This mix provides a single-tube solution for library construction for Illumina platforms. The protocol supports fragmentation, end-repair and dA-tailing in a single reaction step, therefore greatly simplifying the workflow, reducing the total reaction time and hands-on time.
Enzymatics专注于于酶产品的研发，为市场带来了特殊的、高品质的产品。是一家试剂、试剂盒和测定的领先生产商，使全球客户变革了诊断、治疗和生命科学的研究。业务包括：试剂、供应链解决方案，应用科学，其测序产品市场占有率达80%。
酶科技公司产品包括八类：超纯连接酶如T4连接酶、超纯poly酶、ArcherTM系列测序工具(ArcherProducts)、连接蛋白、DNA修饰酶、NGS文库制备(NGSLibraryConstruction)、核酸和RNA酶。
Enzymatics专注于于酶产品的研发，为市场带来了特殊的、高品质的产品。是一家试剂、试剂盒和测定的领先生产商，使全球客户变革了诊断、治疗和生命科学的研究。业务包括：试剂、供应链解决方案，应用科学。目前市场上80%测序产品来自Enzymatics（“Todayourproductsunderpinover80%ofthesequencingreactionsthatarerunaroundtheglobe”）。Enzymatics产品的好处之一--能提高效率：NatureMethods中提到“使用Enzymatics超纯连接酶，连接步骤的效率得以提高，连接片段的产量增加了20-30%”。好处之二--有效降低测序成本：遗传学界的泰斗GeorgeChurch更是认为Enzymatics是"apowerfulcatalystinthedemocratizationofsequencing"。合作伙伴包括：BGI，BerryGenomics，Illumina，454LifeSciences和IonTorrentSyst，皆对Enzymatics的出品赞不绝口。
Enzymatics--核酸25mM100µmoldNTPSolutionMix--N2050L,N2050F
核酸25mM100µmoldNTPSolutionMix
摘要：四种天然脱氧核苷酸的等摩尔混合溶液(25mM)
产品描述
Anequimolar(25mM)mixtureofthefournaturaldeoxynucleotides.
四种天然脱氧核苷酸的等摩尔混合溶液(25mM)
SuppliedAs:25mMeachdNTP(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)atpH7.5
产品信息
PartNumberN2050L,N2050F
Concentration25mM
UnitSize100µmol,20µmol
产品特性
StorageTemperature-25to-15°C
Purity≥99%
BasePurity≥99.5%
Pyrophosphate≤0.003pmol/pmolofnucleotide
EnzScript™(MMLV逆转录酶，RNaseH-)
摘要：基于RNA的DNA聚合酶，无核酸内切酶活性
产品描述：
EnzScript™(M-MLV逆转录酶RNaseHminus)属于RNA依赖的DNA聚合酶，该酶无RNaseH活性。EnzScript™被用于从polyAmRNA或总RNA中产生首链CDNA以用于下游的一些用途，如RT-PCR,cDNA克隆或RNA-Seq的文库构建。RNaseH结构域中的点突变能增加酶的热稳定性，相比于野生型M-MLV逆转录酶，它支持全长转录物种产生更高的cDNA产量
ebiomall.com
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利用NheI和HindIII双酶切插入目的片段，为什么双酶切有目的片段和切开的质粒，测序却没有？
并且测序后在NheI位点后的序列变成了-GGCTAGGTAC-Kpn位点（CGTTTAAACTTAAGCTTG消失。之前和之后的序列都相符），之间的怎么都没了？
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
期待着高手们的指点，谢谢。
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
3.HRM法 高分辨率熔解曲线分析（HRM）是近几年兴起的SNP研究工具，它通过实时监测升温过程中双链DNA荧光染料与PCR扩增产物的结合情况，来判断是否存在SNP，而且不同SNP位点、是否是杂合子等都会影响熔解曲线的峰形，因此HRM分析能够有效区分不同SNP位点与不同基因型。这种检测方法不受突变碱基位点与类型的局限，无需序列特异性探针，在PCR结束后直接运行高分辨率熔解，即可完成对样品基因型的分析。该方法无需设计探针，操作简便、快速，成本低，结果准确，并且实现了真正的闭管操作。
4.Mass Array法 MassARRAY分子量阵列技术是Sequenom公司推出的世界上领先的基因分析工具，通过引物延伸或切割反应与灵敏、可靠的MALDI-TOF-MS技术相结合，实现基因分型检测。基于MassARRAY平台的iPLEX GOLD技术可以设计最高达40重的PCR反应和基因型检测，实验设计灵活，分型结果准确性高。根据应用需要，对数十到数百个SNP位点进行数百至数千份样本检测时，MassARRAY具有最佳的性价比，特别适合于对全基因组研究发现的结果进行验证，或者是有限数量的研究位点已经确定的情况。
5.Illumina BeadXpress法 采用Illumina公司的BeadXpress系统进行批量SNP位点检测，可以同时检测1-384个SNP位点，往往用于基因组芯片结果确认，适合高通量检测。微珠芯片具有高密度、高重复性、高灵敏度、低上样量、定制灵活等特点，极高的集成密度，从而获得极高的检测筛选速度，在高通量筛选时可显著降低成本。向左转|向右转
目的片段用kpn1和xho1双酶切，然后连接到PGL4.10上，结果用RPV3测序出来目的序列是反向互补的，这是什么原因导致的？
●应用酶水解多肽不会破坏氨基酸，也不会发生消旋化。水解的产物为较小的肽段。向左转|向右转
用takara的in-fusion方法做了个重组质粒，如左图PCR验证，右起第二道是空载质粒为模板的对照。右图是酶切验证，两个图片结合起来觉得除了第四个单克隆外，其他几个应该都可能是阳性克隆。结果送了1，2两个样品后测序的结果都不对。为什么会这样。
以这些标准看，目前的基因组测序结果，还没有一个是完美的。
人类基因组：缺点在哪里?
首先，人类基因组还不够精确。人是“二倍体”，也就是有一半遗传物质来自父亲，一半遗传物质来自母亲，且在受精卵形成过程中，还会发生基因重组，这是人类遗传多样性的来源之一。科学家们需要更精确的“单倍型”数据，这样基因组才够“完美”，而这种“完美”正是研究者们追求的目标。
其次，人类基因组还不够多元。
按照传统的人种分类，人类按照肤色黑白黄棕，被粗分为四大类：尼格罗人种、高加索人种、蒙古人种、澳大利亚人种。基因组测序数据是从高加索人种开始的，人类基因组计划是人类的标准参考基因组，也是高加索人种的标准参考基因组。文特尔的基因组，测序对象是他自己，同样是高加索人种。
然而，从基因组研究的角度，为了尽可能地包括各种遗传背景，需要为更多族裔建立自己的参考基因组。
资料来源：http://www.mv163.cn/jkgl/news/2015/1224/5227.html
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
你所说的“测序酶”在一般情况下就是“聚合酶”。
因为目前的的测序方法主要就是借助聚合反应。
当然，有些测序方法（比如曾经的SOLiD系统）是利用连接反应，那么它用的“测序酶”肯定是连接酶。
估计，也就是这个原因有人把它。
