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LifeSensors/DU4802-50µg Di-Ubiquitin K48-2/DU4802-50µg Di-Ubiquitin K48-2
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IQFDiUbTechnology

LifeSensors’sdiubiquitinsubstratesrepresentanewclassofsubstratesforthecontinuousfluorescentmeasurementoftrueisopeptidaseactivity.TheC-terminusofwildtypeubiquitinisconjugatedviaanisopeptidebondtolysine48(K48)ofasecondubiquitinmoleculewiththeresultantdiubiquitinforminganinternallyquenchedfluorescentFRETpair(IQF).Eachubiquitinislabeledwithasinglemoleculeofeitherafluorescentreporter(i.e.TAMRA)orahighlyefficientquenchingdye.CleavageoftheIQFDiUbbydeubiquitylasesleadstoseparationofthefluorophorefromquencherandsubsequentincreaseinobservedfluorescence.

IQFDiUbVariants

ThereisaremarkabledifferencebetweenK48-andK63-linkedubiquitinmoleculesintheirthree-dimensionalstructure,whichaccountsfortheirindividualfunctions.Beyonddifferentiallinkages(e.g.K48,K63,K11),LifeSensorshascreatedsubpanelsofIQFdiubiquitinsubstrateswithineachlinkage. BecauseeachDUBislikelytorecognizeandcleavesubstrateswithuniquestericconsiderations,thesesubpanelsvaryinlocationofreporterfluorophoreandquencher. WerecommendthateachDUBbeempiricallyevaluatedagainstapanelofIQFDiUbsubstratestoselectthetheoptimalfluorophore/quencherpairing.

IQFDiUbsubstratepanels

InordertoefficientlydeterminetheoptimalsubstrateforanyDUB,orrapidlyassessapanelofvariousDUBs,LifeSensorsofferscomprehensivepanelsforeitherK48 (DiUb48panelcatno.DU0101) orK63linkeddiubiquitins  (DiUb63PanelDU0102).Eachpanel containallsixvariantsoftherespectivelinkagealongwithacontrolenzyme(USP2core).Inadditionthereisalsoafull(K48/K63) panel (DU0201) thatcontainsall12variants.

Needbulkquantities?Wewouldbehappytoworkoutacustompricethatfitsyourbudget.Pleaseemail info@lifesensors.com formoreinformation.

ThisproductiscoveredbyUSpatent#8,518,660Bypurchasingthisproduct,thepurchaseragreestocomplywiththetermsofour LimitedUseLabelLicense.



Info


Amount50µg
StateLiquid
Concentration20µM
Buffer50mMSodiumMES,pH6.0
Variant2
Linkage

K48

Molecularweight18,548.4+/-18Da
FluorescentreadoutTAMRA
StorageIQFDiUbsarestablefor4-6monthsat4ºC.Longterm(>6months)storageat-80ºCisrecommended.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.



Applications


  • Kineticcharacterizationofdeubiquitylases(DUBs)
  • DemonstrationofnovelDUBactivityand/orlinkagespecificity
  • MonitoringofheterologousDUBproduction/purification
  • Highthroughputscreening(HTS)forantagoNISTsoragonistsof deubiquitylaseactivity
  • Additionalmaterialsrequired(forfurtherdetails,pleaseseemanual): 
    • 384-(GreinerBioOne781209) or96-well(655076)blackplatesorequivalent
    • Fluorescentplatereader
    • FiltersormonochromatorsformonitoringfluorescenceofTAMRA(Ex540nm,Em580nm)
    • Dichroicmirrorwitha550-570nmcutoffisrecommendedforoptimalsignal-to-background

Benefits

  • MoreBIOLOGicallyrelevantsubstratecomparedtotrADItionalmono-ubiquitinderivatives.
  • FluorophoresareNOTattheN-orC-terminus,modificationsknowntoperturbubiquitinstructure.
  • AvarietyoflinkagesandfluorophorepositioningavailableforoptimalactivityofyourDUBofinterest.
  • Validatedinboth96-welland384-wellformat.


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2021-08-28
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达沙替尼片,用于治疗对甲磺酸伊马替尼耐药,或不耐受的费城染色体阳性(Ph )慢性髓细胞白血病(CML)成年患者。... 查看更多>
位点特异核酸内切酶涉及核酸生物化学的许多方面。限制酶及相关酶已成为作用于 DNA 的酶的典范。通过理性蛋白设计,投入了无数的精力试图改变其特异性。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。 查看更多>
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Caspase全称为含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase)。caspase是一组存在于细胞质中具有类似结构的蛋白酶。Caspase与真核细胞凋亡密切相关,并参与细胞的生长、分化与凋亡调节。... 查看更多>
产品名称: 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA Kit(elisa试剂盒) 国内优质ELISA厂家 产品简介: 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA Kit(elisa试剂盒) 国内优质ELISA厂家 ELISA试剂盒 国产现货 SIXIN生产的优质ELISA试剂盒直供全国。http://www.aatbio.com.cn/elisa/ 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA Kit(elisa试剂盒) 国内优质ELISA厂家 进 查看更多>
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胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,这对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。
胶原酶按其存在的方式不同可分为人体内源性胶原酶和药用胶原酶两种。人体内源性胶原酶是指人体内部本身所具有的胶原酶,如牙龈、触膜等上皮组织和关节滑膜、椎间盘内都不同程度的存在着这种胶原酶,它在体内胶原蛋白的分解过程中发挥着不可或缺的作用。药用胶原酶是指利用生物制药的高科技手段从溶组织梭状芽孢杆菌的发酵液中提取、纯化并精制而得的白色或类白色无菌冻干粉针生物制剂。
灭活酶到底是什么呀?定义是什么啊?其作用机制勒?谢谢哟~
什么是酶类药物
酶在生活中的应用123
mengting100102018-03-29
用得最频繁的估计应该是以下几种:
1、洗碗用的洗洁精,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
2、洗头用的洗发水,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
3、洗澡用的沐浴露,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
4、洗衣用的洗衣粉或洗衣液,含有多种酶,比如脂肪酶、蛋白酶等

