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inspiralis/Human Topoisomerase II alpha and beta/Contains 1000 U of human topo II beta and 500 µg supercoiled DNA/HTRB203
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inspiralis/Human Topoisomerase II alpha and beta/Contains 1000 U of human topo II beta and 500 µg supercoiled DNA/HTRB203
品牌 / 
inspiralis
货号 / 
HTRB203
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Human Topoisomerase II alpha and beta

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Human Topoisomerase II Alpha

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Human topoisomerase II alpha is prepared by overexpressing in baculovirus-infected insect cells (Spodoptera frugiperda) and purifying it by methods developed in-house.

The enzyme is supplied in Dilution Buffer.

Store at -80°C.

It is recommended that larger pack sizes (500U and above) of the enzyme are aliquoted to avoid repeated freeze-thaw cycles.

See technical documents below for more detailed information and lot specific activities.

Technical Documents

Cat No.ProductPriceQuantity
HT201Human Topo II alpha100 U£75
HT205Human Topo II alpha500 U£230
HT210Human Topo II alpha1000 U£385
HT220Human Topo II alpha2000 U£640
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Human Topoisomerase II Beta

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Human topoisomerase II beta is prepared by overexpressing in baculovirus-infected insect cells (Spodoptera frugiperda) and purifying it by methods developed in-house.

The enzyme is supplied at a concentration of 2-10 U/μl in Dilution Buffer.

Store at -80°C. (Stable for 3 months undiluted).

It is recommended that the enzyme is aliquoted to avoid repeated freeze-thaw cycles.

Technical Documents

Cat No.ProductPriceQuantity
HTB201Human Topo II beta100U£75
HTB205Human Topo II beta500U£230
HTB210Human Topo II beta1000U£385
HTB220Human Topo II beta2000U£640
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Human Topoisomerase II Decatenation Assay Kits

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These contain human topo II and the catenated kDNA substrate in addition to the Assay and Dilution buffers for decatenation reactions. 1 U of human topo II will decatenate 200 ng of kDNA when incubated in 1X Assay buffer in a total reaction volume of 30 µl at 37°C for 30 minutes. The kits are available with either the alpha or beta forms of the enzyme. 

Technical Documents

Cat No.ProductPriceQuantity
HTK201Human Topo II alpha Decatenation Assay Kit 1Contains 100 U of human topo II alpha and 20 µg kDNA£195
HTK202Human Topo II alpha Decatenation Assay Kit 2Contains 500 U of human topo II alpha and 100 µg kDNA£615
HTK203Human Topo II alpha Decatenation Assay Kit 3Contains 1000 U of human topo II alpha and 200 µg kDNA£970
HTK204Human Topo II alpha Decatenation Assay Kit 4Contains 2000 U of human topo II alpha and 400 µg kDNA£1,540
HTKB201Human Topo II beta Decatenation Assay Kit 1Contains 100 U of human topo II beta and 20 µg kDNA£195
HTKB202Human Topo II beta Decatenation Assay Kit 2Contains 500 U of human topo II beta and 100 µg kDNA£615
HTKB203Human Topo II beta Decatenation Assay Kit 3Contains 1000 U of human topo II beta and 200 µg kDNA£970
HTKB204 Human Topo II beta Decatenation Assay Kit 4Contains 2000 U of human topo II beta and 400 µg kDNA£1,540
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Human Topoisomerase II Relaxation Assay Kits

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These contain human topo II and the supercoiled DNA substrate in addition to the Assay and Dilution buffers for relaxation reactions. 1 U of human topo II will relax 0.5 µg supercoiled pBR322 DNA in 30 minutes at 37°C.  The kits are available with either the alpha or beta forms of the enzyme. 

Technical Documents

Cat No.ProductPriceQuantity
HTR201Human Topo II alpha Relaxation Assay Kit 1Contains 100 U of human topo II alpha and 50 µg supercoiled DNA£195
HTR202Human Topo II alpha Relaxation Assay Kit 2Contains 500 U of human topo II alpha and 250 µg supercoiled DNA£615
HTR203Human Topo II alpha Relaxation Assay Kit 3Contains 1000 U of human topo II alpha and 500 µg supercoiled DNA£1,150
HTR204 Human Topo II alpha Relaxation Assay Kit 4Contains 2000 U of human topo II alpha and 1 mg supercoiled DNA£1,800
HTRB201Human Topo II beta Relaxation Assay Kit 1Contains 100 U of human topo II beta and 50ug supercoiled DNA£195
HTRB202Human Topo II beta Relaxation Assay Kit 2Contains 500 U of human topo II beta and 250 µg supercoiled DNA£615
HTRB203Human Topo II beta Relaxation Assay Kit 3Contains 1000 U of human topo II beta and 500 µg supercoiled DNA£1,150
HTRB204Human Topo II beta Relaxation Assay Kit 4Contains 2000 U of human topo II beta and 1 mg supercoiled DNA£1,800
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Human Topoisomerase II Assay Kits For Cell Extracts

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These kits are designed for assaying cell extracts and partially purified fractions containing human topo II. They contain kDNA substrate, Assay buffer, Dilution buffer, decatenated and linear DNA markers and stop buffer / loading dye.

