请使用支持JavaScript的浏览器! Omega Bio-Tek/E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit/free-sample/D3396-00S_蚂蚁淘,【正品极速】生物医学科研用品轻松购|ebiomall 蚂蚁淘商城
商品信息
联系客服
Omega Bio-Tek/E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit/free-sample/D3396-00S
郑重提醒:
无质量问题不接受退换货,下单前请仔细核对信息。
下单后请及时联系客服核对商品价格,订单生效后再付款。
Omega Bio-Tek/E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit/free-sample/D3396-00S
品牌 / 
Omega Bio-Tek
货号 / 
D3396-00S
美元价:
(友情提示:该价格仅为参考,欢迎联系客服询价!)
数    量:
免费咨询热线
4000-520-616

Overview

The E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit offers a versatile and cost-effective method for the isolation of DNA from a wide variety of samples including fresh or frozen animal cultured cells and tissues, buccal swabs, whole blood, mouse tail snips, etc. The DNA purification process is simplified with HiBind® Mini Column technology into four quick “lyse-bind-wash-elute” steps and can be accomplished in less than 20 minutes post-lysis. This convenient spin-column format avoids time-consuming steps like alcohol precipitation, use of toxic compounds such as phenol and chloroform and allows for multiple samples to be processed in parallel. DNA purified using this kit is ready for most downstream applications such as PCR, sequencing, genotyping, southern blot analysis and restriction enzyme digestion.

  • Rapid – DNA isolation in less than 20 minutes post-lysis
  • Versatile – Single kit for multiple sample types
  • Specialized buffer system – Optimized buffers for higher yields
  • Safe – No phenol/chloroform extractions
  • High-quality – DNA is suitable for a variety of downstream applications

Specifications

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

FeaturesSpecifications
Downstream ApplicationsPCR, sequencing, genotyping, southern blot analysis and restriction enzyme digestion
Starting MaterialTissues, cultured cells, mouse tail snips, paraffin-embedded tissues, whole blood, body fluids, buccal swabs
Starting Amount30 mg, or 5 x 106 cultured cells
Elution Volume100-200 μL
DNA Binding TechnologySilica mini spin column
Throughput1-24
Processing Mode< 20="" min="">

Kit Components

ItemAvailable Separately
HiBind® DNA Mini ColumnsView Product
2 mL Collection TubesView Product
BL BufferView Product
TL BufferView Product
HBC BufferView Product
DNA Wash BufferView Product
Elution BufferView Product
Proteinase K SolutionView Product

Protocol and Resources

Product Documentation & Literature

PROTOCOL

D3396 E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit

SDS

D3396 SDS

QUICK GUIDE

D3396 Quick Guide

SALES SHEET

Product Data

Performance Comparison of E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit Against Leading Competitors

Figure 1.  Purified genomic DNA from 10 mg rat kidney tissue was isolated using kits from Company T, Company A, Company P, Company Q, and Omega Bio-tek’s E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit following manufacturer’s recommended protocols. 3% of eluted DNA was analyzed on a 0.8% agarose gel. M:Lambda-Hind III.

Real-time PCR of Genomic DNA Isolation with E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit

Figure 2.  Genomic DNA was isolated from 10 mg of rat kidney with Omega Bio-tek’s E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit. Serial dilutions of recovered genomic DNA were used as templates for real-time PCR amplification of a 100 bp fragment of the GAPDH gene with SYBR® Green labeling. Each reaction was performed in triplicate. The fluorescence versus cycle number is plotted and the 5 curves correspond to the input DNA template amounts of 10, 2, 0.4, 0.08, and 0.0016 ng.

Genomic DNA Yield From Mouse Liver

Table 1.  Genomic DNA was extracted from 30 mg mouse liver using the E.Z.N.A. Tissue DNA Kit Protocol for Tissue samples and eluted in 100 µL volume. DNA concentration was determined by optical density measurements using Thermo Scientific’s NanoDrop ™ 2000c system.

Intact, high-molecular weight DNA as analyzed on an Agarose Gel

Figure 3.  Genomic DNA was extracted from 30 mg mouse liver using the E.Z.N.A. Tissue DNA Kit Protocol for Tissue samples and eluted in 100 µL volume. 5 µL eluate was analyzed on a 1% Agarose gel.

