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Bio-Synthesis/Acetyl - beta - Amyloid (15 - 20)/1 mg/10149-01
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Bio-Synthesis/Acetyl - beta - Amyloid (15 - 20)/1 mg/10149-01
品牌 / 
Bio-Synthesis
货号 / 
10149-01
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Acetyl - beta - Amyloid (15 - 20)
Sequence (1LC):
Ac-QKLVFF
Sequence (3LC):
Ac - Gln - Lys - Leu - Val - Phe - Phe - OH
Catalog :
10149-01
Unit:
1 mg
Price/Unit:
$210(For other quantities please Contact Us or call 972-420-8505)
Purity:
>95%
Format:
Lyophilized solid, trifluoroacetate (TFA) salt format
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Product Usage:
This product is for research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures.
M.W.:
823
Reference/Citations:
Ref: Gazit, E. FASEB J. 16, 77 (2002).
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转化过程无需热激。 感受态制备流程快速简单,适合大量制备。 使用感受态专用培养基,转化效率高。 查看更多>
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二代测序RNA文库制备试剂/NEB/E7335L现货促销,咨询热线:4000-520-616相关产品NEBNext 多样本接头引物试剂盒- Illumina(检索引物试剂盒 1)#E7335S 24 次反应 . . . ¥1,269#E7335L 96 次反应 . . . ¥4,629NEBNext 多样本接头引物试剂盒- Illumina(检索引物试剂盒 2)#E7500S 24 次反应 . . . ¥1,269#E7500L 96 ... 查看更多>
第一部分RNA 提取策略 1、 RNA降解的原因内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因,因为人体细胞自身就是几十分钟(20min?)mRNA被降解一轮,所以不管是组织还 是细胞还是液体状样本在离开其中细胞的最佳生活状态后都应该尽快的被妥善的方法保存起来。外源性RNA酶也是一个需要注意的因素,最常见的就是毛发尤其头 发,灰尘,唾液,塑料手套这四个兄弟。针对它们我们应 查看更多>
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CRISPR-gRNA文库筛选功能基因 精准 高效 个性化 CRISPR/Cas9是细菌和古生物菌用来抵抗外来质粒或噬菌体等遗传物质入侵的一种获得性免疫系统。该系统自从2011年被张锋实验室等进行改进和应用,迅速在基因编辑领域占据了绝对的主导地位。基本原理是通过一段与靶标DNA相同的gRNA指导Cas9核酸酶对靶向基因进行DNA修饰,以此造成基因的功能突变或缺失。在此基础上,利用CRISPR/Cas9技术建立哺乳动物全基因组突变库... 查看更多>
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A resource for large-scaleRNA-interference-based screens in mammalsPATRICK J. PADDISON1,*, JOSE M. SILVA1,*, DOUGLAS S. CONKLIN1,*,?, MIKE SCHLABACH2,?, MAMIE LI2, SHOLA ARULEBA1, VIVEKANAND BALIJA1, ANDY O'SHAUGHNESSY1, LIDIA GNOJ1, KIM SCOBIE1, 查看更多>
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众所周知,RNA是一种相当不稳定的分子,它在这一方面可比DNA差远了。我们大家在实验室里基本上都耳闻目睹过,处理这种核酸时发生的悲惨故事。幸运的是,随着RNA研究逐渐成为主流,可供选择的商业化工具也越来越丰富越来越成熟。
RNA制备过程中究竟有哪些问题需要注意,又有哪些工具可以助我们一臂之力呢,且听下文分解。