The kit components are based on the standard assay which contains 500 ng substrate DNA per assay.

Technical Documents

Cat No.ProductPriceQuantity
HDAK1Kit 1Contains sufficient kDNA, assay and dilution buffers for 100 assays as well as linear and decatenated marker DNA£164
HDAK2Kit 2Contains linear and decatenated marker DNA£410
HDAK3Kit 3Contains sufficient kDNA, assay and dilution buffers for 500 assays as well as linear and decatenated marker DNA£525
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High / Medium-Throughput Assay Kit - Human Topoisomerase II

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The kit is supplied with sufficient human topo II enzyme, plasmid DNA substrate, buffers and other assay components* for 100 assays. The enzyme is supplied at a concentration of 10 U/μl in Dilution Buffer. The kit is also supplied with sufficient wash buffers for one 96-well plate. These buffers are supplied as 20X concentrates and must be diluted with ultra pure water prior to use.  The kits are available with either the alpha or beta forms of the enzyme. 

More information about this assay can be found on the "Services" page under "High/Medium Throughput Assay".

Kit issued with limited licence for individual use only. 

Patent held by Inspiralis Ltd., Norwich, Norfolk, UK. (Patent No. GB0424953.8, US7838230)

Technical Documents

Cat No.ProductPriceQuantity
TRT201HTS Assay Kit - Human Topo II 1-5 KitsFor 100 assays per plate£430
TRT202HTS Assay Kit - Human Topo II 6+ KitsFor 100 assays per plate£346
TRTB201HTS Assay Kit - Human Topo II Beta 1-5 KitsFor 100 assays per plate£430
TRTB202HTS Assay Kit - Human Topo II Beta 6+ KitsFor 100 assays per plate£346
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Human Topoisomerase II alpha 453 subunit

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Human topoisomerase II alpha amino acids 1-453. This contains the ATPase domain, the activity of which can be stimulated by DNA (see Campbell and Maxwell (2002), J.Biol.Chem. 320 p.171.  The protein is expressed in E.coli.

Technical Documents

Cat No.ProductPriceQuantity
HT453Human Topo II 453 domainPlease enquirePOA
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       SNP是遗传学研究是不可缺少的一部分,目前成熟的SNP分型方法有很多,各有各的特点和适用性,其中直接测序法是堪称为“金标准”的一种手段。但其由于受到分型通量及分型成本的限制,无法在大规模的分型项目中得到推广,因此随之产生了基于二代测序发并结合多重PCR技术的高通量SNP分型法。       随着二代测序技术的普及,相比Sanger测序,二代测序降低了测序读长,但是大大增加的测序通量同时大幅降低测序成本。利用二代测序进行... 查看更多>
SNaPshot技术是美国应用生物公司(ABI)开发,是一种基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术,也称小测序,主要针对中等通量的SNP分型项目。... 查看更多>
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前 言 近日,由复旦大学王建华教授领衔,上海交通大学医学院陆劲松教授、孟祥军教授、侯照远研究员作为共同通讯作者,上海交通大学医学院王莹莹为作者,在 The Journal of Clinical Investigation 期刊发表了有关乳腺癌进展新分子机制。 JCI 影响因子 13.251。下面就带大家一起看一下这篇肿瘤高分文章的详细内容。 研究背景 乳腺癌是威胁女性健康的普遍的一种恶性肿瘤。目前虽然有一些针对性治疗方案,但乳腺癌... 查看更多>
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2016年12月19日,美国食品和药物管理局(FDA)批准了Foundation Medicine公司的FoundationFocus CDxBRCA产品,成为市场上第一个基于二代测序的伴随诊断试剂盒。 查看更多>
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二代测序(Next Generation Sequencing,NGS)技术如今大行其道,各科研单位和检测服务公司都相继引入二代测序系统。然而,二代测序过程烦琐精密,其中对样本核酸量的准确定量是成败关键之一。现今在 NGS 过领域中,荧光核酸定量检测为业界比较认可和普及的方法。在法方上,常见的是 Life Technologies 公司的 Qubit 仪器配上其荧光探针。可是此方案每次检测单个样本,未必可轻松应付高通量样本。再者,对于珍... 查看更多>
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1.TaqMan探针 针染色体同SNP位点别设计PCR引物TaqMan探针进行实荧光PCR扩增探针5’-端3’-端别标记报告荧光基团淬灭荧光基团溶液存PCR产物该探针与模板退火即产适合于核酸外切酶性底物探针5’-端连接荧光探针切割破坏两荧光间PRET发荧光通用于少量SNP位点析
2.SNaPshot 该技术由美应用物公司(ABI)发基于荧光标记单碱基延伸原理型技术称测序主要针等通量SNP型项目含测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临态位点5’-端同度延伸引物PCR产物模板反应体系引物延伸碱基即终止经ABI测序仪检测根据峰移位置确定该延伸产物应SNP位点根据峰颜色知掺入碱基种类确定该本基型于PCR产物模板通重PCR反应体系获通用于10-30SNP位点析
蛋白质的酶水解过程研究123
℡欠诚灬2017-10-03
●目前用于蛋白质肽链断裂的蛋白水解酶(proteolytic enzyme)或称蛋白酶(proteinase)已有十多种。
●应用酶水解多肽不会破坏氨基酸,也不会发生消旋化。水解的产物为较小的肽段。向左转|向右转
正在做bmp4启动子的一段序列,两端分别加的Sac1和Nhe1的位点,pcr之后跑胶显示条带位置正确,回收后分别与pgemt-easy载体和peasy-t5zero载体连接,连接之后单酶切和双酶切均显示连接成功,但测序结果就是不对,已经测了3次,求哪位大神指教一二,多谢了!!难道真的是pcr出的序列本来就是错的?而且连接peasy-t5zero载体后双酶切切不开。我用的Sac1和Nhe1是Thermo的,正在尝试换takara的重新双酶切。
pgem-teasy载体插入片段位点两侧各有一个EcoR1的位点。

