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更新于 2018-12-26
单位定义 限制性内切酶的一个活性单位是指，在50μl 的反应体系里，采用随酶提供的 NEBuffer，用1个小时的时间，彻底消化1μg底物DNA所需要的酶量。 酶切反应应在带盖的Eppendorf 管中进行，选用技术数据卡上所标明的适宜温度。在确定酶活性之前，浓缩的酶应该用推荐的贮存液稀释成大约1,000 单位/ml
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更新于 2018-12-26
分子生物学产品常见问题分析问题原因解决办法DNA完全没有被内切酶切割1) 内切酶失活标准底物检测酶活性2) DNA不纯，含有SDS，酚，EDTA等内切酶抑制因子将DNA过柱纯化，乙醇沉淀DNA3) 条件不适（试剂、温度）检查反应系统是否最佳4) DNA酶切位点上的碱基被甲基化换用对DNA甲基化不敏感的同裂酶酶解，重新
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更新于 2018-12-26
酶最适温度37°C%活性Apa I25°C100*ApeK I75°Cn/aApo I50°C50Bae I25°C20Bcl I50°C50BfuA I50°C25BpuE I25°C20Bsa I55°C10BsaB I60°C20BsaJ I60°C20BsaW I60°C20BsiE I60°C30BsiHK
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内切酶的稀释兼容性 实验方法
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更新于 2018-12-26
稀释限制性内切酶时，建议使用稀释缓冲液（A，B，C）。建议临用前稀释且稀释终浓度不要小于1,000 units/ml。目录及说明书中标注了每一种内切酶相应的稀释兼容性。注：以下稀释液不适用于耐热DNA聚合酶。欲了解稀释耐热DNA聚合酶的相关情况，请参见相应章节。稀释缓冲液成份：稀释液A： 50 mM KCl, 10
一种组蛋白去乙酰化酶荧光探针及其制备方法和应用
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更新于 2018-12-26
稀释限制性内切酶时，建议使用稀释缓冲液（A，B，C）。建议临用前稀释且稀释终浓度不要小于1,000 units/ml。目录及说明书中标注了每一种内切酶相应的稀释兼容性。注：以下稀释液不适用于耐热DNA聚合酶。欲了解稀释耐热DNA聚合酶的相关情况，请参见相应章节。稀释缓冲液成份：稀释液A： 50 mM KCl, 10
聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)分离血清蛋白质(三)资讯分析测试...
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更新于 2018-12-26
长时间反应时内切酶的活性保持情况因酶而异。本表中列出了在16小时内完全酶解底物DNA所需的最小酶量。实验方法：在50µl的反应体系中，分别加入1µg的单位定义底物DNA和1.00、0.50、0.25和0.13个单位的内切酶，37°C（或要求的最适温度）反应16小时。用琼脂糖凝胶电泳法来确定在1
【求助】细胞转染后大量死亡 细胞技术讨论版论坛
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更新于 2018-12-26
热失活是终止酶切反应的一种简便易行的方法。大多数最适反应温度是37℃的酶在65℃下温育20分钟即可失活。一些在65℃下不能失活的酶如将温度升高至80℃，温育20分钟也可失活。下表注明了每种酶的失活条件。在50μl的反应体系中，37℃条件下，以0.5μg小牛胸腺DNA作为底物，加入5-10μl内切酶及相应缓冲
数字PCR或为新冠疑似病人、无症状感染病人检测及确立出院标准...
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更新于 2018-12-26
Area/Well Total Area Total Cells Total Vol Conc/ml Flask cm2 /cm2 5x104/cm2 96 Well 0.35 37 4.62x105 19.5 2.4X104 24 Well 1.77 42.4 5.3x105 25 2.1X104 12 Well
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