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BIOMYC-1 is a solution based on the antibiotic tiamutin which is produced by the fungus Pleurotus mutilus.This antibiotic has been shown to be very effective in eliminating the mycoplasma species frequently present in contaminated cell cultures and is generally used sequentially in combination. with minocycline (see BIOMYC-2). Following our protocol, the mycoplasmas do not develop resistance to thess antibiotics – a common occurrence with other antibiotic treatment methods. The treatment is based on alternating use of the two antibiotics: four days with tiamutin followed by three days with minocycline, and repeating the cycle 2-3 times. On completion of the treatment, the cells should be grown on media without antibiotics for at least two weeks and then re-tested for the presence of mycoplasmas. If the culture test is positive, the course of treatment should be repeated.
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既说像坐标画曲线曲线应纵轴该荧光强度吧轴数值变化代表荧光强度变化荧光强度变化代表钙离浓度变化 我觉直接用荧光强度值变化代替钙离浓度变化研究意义该钙离浓度变化吧
非要荧光强度值换算钙离浓度需要做列工作
1 取标准钙离浓度染色用共聚焦显微镜测荧光强度
2 标准品需要同像环境主要曝光间相同激光波及能量
3 标准品要用同浓度荧光染料
才能根据标准荧光强度关系推算品钙离浓度
我做的病毒的普通PCR结果还可以。我现在要做该病毒的定量。用的是ICycler定量PCR仪器。有那位高手能告诉我怎样操作该仪器。
我还要重新设计目的基因片段的因物吗?如果不用重新设计,那我下一步应该为做定量PCR做哪些准备呐?还需要设计参照模板吗?
这种实验的把握性有多大?
大家有什么更好的建议吗?
什么是纯荧光校正,多长时间校正一次:
纯荧光校正是测定各种纯荧光染料标准品的波长和信号强度,通俗地说是让仪器“认识”各种荧光染料。软件收集并储存各种纯荧光染料标准品的荧光信息。以后每次定量实验运行过程中,SDS软件收集样品的原始光谱信号,并将此原始光谱与纯荧光文件中的数据进行比较,精确扣除不同染料的信号重叠部分,从而确定样品中的荧光染料种类和信号强度。
推荐每半年进行一次纯荧光校正。在运行光谱校正之前,请先进行背景校正和ROI校正。
以BD出品的为例,你可以购买现成的或者可以根据你要检测的不同细胞因子和厂家定制bead array。基本原理就是试剂盒含有多种微球,每一种都是两种不同荧光强度组合,所以在流式检测的时候会形成一个矩阵。每种微球上附着有可以识别一种细胞因子的抗体。和样本孵育后,再加入荧光标记的抗不同细胞因子的抗体(同样颜色)。这样,只要微球上结合有细胞因子,这个微球就会有三种荧光了。
前两种荧光来判断是哪种微球(哪种细胞因子),第三种荧光是识别抗体上的,来定量。试剂盒还会提供标准品,用来做标准曲线。

