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NEB/Quick Blunting™ and Quick Ligation™ Kits/E0542S/20 reactions
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NEB/Quick Blunting™ and Quick Ligation™ Kits/E0542S/20 reactions
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Description:

NEBofferstheQuickBlunting™andQuickLigation™Kitstogetherasabundleatavalueprice.

TheQuickBlunting™KitisusedtoconvertDNAwithincompatIBLe5´or3´overhangsto5´phosphorylated,blunt-endedDNAforefficientblunt-endligationintoDNAcloningvectors.DNAisbluntedusingT4DNApolymerase(NEB#M0203)whichhasboth3´→ 5´exonucleaseactivityand5´→3´polymeraseactivity.T4 PolynucleotideKinase(NEB#M0201)isincludedintheenzymemixforphosphorylationofthe5´endsofblunt-endedDNAforsubsequentligationintoacloningvector.Thiskitisoptimizedforbluntingupto5µgofDNAinasinglereaction.

TheQuickLigation™KitenablesligationofcohesiveendorbluntendDNAfragmentsin5minutesatroomtemperature(25°C).

KitComponents

Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:

Storeat(°C)Concentration
QuickLigationReactionBuffer-202X
10XBluntingBuffer-2010X
DeoxynucleotideSolutionMix (1 mM)-201mM
QuickLigation™ Kit-20
BluntingEnzymeMix-2020reactions

Notes:

Pleasenotestorageconditionsforindividualproducts.
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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上海宝曼生物科技有限公司在发布的T4 DNA连接酶供应信息,浏览与T4 DNA连接酶相关的产品或在搜索更多与T4 DNA连接酶相关的内容。 查看更多>
2021-08-22
连接酶(英语:Ligase,或称连结酶和结合酶)是一种催化两种大型分子以一种新的化学键结合一起的酶,一般会涉及水解其中一个分子的团。一般连结酶催化以下的反应:或有时是:其中小阶的字母代表小团。... 查看更多>
嘉美生物是一家主要从事Annexin V,信号转导抗体,重组人和动物蛋白,磷酸化抗体,各种动物ELISA试剂盒,生物实验服务等研发与销售的高科技生物公司,免费热线:400-698-4168。 查看更多>
所有产品都有正品保障,透析袋现货,为美国spectrumlabs、viskase、cellu.sep三大公司生产。 T4 DNA 连接酶 货号 规格 价格 库存 #M0202L 100,000 unit... 查看更多>
泛素蛋白酶体途径是目前己知的所有真核生物体内具有高度选择性的最为重要的蛋白质降解途径。真核细胞中泛素化修饰后的靶蛋白可能被降解、可能被转移到细胞或细胞外的特定部位,也有可能导致靶蛋白的功能发生变化,这主要取决于靶蛋白所加的泛素链的结构,以及泛素链的长短。泛素连接酶E3... 查看更多>
克劳宁(北京)生物科技有限公司在发布的T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶)供应信息,浏览与T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶)相关的产品或在搜索更多与T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶)相关的内容。 查看更多>
T4 DNA连接酶(T4 DNA ligase)产品介绍及价格链接请点击T4 DNA连接酶是ATP依赖的DNA连接酶,催化两条DNA双链上相邻的5′磷酸基和3′羟基之间形成磷酸二酯键。可连接双链DNA的平末端、互补粘性末端及其中的单链切口,也能催化RNA连接到DNA或者双链RNA上,但不催化单链核酸的连接。必拓生物采用先进技术研制出高纯度、高品质的T4 DNA连接酶,媲美TaKaRa、NEB产品。必拓®T4 DNA连接酶与NEB T... 查看更多>
北京瑞泽康科技有限公司在发布的连接酶供应信息,浏览与连接酶相关的产品或在搜索更多与连接酶相关的内容。 查看更多>
T4连接酶是由陕西脉元生物科技有限公司代理或销售的MYbiotetch品牌的试剂,产品来源于国产。陕西脉元生物科技有限公司是中国最权威的T4连接酶试剂销售服务商之一,在西安等地方销售T4连接酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业T4连接酶仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的T4连接酶产品 查看更多>
北京嘉美纽诺生物科技有限公司在发布的Fermentas公司连接酶供应信息,浏览与Fermentas公司连接酶相关的产品或在搜索更多与Fermentas公司连接酶相关的内容。 查看更多>
特性 耐热性好 可在 PCR 和连接酶链式反应过程中掺入磷酸化寡核苷酸 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测(1,3) 可通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变(4) 概述Taq DNA 连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使杂交到同一互补靶 DNA 链上的两条契合寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯键连接。这个连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 4 查看更多>
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T4连接酶123
杨小样09162021-08-04
各位大神好,我刚开始做连接,用的T4连接酶,takara的,16度连了12h,转了感受态没长菌斑,我的载体酶切后11000bp,我要连上去的片段在760bp,用的是salI和BglII双酶切后看胶图应该是没有问题,第一张图是当时酶切的图,从左至右是2kplusIIMarker,片段双酶切,片段原质粒,片段salI单酶切,片段BglII单酶切,载体双酶切,载体原质粒,载体salI单酶切,载体BglII单酶切,从图中看酶切应该是切开了,就是片段在750bp的条带有点弱,但还是有条带的。现在不太清楚是什么原因,能帮忙分析一下吗?第二张胶图是胶回收之后定量的,从左侧第一个点样孔是2kplusII的marker,第二个是片段双酶切胶回收3微升点样,第三个是载体双酶切胶回收3微升点样。连接体系是10微升,1.5的酶,1的buffer,6.5的片段,1的载体,但就是连不上,各位帮忙分析一下吗,不胜感激

