
Description
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LIPID-basedInVivoTransfectionKit
siRNAandplasmidDNAinvivodeliveryreagent
ModesofadmiNISTration:
- Systemicintravenous(i.v.)injection
- Directintratumoral(i.t.)injection
- Intraperitoneal(i.p.)injection
Altogen’sLIPID InVivoTransfectionReagent
- Cationiclipidliposome-basedreagent
- Lipidconjugatedcomplexesarestableinserumfor16h
- Efficientdeliverytotheliver,pancreas,kidney,andcertaintumortypesviasystemicadministration
- EfficientsiRNAandplasmidDNAdeliveryviadirectsubcutaneoustumorinjection(varioustumortypes)
- Functionallytestedinmice
- ApplicableforplasmidDNA/siRNAco-injection
- DownloadLIPID-basedinvivotransfectionprotocol:[PDF][Word]
- DownloadPowerPointpresentationforLIPID-basedinvivotransfectionkit:[PPT]
- DevelopedandmanufacturedbyAltogenBiosystems
DATA
Figure1.Systemicadministration(i.v.)ofLipid-basedInVivoreagentconjugatedwithsiRNAtargetingLaminA/CmRNAornon-silencingcontrolsiRNAfollowingtherecommendedprotocol.TissueswerecollectedandRNAisolated48hoursafterfirstinjection.SampleswereanalyzedbyqRT-PCRforLaminA/Cgeneexpressionlevels.RibosomalRNAlevelswereusedtonormalizetheLaminA/Cdata.Dataaremeans±SD(n=6).
Figure2.Intratumoraladministration(i.t.)ofLipid-basedInVivoreagentconjugatedwithsiRNAtargetingLaminA/CmRNAornon-silencingcontrolsiRNAfollowingtherecommendedprotocol.TissueswerecollectedandRNAisolated48hoursafterfirstinjection.SampleswereanalyzedbyqRT-PCRforLaminA/Cgeneexpressionlevels.RibosomalRNAlevelswereusedtonormalizetheLaminA/Cdata.Dataaremeans±SD(n=6).
Figure3. Systemicadministration(i.v.)ofLipidInVivoTransfectionReagentconjugatedwith80ugofchemicallymodifiedsiRNAtargetingLaminA/CmRNAornon-silencingcontrolsiRNAfollowingtherecommendedprotocol.Tissues(Liver,Brain,Muscle,Kidney,Tumor,Heart,Spleen,Lung)werecollectedandtotalproteinfractionisolated72hoursafterfirstinjection.SampleswereanalyzedbyWesternBlotAnalysisforLaminA/Cgeneexpressionlevels.
SelectedLipidTransfectionReagent citationreferences:
- JBiolChem.2017292(2):407-416.ProteinPhosphotyrosinePhosphatase1BinCalpain-dependent…Zhangetal[PDF]
- JVirol.2015;89(23):11761-72.MutationalDisruptionofcis-ActingReplicationElement2CinSmitheeSetal[PDF]
- AmJPathol.2016.186(9):2326–2336.Ubiquitin-ConjugatingEnzyme9PhosphorylationasaNovelMechanismforPotentiationoftheInflammatoryResponse.Tomasietal[PDF]
- VirusRes.2016Jul15;220:136-49.ReversiontowildtypeofamutatedandnonfunctionalcoxsackievirusB3CRE(2C).Smitheeetal[PDF]
- NatureBiotechnology.201129(4):341-5.DeliveryofsiRNAtothemousebrainby…Alvarez-Ervitietal [PDF]
AllALTOGEN® INVIVO TransfectionKits suppliedwithready-to-runtransfectionprotocolsthateliminatetheneedforextensivetransfectionoptimizationexperiments.Readmore abouttransfectiontechnologyatAltogen’s TransfectionResource.
LIPIDInVivoTransfectionReagent
AltogenResearchServices:
AltogenLabsoffersGLP-compliantcontractresearchstudiesforpreclinicalresearch,INDapplications,anddrugdevelopment.BIOLOGycontractresearchservicesinclude:xenograftservices(over60validatedxenograftmodels),developmentofstablecelllines,ELISAassaydevelopment,cell-basedandtissuetargetedRNAistudies,safetypharm/toxassays,andotherstudies(visitAltogenLabs.com).
