
载体构建,菌落PCR酶切鉴定都正确,测序无目的片段
2021-07-25
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293bbs


我用了很多年的病毒载体,各种病毒也包过非常多,欢迎大家来我的病毒包装与质粒转染精华答疑贴答疑贴子链接:腺相关病毒包装(AAV)、慢病毒包装、腺病毒包装、细胞转染、病毒在体转染【技术答疑】

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ULYSSEESWB


如果你确认酶切没问题,换家测序公司测序

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zxyapple


应该是小片段污染,插入进去的都是很短的序列

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makira


把转化后的全部质粒全都送去测序(先不验证)。因为测序结果是最有说服力的。筛选测序返回的结果,最后对序列正确的质粒做PCR及酶切验证。

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随风-逝


实在不行你就用同工酶进行无缝连接吧,这样省事还省钱,成本差不多

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wanye831


重新做一遍。或者外包

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易醉段子熊


楼主发现是什么原因了吗?我现在构载体,情况和你的一样,很苦恼,求告知原因
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