它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。
连接酶有T4噬菌体DNA连接酶、T4噬菌体RNA连接酶、大肠埃希菌DNA连接酶等。DNA连接酶可连接平端,也连接粘端。反应需有Mg2+和ATP存在,pH7.5-7.6。最适温度37℃,30℃以下活性明显下降,但考虑到被连接DNa 的稳定性和粘性末端的退火温度,一般平端连接用20-25℃,粘端连接用12℃左右。
聚合酶有DNA聚合酶(以DNA为模板合成DNA大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ,大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow大片段),T4或T7噬菌体DNA聚合酶等);RNA聚合酶(以DNA为模板合成RNA,T7或T3噬菌体RNA聚合酶);逆转录酶(以RNA为模板合成DNA,除RNA病毒中发现外,发现大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ和Taq DNA聚合酶都有逆转录活性)。
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′,3′→5′外切酶活性。Klenow片段是DNA聚合酶Ⅰ被枯草杆菌酶作用产生的一个大片段,有5′→3′聚合酶和3′→5′外切酶活性,无5′→3′外切酶活性。可用于缺口翻译(Nick translation)法标记核酸,也可用于DNA序列测定,修补DNA链等。向左转|向右转

有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?

有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?

有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?

.....它说连得又快又好,想问问有木有小白鼠试过它家的这两个产品呢。。如果用过能不能请教下效果咋样呢。。我之前用Thermo的T4,属于又便宜又慢效果还可以的那类型的。。(虽然说thermo也说室温30min就ok,但是还是4度过夜了,室温30min不靠谱)


大家有用过Invitrogen的T4连接酶吗?说明书上是23-26度连接,一般的连接酶不都是16度吗?应该用多少度呢?另外,说明书上还说连接后为了达到更好的转化效率,应将连接反应液至少稀释5倍再转化,是这样吗?谢谢大家帮忙啊
E.coliDNA连接酶和T4连接酶的区别:E·coliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶 只能连接粘性末端,而平末端则要交给T4DNA连接酶了 它可以连接粘性末端也可以连接平末端。
  连接酶通常是包括“连接酶”这个字,就如DNA连接酶是将脱氧核糖核酸(DNA)片段连接。其他普遍的名称包括“合成酶”,因为这些酶是用作合成新的分子,或当它们是将二氧化碳加入一个分子时则称为“羧化酶”。
它能识别特定的核苷酸序列吗

在使用NEB的T4DNA连接酶,想请问一下平末端连接的体系和反应温度、时间,因为之前用了10微升的体系,2微升buffer,1微升载体,6微升目的片段,1微升T4连接酶,没成功,有用过的同志们帮帮忙。

RNA聚合酶
DNA连接酶
抗体是否都有识别作用?

别回答太专业,高中生物范围之内
不需要识别特定的碱基序列吗?例如用不同的限制酶切出的平末端用T4DNA连接酶都能连起来吗?
限制性核苷酸酶与DNA连接酶都是作用于磷酸二酯键。
只不过限制性核苷酸酶是将磷酸二酯键切断;而DNA连接酶则是形成磷酸二酯键。
加入PEG8000,反应体系终浓度5%
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