Real-time PCR analysis of extracted DNA

Figure 4.  Genomic DNA was extracted from 30 mg mouse liver using the E.Z.N.A. Tissue DNA Kit Protocol for Tissue samples. 2 µL of Eluted DNA was diluted 10- and 100-fold and used as a template in a 20 µL SYBR® qPCR reaction. The Ct values increased by only 3 cycles per 10-fold dilution, which demonstrates that the template DNA in free of inhibitors.

Citations

View Citations
  • Pérez, L. M., Fittipaldi, M., Adrados, B., Morató, J., & Codony, F. (2013). Error estimation in environmental DNA targets quantification due to PCR efficiencies differences between real samples and standards. Folia microbiologica, 58(6), 657-662.
  • Dai, J., Wan, S., Zhou, F., Myers, R. E., Guo, X., Li, B., … & Xing, J. (2012). Genetic polymorphism in a VEGF-independent angiogenesis gene ANGPT1 and overall survival of colorectal cancer patients after surgical resection. PLoS One, 7(4), e34758.
  • Li, L., Luo, Y., Gao, Z., Huang, J., Zheng, X., Nie, H., … & Yuan, J. (2015). Molecular characterisation and prevalence of a new genotype of Cyprinid herpesvirus 2 in mainland China. Canadian journal of microbiology, 61(6), 381-387.
  • Pérez, L. M., Codony, F., Ríos, K., Peñuela, G., Adrados, B., Fittipaldi, M., … & Morató, J. (2012). Searching Simkania negevensis in environmental waters. Folia microbiologica, 57(1), 11-14.
  • Silva, F., Hernández-Miranda, E., & Brante, A. (2015). New polymorphic microsatellite markers for the pelagic fish Normanichthys crockeri. Conservation Genetics Resources, 7(2), 493-495.
  • Huang, W., Xiong, J., Yang, Y., Liu, S. M., Yuan, B. F., & Feng, Y. Q. (2015). Determination of DNA adenine methylation in genomes of mammals and plants by liquid chromatography/mass spectrometry. Rsc Advances, 5(79), 64046-64054.
  • Xu, S., Lou, F., Wu, Y., Sun, D. Q., Zhang, J. B., Chen, W., … & Wu, W. J. (2016). Circulating tumor DNA identified by targeted sequencing in advanced-stage non-small cell lung cancer patients. Cancer letters, 370(2), 324-331.
  • Ribas, A., Saijuntha, W., Agatsuma, T., Prantlová, V., & Poonlaphdecha, S. (2016). Rodents as a source of Salmonella contamination in wet markets in Thailand. Vector-Borne and Zoonotic Diseases, 16(8), 537-540.
  • Takano, O. M., Voelker, G., Gustafsson, D. R., & Light, J. E. (2019). Molecular phylogeny and novel host associations of avian chewing lice (I nsecta: P hthiraptera) from S outh A frica. Systematic Entomology, 44(2), 289-304.
  • Yu, L., Hu, Z., Gao, C., Feng, B., Wang, L., Tian, X., … & Wang, H. (2017). deletion of HPV18 E6 and E7 genes using dual sgRNA-directed CRISPR/Cas9 inhibits growth of cervical cancer cells. Int. J. Clin. Exp. Med, 10(6), 9206-9213.
  • Silva, F., Hernández-Miranda, E., & Brante, A. (2015). Development and characterization of microsatellite markers for the toadfish Aphos porosus. Conservation Genetics Resources, 7(2), 411-413.
  • Qu, F., Liu, X., Zhou, F., Yang, H., Bao, G., He, X., & Xing, J. (2011). Association between mitochondrial DNA content in leukocytes and colorectal cancer risk: a case‐control analysis. Cancer, 117(14), 3148-3155.