VolumeOptions:
- 0.5ml–10injections(Catalog#5010)
- 1.5ml–30injections(Catalog#5011)
- 8.0ml–160injections(Catalog#5012)
AltogenBiosystems是一家开发和制造用于生命科学研究,药物发现和开发的转染试剂盒的生物技术公司。转染试剂盒针对特定癌细胞系和原代细胞培养进行了优化,可将生物分子有效递送到靶组织中。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现体外(癌细胞系)和体内(动物组织靶向试剂、癌细胞系)递送货物分子,包括质粒DNA,各种类型的RNA(mRNA,siRNA,shRNA,microRNA),蛋白质和小分子研究。
Altogen生命科学公司致力于研发,生产和销售特定细胞系的转染试剂,用于细胞间生物分子的传递,并通过对转染试剂类型的设计将siRNA和质粒DNA有效地转入不同的细胞系和原代细胞内。Altogen公司开发的聚合物,脂质体,纳米粒子为基础的转染技术分别针对分子生物学,组合化学,和细胞生物学而分别应用。Altogen定制服务提供符合GLP要求定制研究服务,包括代稳定的细胞系,细胞银行和冷冻保存,焦磷酸测序,克隆,RNA干扰(RNAi)和基因沉默服务,发展分析,siRNA文库筛选,并转染服务。稳定的肿瘤细胞株和原代细胞的产生,可以是非常昂贵和费时。该公司的细胞培养科学家的细胞株的选择,无论是利息或shRNA表达载体的稳定表达的基因改造。标准的RNAi技术服务,包括设计与合成的siRNA的利益,验证siRNA的沉默效率,siRNA转染条件的优化,使高效的基因沉默细胞系或原代培养细胞的靶基因。转染培养细胞的瞬时或稳定的引入外源性分子和遗传物质(即RNA或DNA),通常是在生物实验室用来研究基因功能,基因表达的调节,生化映射,突变分析,和蛋白质的生产。科学家利用各种载体分子,这种分子,使质粒DNA(PDNA),信使RNA(mRNA),短干扰RNA(siRNA),小分子RNA(miRNA)的,并进入肿瘤细胞株和原代细胞的蛋白质的基因交付。不幸的是,无单提货的方法或转染试剂,可以适用于所有类型的细胞,细胞的细胞毒性和转染效率显着不同,取决于试剂,协议,并正在利用细胞类型。Altogen生物系统公司提供超过60种类型的细胞的预优化转染试剂盒。纳米粒子,脂质和聚合物基ALTOGEN®在体内转染试剂,使交付功能的RNA和DNA分子在体内。PEG脂质体在体内输送系统减少由于PEG修饰的先天免疫反应,并提供高效的siRNA转染的DNA,并在体内的蛋白质。由科学“杂志(2010年12月17日):PEG脂质体在体内转染试剂盒siRNA的特色Altogen生物系统功能的特定细胞系转染试剂盒
120+细胞转染试剂和活体组织靶向试剂盒制造商AltogenBiosystems是一家生物技术公司,开发和制造用于生命科学研究、药物发现和开发的转染试剂盒。Altogen®体内转染试剂可有效地将生物分子导入靶组织。细胞转染试剂盒针对特定的癌细胞系和原代细胞进行了优化。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现货物分子(DNA、RNA、蛋白质)的高效传递。AltogenBiosystems利用高分子化学、分子和细胞生物学的专业知识,开发了新的体内外给药技术。转染是将外源分子导入培养细胞中,常用于研究基因功能、基因表达调控、生化定位和蛋白质生产。不幸的是,由于细胞毒性和转染效率的差异很大,并且取决于所使用的试剂、方案和细胞类型,因此没有一种单一的传递方法或转染试剂可应用于所有类型的细胞。AltogenBiosystems为120多个癌细胞系和原代细胞类型提供优化的转染试剂盒和电穿孔产品。体内转染试剂可实现组织靶向给药。Altogen的转染试剂盒包括用于体外(癌细胞系)和体内(用于动物研究的组织靶向试剂)转染的转染增强剂试剂和转染复合物冷凝器。Altogen实验室提供符合GLP的实验室合同研究服务。我们的生物CRO服务包括异种移植物的疗效、IND应用的pharm/tox研究和安全性测试、分析开发(ELISA、IC-50、qPCR)、90多个异种移植物动物模型、RNAi和基因沉默服务。Altogen的细胞培养科学家通过在28天内培育出稳定的细胞系,将选择的细胞系转化为稳定表达感兴趣的基因。
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有战友对比过罗氏X-tremeGENEDNATransfectionReagent和lipofectamine3000的优劣吗?求解答
质粒转染一般是说DNA转染,用常用的sinofection等转染试剂就可以;
小干扰RNA(Small interfering RNA;siRNA)有时称为短干扰RNA(short interfering RNA)或沉默RNA(silencing RNA),是一个长20到25个核苷酸的双股RNA,这种RNA的转染需要用专门的RNA转染试剂。
—DNA转染试剂Polyjet-适用于普遍的哺乳动物细胞
LipoD293-适用于悬浮细胞的转染(包括昆虫细胞SF9)-对于普遍的哺乳动物细胞具有更优异的转染效率
—DNAandsiRNA转染试剂
Lipojet-适用于大多数哺乳动物细胞的转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/RNA共转染(co-transfection)-效果优于Lipofectamine2000
—siRNA转染试剂
GenMute-适用于大多数哺乳动物细胞转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/siRNA共转染(co-transfection)PepMute-适用于普遍的哺乳动物细胞的转染
对重复性要求不高的试验,一般没有问题的,只不过可能需要增加一些转染试剂用量了。
为了避免这个问题,推荐收到货之后,进行适当分装,用多少,拿出来多少最好。
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。

