【求助】如何用流式抗体做免疫荧光? 免疫学讨论版论坛
| 提供商： | 上海邦耀生物科技有限公司 |
| 服务名称： | TALEN技术制备基因敲除小鼠 |
一、技术原理
TALEN（transcriptionactivator-like(TAL)effectornucleases）靶向基因敲除技术是一种崭新的分子生物学工具。研究发现，植物细菌Xanthomonassp.的TAL蛋白的核酸结合域的氨基酸序列与其靶位点的核酸序列有恒定的对应关系。利用TAL的序列模块，可组装识别任意DNA序列的模块化蛋白和重组核酸酶，在特定位点打断目的基因DNA序列，进而在该位点进行DNA操作，如Knock-out、Knock-in或点突变。该技术克服了ZFN方法不能识别任意目标基因序列，以及识别序列经常受上下游序列影响等问题，从而使基因敲除变得更加简单方便。目前已成功的应用到细胞、酵母、植物、斑马鱼、小鼠、大鼠等模式生物中，大大缩减项目的研究周期。
二、TALEN技术特点
1、无基因序列、品系限制，几乎可敲除任意基因。
2、实验设计简单准确、实验周期短、成本低。
3、毒性低、脱靶情况少；成功率几乎可达100%。
2、实验设计简单准确、实验周期短、成本低。
3、毒性低、脱靶情况少；成功率几乎可达100%。
4、TAL的核酸识别单元与A、G、C、T有恒定的对应关系。
5、可识别任意目标基因序列，且不受上下游序列影响，具有ZFN相等或更好的活性。
5、可识别任意目标基因序列，且不受上下游序列影响，具有ZFN相等或更好的活性。
三、服务流程及周期
1、TALEN质粒构建、活性检测、显微注射、Founder检测
2、提供3只以上F1代小鼠
3、Fouder仅需2个月、F1代最快仅需4个月
获得F1代杂合子小鼠后，完成基因敲除PCR鉴定，提供不少于3只F1代杂合子小鼠，通知委托方领取小鼠。
四、部分成功案例
| 基因 | 品系 | KO/KI | 方法 |
| Lepr | C57BL/6 | KO | TALEN |
| Lepr | FVB/N | KO | TALEN |
| Pak1ip1 | C57BL/6 | KO | TALEN |
| Gpr55 | FVB/N | KO | TALEN |
| Rprm | C57BL/6 | KO | TALEN |
| Fbxo6 | C57BL/6 | KO | TALEN |
| Smurf1 | C57BL/6 | KO | TALEN |
| Tmem74 | C57BL/6 | KO | TALEN |
| Wdr20a | C57BL/6 | KO | TALEN |
| Dcaf13 | C57BL/6 | KO | TALEN |
| Fam73a | C57BL/6 | KO | TALEN |
| Th | FVB/N | KO | CRISPR-Cas |
| Th | B6 | KO | CRISPR-Cas |
| Rheb | B6 | KO | CRISPR-Cas |
| Uhrf2 | FVB/N | KO | CRISPR-Cas |
| Mc3r | Sprague-Dawley | KO | CRISPR-Cas |
| Mc4r | Sprague-Dawley | KO | CRISPR-Cas |
| Lepr | Sprague-Dawley | KO | CRISPR-Cas |
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2018-07-08
阅读（234）
▍
相关分类
▍
相关文章
▍
相关问答