  • Saijuntha, W., Khumkratok, S., Wongpakam, K., Thanonkeo, S., Senakhun, C., Appamaraka, S., … & Tawong, W. (2017). Genetic diversity and population structure of blue-crested lizard, Calotes mystaceus Duméril & Bibron, 1837 (Squamata: Agamidae) in Thailand. Journal of genetics, 96(2), 377-382.
  • Wang, C., Zhou, Y., Lv, D., Ge, Y., Li, H., & You, Y. (2019). Change in the intestinal bacterial community structure associated with environmental microorganisms during the growth of Eriocheir sinensis. MicrobiologyOpen, 8(5), e00727.
  • de Dios, G., & Morató, J. (2012). Leonardo Martín Pérez, Francesc Codony, Karina Ríos, Gustavo Peñuela, Bárbara Adrados, Mariana Fittipaldi. Folia Microbiol, 57, 11-14. Alò, D., Correa, C., & Cárdenas, L. (2012). A1. 1 Abstract. Ecological impacts of invasive trout in Patagonian lakes, 155.
  • Dalton, C. S., van de Rakt, K., Fahlman, Å., Ruckstuhl, K., Neuhaus, P., Popko, R., … & van der Meer, F. (2017). Discovery of herpesviruses in Canadian wildlife. Archives of virology, 162(2), 449-456.
  • Warwick, A. R., & Lemmon, E. M. (2014). Development and characterization of 21 microsatellite loci for the Pine Barrens treefrog (Hyla andersonii). Conservation genetics resources, 6(3), 719-721.
  • Takano, O. M. (2016). Host Associations, Phylogenetics, and Biogeography of Parasitic Avian Chewing Lice (Insecta: Phthiraptera) from Sub-Saharan Africa (Doctoral dissertation).
  • Kumar, H. K. S., Gan, H. M., Tan, M. H., Eng, W. W. H., Barton, H. A., Hudson, A. O., & Savka, M. A. (2017). Genomic characterization of eight Ensifer strains isolated from pristine caves and a whole genome phylogeny of Ensifer (Sinorhizobium). Journal of genomics, 5, 12.
  • Sætre, C. L. C., Johnsen, A., Stensrud, E., & Cramer, E. R. (2018). Sperm morphology, sperm motility and paternity success in the bluethroat (Luscinia svecica). PloS one, 13(3), e0192644.
  • Zhao, X., Gu, K., Zeng, Q., Gao, L., & Cheng, D. (2019). Diagnostic Value of SjR2 Gene in Colonic Tissue from Schistosoma Japonicum Infected Hosts. Medical science monitor: international medical journal of experimental and clinical research, 25, 427.
  • Guo, N., Lou, F., Ma, Y., Li, J., Yang, B., Chen, W., … & Shi, R. (2016). Circulating tumor DNA detection in lung cancer patients before and after surgery. Scientific reports, 6, 33519.
  • Fittipaldi, M., Codony, F., Adrados, B., Camper, A. K., & Morató, J. (2011). Viable real-time PCR in environmental samples: can all data be interpreted directly?. Microbial ecology, 61(1), 7-12.
  • Xincheng, Z., Kunci, C., Xinping, Z., Jian, Z., Qing, L., Xiaoyou, H., … & Fengfang, X. (2015). Two molecular markers based on mitochondrial genomes for varieties identification of the northern snakehead (Channa argus) and blotched snakehead (Channa maculata) and their reciprocal hybrids. Mitochondrial DNA, 26(4), 555-558.
  • Chen, K. Z., Lou, F., Yang, F., Zhang, J. B., Ye, H., Chen, W., … & Jones, L. (2016). Circulating tumor DNA detection in early-stage non-small cell lung cancer patients by targeted sequencing. Scientific reports, 6, 31985.
  • JENNINGS-GAINES, J. E., EDWARDS, W. H., WOOD, M. E., FOX, K. A., WOLFE, L. L., MILLER, M. W., & KILLION, H. J. An Improved Method for Culturing Mycoplasma ovipneumoniae from Field Samples.
Format

