DEAE琼脂糖凝胶CL6B_琼脂糖填料_填料_层析介质_专业生化...
| 实验方法原理 | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | DNA 试剂、试剂盒 | TE酶切缓冲液EDTA 仪器、耗材 | 电泳仪 实验步骤 | 1. 混合下列溶液于一个无菌的微量离心管中 （1）xμl DNA （2）2μl 10×酶切缓冲液 （3）18-xμl H2O 2. 加入限制性内切酶（1~5U/μgDNA）在推荐的温度温育1h（—般是37℃）。 3. 理论上，1U限制性内切酶在推荐的反应条件下，60min内可完全消化1μg纯化的样品。 4. 酶的体积应低于反应总体积的1/10，因为酶液中的甘油可以干扰反应。 5. 加入5μl电泳加样缓冲液终止反应，进行琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳。 6. 反应也可通过加入0.5μl0.5mol/lEDTA（终浓度为12.5mol/l）以螯合镁离于而终止。 7. 很多酶再65℃温育10min可被不可逆灭活，有些不能在65℃热失活的酶在75℃温育15min也能失活。 8. 如果酶对热具完全抗性，可遍过酚抽提和乙醇沉淀或通过硅基质悬浮法来纯化DNA。 |
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2019-04-22
阅读（238）
▍
相关分类
▍
相关文章
去乙酰化酶Sirtuins和细胞衰老与动脉粥样硬化的研究进展
TW02Device /Twiria /TwistDx代理品牌:TwistDx美国网
限制性内切酶HindIII的结构 分子生物 生物信息 论坛...
眼肌型重症肌无力向全身型转化的预后因素 中华神经科杂志
内切酶的稀释兼容性 实验方法
博科BKQB75II高压蒸汽灭菌器_参数_厂家报价
Telesis针式打标机,激光打标机,便携式打标机_泰尔盾（上海 ...
Millipore密理博SLHP033RB一次性针头式滤器0.45um 33..._网
真核基因转录与染色质修饰机制及转录因子间的关系
胱抑素C测定试剂盒怎么用,注意事项
韩国成人网游《Dinox》测试前首批职业截图曝光_网易游戏
什么叫Amp抗性
