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MCLAB/2X HoTaq™ SYBR Green One-Step Real-Time RT-PCR Kit/HTSRT-100/1 Ea
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MCLAB/2X HoTaq™ SYBR Green One-Step Real-Time RT-PCR Kit/HTSRT-100/1 Ea
品牌 / 
MCLab
货号 / 
HTSRT-100
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TheMCLAB"sHoTaq™SYBRGreenOne-StepRT-PCRKitallowsresearcherstoperformSYBRGreenbasedRT-qPCRinasinglestepwithinasingletube.ThekitutilizesourownproprietaryengineeredQuantumScriptHDreversetranscriptaseandhot-startTaqDNApolymerase.Noadditionalreagentsorstepsarerequiredonethereactionisinitiated.ThekitenablesthequantificationofspecificRNAtargetswithhighsensitivity,unparalleledconvenience,andwidedynamicrange.

Description:
RT-PCRiswidelyusedformeasuringgeneexpressionintissuesamplesorcellculturesystems.TrADItionally,itisperformedintwoseparatereactionsteps.First-strandCDNAisreverse-transcribedfromtotalRNAorpoly(A)+RNAusingareversetranscriptase.Next,thecDNAisamplifiedbyPCRusingaDNApolymeraseinanotherreaction.

TheMCLAB'sHoTaq™SYBRGreenOne-StepRT-PCRKitallowsresearcherstoperformSYBRGreenbasedRT-qPCRinasinglestepwithinasingletube.ThekitutilizesourownproprietaryengineeredQuantumScriptHDreversetranscriptaseandhot-startTaqDNApolymerase.Noadditionalreagentsorstepsarerequiredonethereactionisinitiated.ThekitenablesthequantificationofspecificRNAtargetswithhighsensitivity,unparalleledconvenience,andwidedynamicrange.

Thetechniquereducestheriskofcross-contaminationandminimizestheuseofreagents.ThismethodisparticularlyusefulforapplicationsinwhichtheexpressionofasmallnumberofgenesthatmustbeanalyzedinmanydifferenttotalRNAsamples,androbustlyamplifyinghigh-abundancetranscriptsfromcrudetotalRNApreparations.

Application:
-GeneExpressionAnalysis
-Genotyping
-Real-TimePCR

Primerandprobedesign: 
Toachievethebestperformance,appropriatesoftware,suchasABIPrimerExpress™,shouldbeused.

RecommendedReactionConditions:
Onecycleat50°Cfor10to30minutes *;
Onecycleat95°Cfor10minutes;
Followedby40cyclesof:95°Cfor15seconds,60°Cfor1minute #;
4°Chold(optional)
* ReactiontimecouldbeadjustedaccordingtoRNAinput.
# Cyclenumberandannealingtemperatureareexperimentdependent.

RecommendedStorageCondition: -20°C

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2018-12-26
Her2 or ERBB2 belongs to a class of proteins having high homology with epidermal growth factor receptor (EGFR or ERBB1). It encodes a protein with the molecul 查看更多>
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分子生物学是在生物化学基础上发展起来的,以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科,在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程(基因技术,基因重组)是目前分子生物学研究热点,这些技术可以改造或扩增基因和基因产物,使微量的研究对象达到分析水平 查看更多>
2017-10-23
复旦大学定量PCR国际招标公告(1)0613-174023073720/02 查看更多>
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2021-08-11
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定量PCR(即时聚合酶链锁反应,Real-time Polymerase Chain Reaction,简称 Real-time PCR、即时PCR),又称定量即时聚合酶链锁反应(Quantitative real time polymerase chain reaction,简称 Q-PCR/qPCR/rt-qPCR、定量即时PCR、即时定量PCR),是一种在DNA扩增反应中,以萤光染剂侦测每次聚合酶链锁反应(PCR)循环后产物总量的方法... 查看更多>
新年新气象,金鸡送福利,2017鸡年“鸡”及向上,然泰携手本公司实验室全体技术服务专业人士,新年大回馈,意想不到的折扣,意想不到的惊喜,还在等什么,为自己的实验室的研究工作置办一次不一样的年货吧! 关于实验室技术服务,上海然泰价格优惠、品种齐全、服务周到,你想要的,我们一定备好产品,尽我们努力的可能说到做到,让你能放心准备自己手头的实验。 酶联免疫(ELISA)技术服务 上海然泰公司——依托复旦大学,集研发、销售、实验室技术服务于一体 查看更多>
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Taq DNA聚合酶使用说明书123
姆姆EH172017-10-03
1单位(U)Taq DNA 聚合酶力定义74°C、30钟内性化马哈鱼精DNA作模板/引物10nmol脱氧核苷酸掺入酸容物质所需酶量图" class="ikqb_img_alink">
我明年就毕业了,可是论文还没投,快急的不行了,做的实时荧光绝对定量PCR,跑标曲带样用的Bio-RadIQ5机子,可是结果出来不知道分析的是哪个指标(ct,ctmean,sq,sqmean,logsq),不会处理数据,求高人指点啊,拜托了拜托了,好人好报啊
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。|||原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光。反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳。结果:荧光定量可以实现精确定量,普通pcr则不行。荧光定量体现可以看到整个扩增过程,可以看到扩增效率,溶解温度,直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的。|||这个还真不大清楚|||貌似前者是定量,后者属于半定量。|||简单的讲PCR技术最早是用于扩增一段特异的PCR片段,用于克隆、测序等实验,后来也将其用于样本中特异的PCR片段有无或非很粗的相对定量,而荧光定量PCR技术则是为了测定样本中特异的PCR片段相对及绝对量,是一种测定特异的PCR片段含量的方式。如测定病人样本中病原体的含量、实验样本中某一特定的mRNA的含量等。前些年有人讲过普通PCR后,通过电泳也可以进行定量,其实是将PCR产物的定量与PCR样本中模板定量相混了。近两年没有人再讲这类的话了。|||引物设计是sybr定量PCR法的最大难点,机会好的话,设计一对引物就能得到很好的结果,机会不好的话7、8对引物也出不来,我就遇到过这样的问题,我在prime5.0上设计了8对引物,符合实验要求的一对也没有,我把退火温度提高到了68度也没能把引物二聚体搞定,后来我想通了,可能我这对引物把其它序列扩增出来了,而且扩增效率很高(我一个同学设计了十几对才找到一对好用的)。记住primer5.0设计出来的100%好的引物,到了定量PCR上不一定好使,这是我最大的经验。定量pCR的引物对匹配度要求不高,我现在使用的引物就有几个碱基不匹配,但实验结果很好。有一个办法可以帮助我们绕过引物设计这道坎,直接到罗氏网站上专区上找引物。罗氏网站在线有一个引物设计软件,你只要找好你目的基因的种属,输入你的片段序列就可以得到你要的引物。这个软件有很大的好处,他会自动地把你的种属序列背景扣除,最大限度地去除引物二聚体产生的可以。
PCR相关技术问题,可搜索oneshine,在交流专区,有比较全面的技术信息,希望能帮到你
般taq酶没5‘-3’外切性现些酶比TAKARAEx-Taq5‘-3’外切性主要减少错配提高保真率 再PrimerStar 另外pfu酶近用比较保真性介于ExPS间挺用扩增效率没