Miniprep

蚂蚁淘电商平台
ebiomall.com
公司介绍
公司简介
蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
蚂蚁淘承诺
正品保证: 全球直采 在线追溯 蚂蚁淘所有产品都是自运营的,我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权; 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程, 确保货物的来源; 正规报关,提供13%增值税发票。
及时交付: 限时必达 畅选无忧 蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员,他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节; 同时通过在线的流程监控,蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上, 部分产品甚至能做到7-10天到货,即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购: 在线下单 简单省事 蚂蚁淘的价格是真实透明的,并且具有很大的价格优势,不需要繁杂的询价比价; 报价单与合同可以直接在线生成或打印;就像在京东购物一样, 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购,订单详情会告诉您所有进程。
售后申请: 耐心讲解 优质服务 蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时, 您可通过我的订单提交您的“申请售后”, 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理, 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线:4000-520-616。
服务名称:TALEN基因敲除大鼠定制 查看更多>
博雅辑因(北京)生物科技有限公司在发布的CRISPR/Cas9 Validated PLA2G12A sgRNA; 基因敲除sgRNA供应信息,浏览与CRISPR/Cas9 Validated PLA2G12A sgRNA; 基因敲除sgRNA相关的产品或在搜索更多与CRISPR/Cas9 Validated PLA2G12A sgRNA; 基因敲除sgRNA相关的内容。 查看更多>
细胞、细菌内基因的定点敲除、敲入 Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats(CRISPR)是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制,其中 II型 CRISPR/Cas免疫系统依赖 Cas9内切酶家族靶向和剪切外源 DNA。在这一系统中, crRNA(CRISPR-derived RNA)通过碱基配对与 tracrRNA(trans-ac... 查看更多>
博雅辑因(北京)生物科技有限公司在发布的MUC1 Knockout HeLa Cell Line; MUC1 基因敲除细胞-CRISPR供应信息,浏览与MUC1 Knockout HeLa Cell Line; MUC1 基因敲除细胞-CRISPR相关的产品或在搜索更多与MUC1 Knockout HeLa Cell Line; MUC1 基因敲除细胞-CRISPR相关的内容。 查看更多>
上海邦耀生物科技有限公司在发布的TALEN技术制备基因敲除小鼠供应信息,浏览与TALEN技术制备基因敲除小鼠相关的产品或在搜索更多与TALEN技术制备基因敲除小鼠相关的内容。 查看更多>
动物模型是现代生命科学研究的重要工具,特别是基因工程小鼠和大鼠,在基因功能研究、人类生理病理机制研究及新药研发中起着不可替代的作用。近几年来,制备动物模型的基因敲除技术主要包括传统ES基因打靶、TALEN、CRISPR/Cas9, 近期又有一项新的基因敲除技术——TetraOne... 查看更多>
上海博舜生物科技有限公司在发布的TALEN基因敲除大鼠定制供应信息,浏览与TALEN基因敲除大鼠定制相关的产品或在搜索更多与TALEN基因敲除大鼠定制相关的内容。 查看更多>
上海君伯生物科技有限公司在发布的基因敲除斑马鱼供应信息,浏览与基因敲除斑马鱼相关的产品或在搜索更多与基因敲除斑马鱼相关的内容。 查看更多>
原文链接:http://shop.edigene.com/sales.php新的一年,新的开始,博雅辑因也带着满满的诚意归来。特意准备了 100 种基因敲除细胞裂解物试用装,免费提供给广大科研人员。 申请流程: 提交申请:下载试用装申请表,填写完毕后发送到邮箱 marketing@edigene.com,邮件标题:「试用装申请+货号」; 信息审核:信息审核为 2~3 个工作日,审核通过将会通过邮件或电话直接联系您,最终确认寄送地址及... 查看更多>