除了以上用的频繁外,还有一些可能用到的,
比如某些促进消化的药片,含有脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶等
厨房用的嫩肉粉,含有蛋白酶等
我认为人体自身的酶带有标记,比如特殊的肽段,酶相互之间可以识别,不会分解自身的酶
是不是别构酶自己变构,共价调节酶让别的酶给他变构?

炎性体(inflammasome)是细胞内的一类多蛋白复合物,在炎性反应中发挥着至关重要的作用。炎性体包括半胱天冬酶-1(caspase1)、PYCARD和NALP,有时也包括半胱天冬酶-5(caspase5,也被称作半胱天冬酶-11或ICH-3)。它是在骨髓细胞(myeloidcell)中产生的,也是先天性免疫系统的一个组分。炎性体的确切组成依赖于启动炎性体组装的激活物,如双链RNA和石棉会引发不同的炎性体组成。炎性体促进炎性细胞因子IL-1β和IL-18成熟。

在一项新的研究中,来自比利时法兰德斯生物技术中心/根特大学(VIB/UGent)的LieselotteVandeWalle博士、DanielJiménezFernández以及教授MoLamkanfi研究团队对半胱天冬酶-12(caspase12)的功能产生新的认识。基于此,他们打破了这个领域对半胱天冬酶-12的固执观念:半胱天冬酶-12是炎性体的负调节物。这些新的认识为研究人员挣脱现有的研究路线和鉴定它的真正生理学功能铺平道路。相关研究结果发表在2016年6月2日那期Nature期刊上,论文标题为“Doescaspase-12suppressinflammasomeactivation?”。

研究人员也指出这将需要进行大量的“重新研究(re-researching)”。之前所谓的半胱天冬酶-12在细胞死亡、应激反应、疟疾和败血症等中的作用---引用了9000多次---必需复核,这是因为这些作用经常是基于不正确的小鼠模型得出的。

VIB/UGent教授MoLamkanfi说,“我们发现在很多情形下,对半胱天冬酶-12的研究是基于对半胱天冬酶-11(caspase11)和半胱天冬酶-12都进行基因敲除的小鼠模型开展的。因此从研究结果中推断半胱天冬酶-12的作用是不可能的。我们如今引入新的选择性半胱天冬酶-12基因敲除小鼠,这应当能够让我们追踪半胱天冬酶-12的确切功能。”

利用这些新的小鼠,Lamkanfi团队证实在体外模拟的BMDM(bonemarrow-derivedmacrophage,骨髓衍生性巨噬细胞)和体内接种的小鼠中,半胱天冬酶-12缺乏都不能增加半胱天冬酶-1激活。剔除半胱天冬酶-12也不会增强炎性体途径释放出成熟的IL-1β和IL-18。他们的发现表明不论半胱天冬酶-11的表达状态如何,半胱天冬酶-12都不会作为半胱天冬酶-1激活的生理学上负显性调节物,因而也不会作为炎性体的生理学上负显性调节物。

近来做构建,经常用KpnI和BamHI做双酶切,但这两个酶的酶切条件不同,KpnI为Lbuffer37度,BamHI为Kbuffer30度,我师兄建议我用单酶切,费时费力,后来我用双酶切发现效果也很好.
反应体系如下:
plasmid10ul
10xKbuffer5ul
KpnI1ul
BamHI1ul注意千万不可多加总酶量必须<4%
ddH20upto50ul
总体积改变加酶量按比例改变.
异柠檬酸酶辅酶分NAD和NADP并且“依赖NAD作为辅酶的异柠檬酸酶”只存在于线粒体内

那糖酵解中依赖NAD的酶不是要在线粒体内反应?
逆转录酶很强大:具有RNA指导DNA合成的5'-3‘聚合活性,DNA指导的DNA的5’-3‘活性,RNaseH活性,因此,逆转录一般不再需要其他酶参与。

明白了么,少年?
会导致吃下去的食物消化了也无法吸收或者吸收的很慢,进而导致人体出现健康问题。没是一种高效催化剂,食物在进行基本消化后还要在酶的帮助下才能被分解成基本单位物质(如葡萄糖,氨基酸,脂肪酸等),而且要在酶的帮助下吸收。
不好意思问题有点长,需要专业的朋友给个意见!