The Deltaphase® Isothermal Pad is a new approach to body temperature stabilization. It acts as a source of heat, but cannot overheat once it has reached it's phase change . Its constant temperature is based on a thermodynamic principle and needs no electricity or wires, no thermostat or feedback controller. It cannot generate electrical signals or cause interference. It cannot trigger an explosion. It can maintain a small animal at near normal and constant temperature for several hours. The Deltaphase® Isothermal Pad is based on the thermodynamic principle that a heat releasing phase change is isothermal, that is: that it occurs at constant temperature. A unique chemical solution is contained within a durable pouch. At room temperature this solution is in solid form. When heated to 39° the solution becomes fluid. In this state, the pad is activated and ready for use. When an animal (or any cooler object) is placed in contact with the activated pad, heat leaves the solution as it undergoes a phase change back to the solid form. In this phase change, over 30 calories of heat are released per gram of solution, even though the temperature is constant. The pad remains isothermal until all the liquid phase has solidified. Only then does its temperature fall. The transition temperature has been preset to 39° so that a small temperature gradient always exists for heat flow from pad to animal. This heat flow balances heat losses and maintains animal body temperature near 39° for periods up to several hours.
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本人对软骨石蜡切片做了MMP-13的免疫组化染色,首次做,无法判断染色部位,请各位帮忙看一下
Bone Mesenchymal Stem Cells 作为一个细胞群体,还没有发现有特定细胞表面marker. 对于那些可以代表自我更新和分化的marker, 也不清楚到底要发现哪一个的表达才能确定该细胞就是BMSC。
目前常用的方法,就是采用培养,colony-forming unit-fibroblasts (CFU-F)这个方法。一般BMSC可以24-48小时贴壁。
流式细胞计数,比如STRO-1,但是一般认为STRO-1阳性的细胞更趋向于造血干细胞,和BMSC简单区别还不是很清楚。
这里有个培养分化的产品
http://www.rndsystems.com/pdf/SC020.pdf
石蜡切片组织茜素红钙染色试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
石蜡切片组织茜素红(ALIZARINREDS)钙染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和鳌和技术,使钙离子和茜素红S产生复合物,来分析存档中的石蜡包埋的组织切片中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于石蜡包埋组织切片的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。
技术背景
茜素红(ALIZARINREDS)是一种蒽醌(anthraquinone)衍生物:9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐(9,10-Dihydro-3,4-dihydroxy-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonicacidsodiumsalt),又称媒介红3(MordantRed3)或茜素磺酸钠(Sodiumalizarinesulfonate)。其分子式为C14H7NaO7S,分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物,用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜素红染色,产生桔红色沉积,但会受到其它金属元素的干扰。
产品内容
脱蜡液(ReagentA)自备
补水液A(ReagentB)100毫升
补水液B(ReagentC)100毫升
补水液C(ReagentD)100毫升
补水液D(ReagentE)100毫升
清理液(ReagentF)30毫升
染色液(ReagentG)10毫升
产品说明书1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;染色液(ReagentG),避免光照;试剂具有腐蚀性,注意操作安全。有效保证3月
用户自备
小型染色缸:用于石蜡切片的脱蜡操作
光学显微镜:用于组织细胞染色后观察分析
实验步骤
一、脱蜡处理
1.取出10片待测的石蜡包埋的组织切片(注意:石蜡包埋前,组织切片须用10%甲醛4℃条件下,固定16小时,此步很重要)
2.(选择步骤)放进80℃烘箱,孵育30分钟
3.(选择步骤)室温下静置15分钟
4.按下表依次放进小染色缸里孵育
染色缸
孵育时间
50毫升脱蜡液(ReagentA)
15分钟
50毫升脱蜡液(ReagentA)
15分钟
50毫升脱蜡液(ReagentA)
15分钟
50毫升补水液A(ReagentB)
3分钟
50毫升补水液B(ReagentC)
3分钟
50毫升补水液C(ReagentD)
3分钟
50毫升补水液D(ReagentE)
3分钟
5.小心移去切片上的补水液D(ReagentE)
6.小心加上200微升清理液(ReagentF)在切片上,铺满整个切片样品表面
7.室温下孵育5分钟
8.小心移去切片上的清理液(ReagentF)
二、样本染色处理
1.小心加上200微升染色液(ReagentG),铺满整个切片样品表面
2.室温下孵育2分钟(注意:可以延长至20分钟);或直至可见桔红色
3.小心移去切片上的染色液(ReagentG)
4.空气中晾干
三、样本澄清处理
1.小心加上200微升补水液B(ReagentC)在切片上,铺满整个切片样品表面
2.小心移去切片上的补水液B(ReagentC)
3.重复实验步骤1和2二次
4.小心加上200微升补水液A(ReagentB)在切片上,铺满整个切片样品表面
5.小心移去切片上的补水液A(ReagentB)
6.重复实验步骤4和5二次
7.小心加上200微升脱蜡液(ReagentA)在切片上,铺满整个切片样品表面
8.小心移去切片上的脱蜡液(ReagentA)
9.重复实验步骤7和8一次
10.放上盖玻片或封片
11.即刻在一般光学显微镜下观察:钙沉积阳性细胞呈现桔红色
注意事项
1.本产品为50次操作
2.操作时,须带手套
3.试剂具有腐蚀性,注意操作安全
4.石蜡包埋前,组织样品须用10%甲醛4℃条件下,固定16小时,否则造成样品支离破碎
5.所有操作在室温下进行
6.试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面
7.样品染色避免过度,肉眼可见桔红色即可终止染色
8.组织细胞染色完成后,即刻进行光学显微镜观察
9.本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品
质量标准
1.本产品经鉴定性能稳定
2.本产品经鉴定显色清晰
的抗体不容易染色,哪为同仁有这方面的经验?另外基因公司卖的cellsignalingtechnology的抗体要1875元,而中山公司卖的这个抗体只有800多,其中差距在哪里?请赐教
最近开始做TUNEL染色,第一次按罗氏protocol做的,阴性对照是没有显色的。没做阳性对照。第二次、第三次做出来背景都很深,肾小管每个细胞核上都染上了棕黄色,DAB染色很快,几秒就变一片黄。具体步骤是:1烤片脱蜡至水2.蛋白酶K20ug/ML37℃10分钟3.tunel液冰上配置后加组织上,37度1h。4.pod液37℃30min5.DAB显色。在蚂蚁淘中检索后,优化了实验条件,在蛋白酶K前加了3%H2O2封闭10min,缩短了tunel液至40min。这是第三次的结果大家帮我看看
这是对照组
这是模型组