赛业(广州)生物科技有限公司是TALEN技术制备基因敲除小鼠(大鼠)技术服务商之一,从事TALEN技术制备基因敲除小鼠(大鼠)已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业TALEN技术制备基因敲除小鼠(大鼠)技术服务,您可以搜索更多相关的TALEN技术制备基因敲除小鼠(大鼠)实验技术服务,以便挑选到性价比高,合适的TALEN技术制备基因敲除小鼠(大鼠)产品。而生物在线将会为您在TALEN技术制备基因敲除小鼠(大鼠)方面提供全方位的解决方案。 查看更多>
上海邦耀生物科技有限公司在发布的基因敲除和点突变大小鼠供应信息,浏览与基因敲除和点突变大小鼠相关的产品或在搜索更多与基因敲除和点突变大小鼠相关的内容。 查看更多>
基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA片段的敲除、加入等。而CRISPR/Cas9技术自问世以来,就有着其它基因编辑技术无可比拟的优势,技术不断改进后,更被认为能够在活细胞中最有效、最便捷地“编辑”任何基因。... 查看更多>
常见问题
蚂蚁淘所售产品均为正品吗?
蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生,具有十年的从业经验,在业界享有良好的口碑; Ebiomall是跨境直采平台,我们直接从厂家采购,自己的团队负责国际物流和清关,中间没有第三方,蚂蚁淘承诺所售产品仅为正品,假一罚十。
下单后可以修改订单吗?
未确认状态的订单可以修改,打开“订单详情”页面,点击右上角的“修改订单”即可,若已审核确定,则订单无法修改。
商品几天可以发货?
现货产品付款审核后即可发货,大部分期货产品在3周左右即可到货,提供时必达服务的产品订单审核十天内即可发货。
订单如何取消?
如订单处于未确定状态,进入“我的订单"页面,找到要取消的订单,点击“取消订单”按钮。
可以开发票吗?
本网站所售商品都是正规清关,均开具13%正规发票,发票金额含配送费金额,另有说明的除外。
如何联系商家?
蚂蚁淘任何页面都有在线咨询功能,点击“联系客服”、“咨询”或“在线咨询”按钮,均可咨询蚂蚁淘在线客服人员, 或拨打4000-520-616,除此之外客户可在 联系我们页面找到更多的联系方式。
收到的商品少了/发错了怎么办?
同个订单购买多个商品可能会分为一个以上包裹发出,可能不会同时送达,建议查看订单详情是否是部分发货状态;如未收到,可联系在线客服或者致电4000-520-616。
退换货/维修需要多长时间?
一般情况下,退货处理周期为客户收到产品一个月内(以快递公司显示签收时间为准),包装规格、数量、品种不符,外观毁损、短缺或缺陷,请在收到货24小时内申请退换货;特殊商品以合同条款为准。
商品咨询
crispr/cas9的介绍123
纪念死去q22021-09-08
CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御,可用来对抗入侵的病毒及外源DNA。CRISPR/Cas9 系统通过将入侵噬菌体和质粒 DNA 的片段整合到 CRISPR 中,并利用相应的 CRISPR RNAs(crRNAs)来指导同源序列的降解,从而提供免疫性。向左转|向右转
近日,中国科学家利用基因编辑技术——CRISPR/Cas9,对抑制狗骨骼肌生长的基因(MSTN)进行了敲除,培育出两只肌肉发达的“大力神”狗,成功构建了世界首个基因敲除狗模型。科研人员所使用的“基因编辑技术”,顾名思义,能够让人类对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA片段的敲除、加入等。而CRISPR/Cas9技术自问世以来,就有着其它基因编辑技术无可比拟的优势,技术不断改进后,更被认为能够在活细胞中最有效、最便捷地“编辑”任何基因。一、与诺奖“擦肩而过”的CRISPR/Cas9技术这不是CRISPR/Cas9这项明星技术第一次得到人们的关注。在此之前,有着“豪华版”诺奖之称的“2015年度生命科学突破奖”颁发给了发现基因组编辑工具“CRISPR/Cas9”的两位美女科学家——珍妮弗·杜德娜和艾曼纽·夏邦杰。二人更是获得了2015年度化学领域的引文桂冠奖——素有诺奖“风向标”之称,曾被认为是今年诺贝尔化学奖的最有力竞争者。那CRISPR/Cas9到底是一项什么技术,为何能够获得如此这般青睐,又何以在短短两三年时间内,发展成为生物学领域最炙手可热的研究工具之一,并有近700篇相关论文发表?它将来又会如何影响到我们的生活?CRISPR/Cas9是继“锌指核酸内切酶(ZFN)”、“类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)”之后出现的第三代“基因组定点编辑技术”。与前两代技术相比,其成本低、制作简便、快捷高效的优点,让它迅速风靡于世界各地的实验室,成为科研、医疗等领域的有效工具。
做黄单胞,在通过Tn5构建转化子库之后,通过致病力筛选、Tail-PCR获得侧翼序列、比对获得全基因之后,将几个可能与致病力相关的基因做了敲除,现在正在构建互补载体,已经做了敲除转化子的胞外酶活性测定、胞外多糖分泌测定、生长曲线、致病性测定等等,不过不知道将互补做完了之后还有什么可以做的。
通过敲除来研究基因的功能,所谓的敲除不外乎有三种情况:1)单交换插入抗性基因使原基因失活;2)抗性基因双交换替换掉原基因;3)同框缺失即完整的使原基因敲除掉。