RNA制备的四大祸害碱性条件、金属离子和高温都会促使RNA分子水解。因此,RNA操作一般在0°C-4°C的中性或微酸性缓冲液中进行,人们也常常在其中添加螯合剂,比如0.1mMEDTA。有些应用不允许EDTA的存在,这时可以通过离子交换树脂来去除阳离子。
在制备RNA时,RNase一直是个令人头疼的大问题,因为这种酶基本上无处不在。生物样品本来就含有RNase,它们存在于细胞的小隔间里,当细胞被裂解时这些RNase就释放出来。另外,实验室操作也很容易引入RNase。“这种酶到处都是,我们皮肤细胞上就有。如果你戴着手套接触了脸或者手臂,也会沾到一些RNase,”Promega公司的产品经理EricVincent提醒道。
在收获组织或细胞时,“提取RNA要越快越好,或者就想办法令RNase失活,”NEB公司的RNA研究带头人BretRobb指出。
如果不能立刻提取RNA,就应当通过速冻来稳定样本,或者将样本储存在特殊的RNA保存液中,比如AllProtectTissueReagent、RNAlater。此外,PreAnalytiX公司的PAXgeneBloodRNATube也很适合保存这样的样本,“不仅能确保RNA的安全,而且让细胞不会因为温度或缓冲液条件的改变表达任何转录本,”Qiagen公司的MartinSchlumpberger介绍道。PreAnalytiX是BD和QIAGEN的一个合资公司。
绝大多数RNA分离试剂盒中的裂解缓冲液(例如Qiagen公司的RNAEasy),“可以失活任何样本所带的RNAse,”Schlumpberger解释道。“这些产品对于RNA来说是相当安全的。”如果你更喜欢自己DIY,那么异硫氰酸胍、酚/氯仿和SDS都能帮你保护样本中的RNA。
据介绍,RNA纯化之后对环境中的RNAse最为敏感,这个时候需要特别注意预防RNAse的污染。
可不可以做到万无一失如何才能保证RNA实验的成功,这已经是一个老生常谈的问题了。RNA操作时应该戴上一次性手套,并且在专门的空间里进行,尤其要与质粒制备和细菌操作分开。操作者尽量不要接触洁净度不能令人百分百放心的物品。
我们来看看NEB公司是如何做到万无一失的。NEB公司的RNA实验室统一使用RNA专用的一次性耗材。他们认为高压灭菌会使溶液中的微生物释放出RNase,而这些RNase会在灭菌之后复性。因此NEB公司只信任经过认证的无RNAse器皿,抛弃了高压灭菌过程。Robb介绍道,目前市面上有许多经过认证的RNA专用产品(试剂盒、试剂和耗材),进行RNA实验已经比十几年前容易得多了。
“过去人们在配制溶液的时候总是胆战心惊,恨不得屏住呼吸进行称量和搅拌,以免把RNase带到样本中去,”他解释道。而现在,你可以很方面的买到各种无RNAse的试剂,从水、1MTris到5MNaCl。“使用这些试剂可以为RNA实验提供额外的保障。”
许多无核酶的塑料产品都经过了第三方的检测和认证,MoBioLaboratories就提供这样的服务。“我们可以帮助制造商建立始终如一的无污染生产线,”培训操作者如何识别和消除污染源,MoBio公司的CarlTsang介绍道。
我国大多数实验室还是使用玻璃器皿,这些器皿至少需要在180°C的条件下烘烤几个小时,才能确保将RNAse永久性地摧毁。之后,研究者们可以通过商业化的试剂盒进行RNAse检测,比如NEB公司的RNAse污染分析试剂盒。
添加剂的使用DEPC(Diethylpyrocarbonate)一直被用于处理水和溶液,失活其中的RNAse。“多余的DEPC可以在高压锅中去除,因为DEPC在高温下很不稳定,会释放出CO2然后消失,”Schlumpberger说。不过许多人并不爱和这种可能致癌的化合物打交道,Schlumpberger强调,如果没有正确处理,残余的DEPC也会使RNA失活。
对于那些不能高压灭菌的器物,我们可以用RNaseAway试剂处理,然而将其浸泡在无RNAse的水里。
Vincent指出,RNAse抑制剂的使用应当成为常规。以Promega公司的RNAsin为例,RNAse抑制剂能够特异性结合并抑制实验室中常见的RNAse,包括RNAseA、B、C和人胎盘RNAse。“等你发现引入了RNAse时往往已经太迟了,多加一层保险是很有必要的,”他说。
只要我们了解威胁RNA的主要因素(高pH、高温、金属离子和内切酶),就能够想办法一一化解。这时你会发现,RNA制备其实并没有那么难。
http://seq.cn/article-10584-1.html
谁在用Thermo 的K1622反转录试剂盒123
小灰灰_淘惹52021-08-01
