCl,0.1mMDTT,0.1mMEDTA,50%glycerol,pH7.5@25°C
  • 10XT4RNALigase2truncatedBuffer:500mMTris-HCl,100mMMgCl2,50mMDTT,pH7.6@25°C
UnitDefinitionOneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoligate50%of0.4µgofanequimolarmixofasingle-stranded5′FAM-labeled17-merRNAtothe5′pre-adenylatedendofa18-merDNAwhenboth17-mersareannealedtoacomplementary35-merDNAstrandin20μL1Xreactionbufferfollowinga30minuteincubationat37°C.
QualityControl
  • Theabsenceofendo-,exodeoxyribonucleases,phosphatases,andribonucleasesconfirmedbyappropriatequalitytests.
  • Functionallytestedforthecapacitytojoincohesive-andblunt-endDNAfragments.
Storage-20°C.
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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所有产品都有正品保障,透析袋现货,为美国spectrumlabs、viskase、cellu.sep三大公司生产。 平末端/TA 连接酶预混液 货号 规格 价格 库存 #M0367L 250 次反应 ... 查看更多>
上海泽叶生物科技有限公司在发布的RNF144E3泛素蛋白连接酶144A抗体供应信息,浏览与RNF144E3泛素蛋白连接酶144A抗体相关的产品或在搜索更多与RNF144E3泛素蛋白连接酶144A抗体相关的内容。 查看更多>
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2月19日最新出版的 Cell 杂志刊发了一篇Merlin/NF2抑制肿瘤发生的机制研究论文,这一新成果成为新一期 Cell 的封面文章,主要解析了Merlin/NF2通过抑制E3泛素化连接酶从而抑制肿瘤发生的机 查看更多>
所有产品都有正品保障,透析袋现货,为美国spectrumlabs、viskase、cellu.sep三大公司生产。 T4 DNA 连接酶 货号 规格 价格 库存 #M0202L 100,000 unit... 查看更多>
2021-09-09
近日,《基因与发育》(genes & development)杂志以封面论文的形式发表了中国科学院生物物理研究所梁栋材课题组与美国诺华生物医学研究所Feng Cong研究团队、华盛顿大学教授许文清关于Wnt信号通路泛素化连接酶降解机制的最新研究成果,文章题为The SIAH E3 ubiquitin ligases promote Wnt/β-catenin signaling through mediating Wnt-i... 查看更多>
特性 可在高温条件下,连接 DNA 链上的切刻位点 具有极高的耐热性,与 PCR 反应条件兼容 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测 可通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变 概述9oNTM DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5 -磷酸末端和 3 -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶在 45 ℃-90 ℃ 范围内均有活性。 来源纯化自重组 E. coli 菌株,其携带有从极度耐热的海底超嗜热古菌(Therm 查看更多>
T4 DNA连接酶(T4 DNAligase)产品介绍及价格链接请点击T4 DNA连接酶是ATP依赖的DNA连接酶,催化两条DNA双链上相邻的5′磷酸基和3′羟基之间形成磷酸二酯键。可连接双链DNA的平末端、互补粘性末端及其中的单链切口,也能催化RNA连接到DNA或者双链RNA上,但不催化单链核酸的连接。必拓生物采用先进技术研制出高纯度、高品质的T4 DNA连接酶,媲美TaKaRa、NEB产品。必拓®T4... 查看更多>
特性 高反应效率 粘性末端和平齐末端均可连接 限制性酶切片段的克隆 将 linker 或 adapter 连接到 DNA 片段的平齐末端 室温或 16℃ 均有活性 概述该酶催化契合的双链DNA或RNA的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端 DNA 之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻(1) 。 来源纯化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8(2) 。 反应条件1 查看更多>
上海宾智生物科技有限公司在发布的512105 AIR™ Ligase 空气™连接酶供应信息,浏览与512105 AIR™ Ligase 空气™连接酶相关的产品或在搜索更多与512105 AIR™ Ligase 空气™连接酶相关的内容。 查看更多>
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DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的.

DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键最初从原核生物(大肠杆菌)分离得到的.现在生物基因工程主要是从T4噬菌体中分离得到的,
DNA连接酶 123
2017-10-03
DNA连接酶用来连接具有互补末端的双链DNA,其最适温度是37℃,但由于其在高温不稳定,所以一般是16℃连接过夜。DNA聚合酶是用来复制DNA的,在体内的最适温度是37℃,我们做PCR常用的酶也是聚合酶,其最适扩增温度是72℃。
现有DNA双链,其中一条有缺口,用T4DNA连接酶封闭缺口反应体系是什么?连接酶浓度有什么要求?
RNA聚合酶
DNA连接酶
抗体是否都有识别作用?

别回答太专业,高中生物范围之内
加入PEG8000,反应体系终浓度5%
限制性核苷酸酶与DNA连接酶都是作用于磷酸二酯键。
只不过限制性核苷酸酶是将磷酸二酯键切断;而DNA连接酶则是形成磷酸二酯键。

大家有用过Invitrogen的T4连接酶吗?说明书上是23-26度连接,一般的连接酶不都是16度吗?应该用多少度呢?另外,说明书上还说连接后为了达到更好的转化效率,应将连接反应液至少稀释5倍再转化,是这样吗?谢谢大家帮忙啊
它能识别特定的核苷酸序列吗

求有经验的大神指教,我的载体和目的基因连不上,转化不到大肠中,比例为1:3。另外,为啥胶回收后的载体浓度那么低,大约6ng/ul了,影响连接么?

有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?

有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?

有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?

.....它说连得又快又好,想问问有木有小白鼠试过它家的这两个产品呢。。如果用过能不能请教下效果咋样呢。。我之前用Thermo的T4,属于又便宜又慢效果还可以的那类型的。。(虽然说thermo也说室温30min就ok,但是还是4度过夜了,室温30min不靠谱)

所有的DNA连接酶都具有专一性
酶对所作用的底物有严格的选择性。一种酶仅能作用于一种物质,或一类分子结构相似的物质,促其进行一定的化学反应,产生一定的反应产物,这种选择性作用称为酶的专一性。
DNA的复制事实上是半不连续复制 即只有一条链的合成是连续的 这听起来很神奇 但确实是这样 连续合成的链叫做前导链 另一条链称为后随链 它的合成是不连续的 以它为模板的合成 需要一段一段地进行 所合成的片段叫做冈崎片段
产生这一现象的原因在于 DNA合成酶只能沿5'-3'的方向合成DNA 而DNA本身的两条链又是反向分布的 所以就造成了只有一条链合成可以连续地进行下去(以它为模板的子链生成方向正好是DNA聚合酶可以直接提供的) 而后随链要盘绕成回环 反扭过来 才能合成
再合成起始的时候 DNA聚合酶是需要一段RNA引物的 在原核生物中这一引物是由dnaQ(一种酶)在已解旋的单链5'端合成,真核生物中也有对应的酶 由于后随链的合成不连续 所以每个片段都要有引物 在DNA合成结束的时候 这些引物要被切除 因而留下缺口 这时又要特定的酶去填补缺口(比如 大肠杆菌中的DNA聚合酶I)可是填补序列和周围序列间会有缺刻 也就是说他们交界处的3'-5'磷酸二脂键是断开的 这时需要DNA连接酶发挥作用 将其连好
所以 后随链上的缺刻多 还真够DNA连接酶忙一阵的 前导链上只有一开始有RNA引物 因此 最后也基本只有这个地方会用到连接酶