求助各位大侠,最近做的荧光定量PCR,标准曲线稀释一直不好,请教各位,

采用的标准品是自己提的细胞基因组,浓度最高从125ng/uL,5倍稀释,到最低0.2ng/uL,问题如下:

1.最后一个浓度做出来的扩增曲线重复性非常差,而且与前一个浓度梯度CT值差值约为5左右,稀释过程与前几个浓度时操作一致。

2.待测样品中目标基因若含量高,则重复性尚可,若含量略低,Ct值在30及以上,重复性也很差。


说明,

1、每个标准曲线浓度的稀释操作均一致,涡旋混匀时间>15s

2、所用移液枪无问题,枪头为低吸附枪头

3、操作移液枪无问题

实验不顺,甚是不爽,各位大侠出手解救


本人之前尝试过用普通的Taq酶扩增2kb的条带,但是老是扩不出来。:(我想问一下各位老师有没有试过用普通的Taq酶扩长片断呢?另外还有个问题就是要是我用PrimeSTARTMHSDNApolymerase可以扩出长片断吗?谢谢。
定量检测包括总RNA提取和纯化、(可能还需要做mRNA提取和纯化)、RT、定量PCR
还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源(荧光染料或荧光标记的探针,看你用什么策略来做定量PCR)
报价要看你需要服务商提供什么服务,如果你只提供实验材料,要求服务商做以上全部工作,只检测一个指标(一个基因的表达水平变化),价格大约每个样品350-500元,多一个指标大约多90元。
一般至少做一组数据两个样品嘛,所以你按1000块一组样品预算吧。
三步法PCR 首先95°C 作用3 min。 PCR 进行 35 个循环。 步骤 温度 变性 95°C 退火 58°C 延伸 72°C 时间 30 秒 30 秒 30 秒 融解曲线 温度 时间 变温速度 95°C 0秒 20°C/秒 55°C 15 秒 20°C/秒 95°C 0秒 0.1°C/秒 PCR 疑难解答 当 PCR 结果不甚满意时,首先检查以下几方面并遵照执行: 1 将 PCR 反应的试管与反应板紧贴。 2 当酶反应混合物以 70℃“热启动”开始循环时,切记在加入酶后稍 3 微振荡一 下,因为在 0.2-ml 的 PCR 管中不能均匀传热。 4 不要随意减少 dNTP 的用量, 它是一个系统的因素, 必须与其它成份保持平衡。

荧光定量PCR数据如下表,想通过GraphPadPrism5软件构建柱状图,但不知道是将2-△△Ct数据导入GraphPadPrism5软件,还是将Mean和SD导入GraphPadPrism5软件中。请大神赐教。另外Mean和SD是求的△△Ct的还是2-△△Ct的?


第一次做这方面的实验,这张图的右半个不会选,希望大家帮帮忙

最近要做realtimePCR,taqman探针法,没有买市场上的产品,可否先用普通taq酶试试?
这样设想的前提是因为,普通Taq酶也具有5‘-3’外切酶活性,如果可以的话,与普通PCR相比,反应体系需要做什么样的改动呢?
用的是ABI的机器。