第三种情况得到的突变株比较好但筛选工作量很大,前两种情况因为插入了抗性基因比较好筛选突变子,但是由于外源的插入了抗性基因容易引起polar effect,所以拿到突变株后要做回补实验来排除是由polar effect引起的,如果是第三种情况得到的突变株不做回补也没关系,做了会更好。
基因敲除是上个世纪90年代出现的最新外源DNA导入技术。分为完全基因敲除和条件基因敲除。
基因敲除技术的产生和发展建立在胚胎干细胞技术和同源重组技术成就的基础之上,自身发展的同时也促进了相关技术的进一步发展。流程大概是这样的:首先获得小鼠ES细胞系,测试ES细胞嵌合入受体囊胚的能力之后根据不同基因、不同目的设计并构建打靶载体,将打靶载体转入一定数目ES细胞中,然后鉴定出带有发生正确同源重组的突变中靶ES细胞。通过显微注射或者胚胎融合的方法将经过遗传修饰的ES细胞引入受体胚胎内。经过遗传修饰的ES细胞可以发育为嵌合体动物的生殖细胞,是的经过修饰的遗传信息经生殖系遗传,从而得到带有修饰基因的突变小鼠,而后可以对其进行表型分析。
目前,在ES细胞中进行同源重组已经成为一种研究特定基因甚至基因的特定结构域和对小鼠染色体组上任意位点进行遗传修饰的常规技术。1997年通过基因打靶获得的突变小鼠就已经超过千种,近年来随着基因敲除技术的不断进步,尤其是DNA重组技术和小鼠基因组测序的完成,使得建立基因敲除小鼠的周期大大减少,使基因敲除小鼠数目大大增加。各国也都建立了突变体小鼠及转基因小鼠的数据库。
06年8月七日,美国国立卫生研究院宣布将投巨资启动敲除小鼠基因组计划,目的是建立一个完善、免费的小鼠基因组突变基因数据库,研究人员可以利用基因敲除小鼠研发能为治疗癌症、心脏病、神经退行性疾病、糖尿病等人类遗传疾病提供更为优秀的动物模型。展开
Crispr/cas9是第三代基因敲除技术,上半年频繁发表于Science,Nature等杂志。由于老板有想法做基因敲除,现在在研究这方面的文献。发现其中有很多问题,本人研二,吧里有没有其他人感兴趣。一起交流!QQ415968281
我自己尝试做了好几次基因敲除,效果都不好,想着干脆直接送出去算了,不知道行不行?
这是个理解的问题目的基因与质粒结合利用了碱基互补配对但质粒进入受体细胞不需要碱基互补配对即使整合到染色体的dna上你也只能说整合过程利用了碱基互补陪读而不是那个导入过程
基因敲除动物模型怎么做利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。直到现在,运用基因同源重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法。2.诱导性基因敲除也是以Cre/loxp系统为基础,但却是利用控制Cre表达的启动子的活性或所表达的Cre酶活性具有可诱导的特点,通过对诱导剂给予时间的控制或利用Cre基因定位表达系统中载体的宿主细胞特异性和将该表达系统转移到动物体内的过程在时间上的可控性,从而在1oxP动物的一定发育阶段和一定组织细胞中实现对特定基因进行遗传修饰之目的的基因敲除技术。人们可以通过对诱导剂给予时间的预先设计的方式来对动物基因突变的时空特异性进行人为控制、以避免出现死胎或动物出生后不久即死亡的现象。常见的几种诱导性类型如下:四环素诱导型;干扰素诱导型;激素诱导型;腺病毒介导型。
细胞器的观察实验——电镜切片资讯123
冰雨的冰雪世纪2021-07-31

问下各位大神,用在线设计的软件找PAM后,还需要找functiondomains,从而排除一些PAM吗?有没有一些比较好的在线设计网站。

cas9123
2017-10-01
什么是CRISPR/CAS9技术?什么是CRISPR/CAS9文库
CRISPR(clustered,regularlyinterspaced,shortpalindromicrepeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫机制。在细菌及古细菌中,CRISPR系统共分成3
类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共同发挥作用,而Ⅱ类系统
只需要一种Cas蛋白即可,这为其能够广泛应用提供了便利条件。
目前,来自Streptococcuspyogenes的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9蛋白(含
有两个核酸酶结构域,可以分别切割DNA两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合
成复合物,然后通过PAM序列结合并侵入DNA,形成RNA-DNA复合结构,进而对目的
DNA双链进行切割,使DNA双链断裂。
由于PAM序列结构简单(5’-NGG-3’),几乎可以在所有的基因中找到大量靶点,因此得到广泛的应用。CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞,是目前最高效的基因组编辑系统。

请教各位大神,CRISPR/Cas9基因敲除的小鼠(完全性敲除)构建后,鉴定的方法是不是只要PCR扩增进行基因型鉴定就可以了?核型鉴定及southernblot检测需不需要呢?谢谢!

品牌分类