我在做基因敲除实验(CRISPR/Cas9),实验室一直都是直接送测序验证的,又看到资料说,有用T7E1酶的,也有用SURVEYOR的。
不是很相信网上的商家,遂求助各位路过的大虾们,有用过的吗?这些酶特异性怎样啊?贵不贵,跟我直接测序相比,有优势吗?
SNP数据构建系统进化树123
爆儿███2b揯2017-10-02
1.TaqMan探针法 针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司(ABI)开发,是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术,也称小测序,主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中,引物延伸一个碱基即终止,经ABI测序仪检测后,根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点,根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类,从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
没有专门的“测序酶”的说法。
你所说的“测序酶”在一般情况下就是“聚合酶”。
因为目前的的测序方法主要就是借助聚合反应。
当然,有些测序方法(比如曾经的SOLiD系统)是利用连接反应,那么它用的“测序酶”肯定是连接酶。
估计,也就是这个原因有人把它。
构建重组质粒,在pSET4S质粒上插入一段基因的上下游同源臂,双酶切验证正确,同时以重组质粒为模板PCR扩增插入的片段,均与阳性对照一致,但测序结果进行NCBI比对,发现插入的一段序列不正确。而且这个重组质粒曾经构建出来过,因其中一个碱基突变所以重新构建,使用了primestar重新构建却总是测序不正确或者酶切不正确

1、目的基因与质粒载体(pET21b)双酶切连接,转DH5a感受态细胞,挑取单菌落,菌落PCR可以P出目的条带(引物是pET21b载体上设计的),扩大培养,提取质粒,但是双酶切只有一条带,测序显示目的基因已连在载体上,双酶切了很多次,都切不出来目的条带,也不是酶切体系(20-100ul都尝试过)和酶切时间(3-4h,过夜都试过)的问题。

求高手指点,到底哪里出问题了!!!

PCR程延伸阶段温度升72摄氏度左右高温度所溶液四种脱氧核苷酸需要耐高温Taq DNA聚合酶作用据碱基互补配原则合新DNA链

用takara的in-fusion方法做了个重组质粒,如左图PCR验证,右起第二道是空载质粒为模板的对照。右图是酶切验证,两个图片结合起来觉得除了第四个单克隆外,其他几个应该都可能是阳性克隆。结果送了1,2两个样品后测序的结果都不对。为什么会这样。

我的实验中,为了检测一个明确报道的多态性位点(该位点为酶切位点)在细胞中的多态性状态,能不能用高保真酶扩增含该位点的一段序列后,直接测序?还是应该先做酶切,在测序?测序是需要做一个t载体克隆不?

期待着高手们的指点,谢谢。