Thermo 反转录试剂盒K1622使用说明Thermo Scientific RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit是一套用于以RNA为模板高效合成第一链cDNA的完整系统,可合成长达13kb的cDNA。试剂盒配套提供的RiboLockRNase Inhibitor,可有效防止RNA模板的降解。试剂盒配套提供oligo(dT)18引物和随机六聚体引物。oligo(dT)18引物可以选择性地 与mRNA中的poly (A)尾结合。随机六聚体引物无需poly (A)尾,因此可转录mRNA 5’-端区域,也可以无poly (A)尾的RNA (如micoRNA)为模板合成cDNA。该试剂盒也可使用基因特异性引物。Thermo 反转录试剂盒K1622使用说明优点:• 合成全长的第一链cDNA,最长可合成13kb的cDNA• 最佳反应温度为42℃• 完全一提供RT反应所需的所有组分应用:• 第一链cDNA合成,作为RT-PCR和实时RT-qPCR的模板• 构建全长cDNA文库• 反义RNA合成Thermo 反转录试剂盒K1622使用说明RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit合成全长cDNA1 μg小鼠心脏总RNA作为模板,用oligo(dT)18 引物进行逆转录反应。由此合成的cDNA,再作为Taq DNA Polymerase后续PCR扩增的模板。末端2024 bp片段的成功扩增,表明长度为13.8 kb的全长RN***段得到成功的逆转录。
提取总RNA的方法现在主要的就是用商用试剂盒,比如凯杰,欧米伽等厂家,还有就是用传统的酚氯仿,trizol提取,一般trizol提取的质量相对比较好,但是操作起来比较麻烦,全程冰上操作,包括离心,这要看你们实验室有没有相应的试剂或仪器了,如果用商用试剂盒的话,通常是针对比较特殊的要求的样本的,比如石蜡样本,植物样本等,你需要根据你的样本类型选择不同的试剂,你可以咨询一下凯杰生物的技术支持
RNAseq完整分析过程123
n1ce01092021-08-09
样品提取总RNA后,对于真核生物,用带有Oligo(dT)的磁珠富集mRNA,对于原核生物,用试剂盒去除rRNA,向得到的mRNA中加入Fragmentation Buffer使其片断成为短片段,再以片断后的mRNA为模板,用六碱基随机引物(random hexamers)合成cDNA第一链,并加入缓冲液、dNTPs、RNase H 和DNA polymerase I 合成cDNA第二链,经过QiaQuick PCR试剂盒纯化并加 EB缓冲液洗脱经末端修复、加碱基A,加测序接头,再经琼脂糖凝胶电泳回收目的大小片段,并进行PCR扩增,从而完成整个文库制备工作,构建好的文库用Illumina HiSeq2000进行测序。
向左转|向右转
rizol和试剂盒提rna的区别目的掌握RNA提取的基本技术,了解RNA提取过程中的各种注意事项、原理RNA提取是分子生物学实验中难度较大的实验技术,因为它们都是核酸,都具有较好的水溶性。二,然后用提取液将RNA溶出。RNA提取和DNA提取有类似的地方。提取RNA首先破碎细胞
是否需要纯化,还需进一步检测才能确定
1、测浓度和纯度,是否达标
2、跑电泳看条带是否与测的数据相互印证
如果上述两点满足,就不需要纯化,否则需要进一步纯化。
不过根据经验,一般都不需要,我们实验室用的是GNT系列的试剂盒,提取结果就直接进入下游实验了,效果挺稳定
质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器(主要指线粒体和叶绿体)中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌)、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子.
小鼠没有叶绿体,你可以直接参照小鼠线粒体的提取方法进行提取.
不管是扫描的图片或文本格式,只要简明且扼要
不行。因为你搞研究就要严谨,就算你提取出来了,结果也不可靠。
【求助】rna提取疑问123
woodyqlee2021-08-05
各位大侠好,我想做有关CDNA文库构建的东西,但是不知道改用何种方法提取mRNA,现在好像流行用trazol提RNA,但是不知道提取出来的RNA质量如何,能不能保证其中的没有剪切之前的mRNA的内含子不被降解?如果不行,那用什么办法好?多谢了。
另外还有,提完RNA后用RNase-freeDNase处理RNA会不会影响RNA的质量?
天跟试剂盒提取多糖多酚植物总rna浓度一直很低是什么原因
用醌指纹法描述微生物群落的参数[7]有:(1)醌的类型和不同类型的醌的数目;(2)占优势的醌及其摩尔分数含量;(3)总的泛醌和总的甲基萘醌的摩尔分数之比;(4)醌的多样性和均匀性;(5)醌的总量等。对两个不同的群落,由上述分析所得数据可以计算出另一个参数____非相似性指数(D),用于定量比较两个群落结构的差异。
醌指纹法具有简单快速的特点,近几年来广泛用于各种环境微生物样品(如土壤,活性污泥和其它水生环境群落)的分析。
细菌RNA试剂盒提完后有DNA污染,去除DNA的方法:做普通pcr,看看条带对不对。DNase I 处理,酚氯仿抽,然后isopropanol沉淀,DEPC水溶。 不需专门灭火,因为在反转录前有一个步骤是加热变性。一般是75度5min 后面取不超过40%反转录体积的RNA用于反转录,但反转录前最好检测一下RNA质量,免得浪费反转录酶。
但是,这样做的前提的,RNA提得要好,浓度要高,这样免得RNA降解到不能用了。因为在有二价阳离子的(DNAseI buffer含有)情况下,RNA在60度以上时必然发生非酶促降解。
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