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ImmunoChem/Acetyl Lysine Antibody, Agarose -2mg/2 mg/ICP0388-2MG
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ImmunoChem/Acetyl Lysine Antibody, Agarose -2mg/2 mg/ICP0388-2MG
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ImmunoChem
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Acetyl Lysine Antibody, Agarose -2mg

Catalog # Pack Size Price(USD)
ICP0388-2MG 2 mg $550.00

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Product Description

The acetylated lysine antibody is immobilized to agarose beads via amide linkages. The product can be utilized as an affinity matrix for rapid isolation and purification of proteins/peptides with acetyl lysine residues.

The acetylated peptides eluted from acetyl-lysine-specific affinity chromatography (ICP0388).
Approximately 5 mg of trypsinated crude protein from TSA treated MMRU cells wereloaded.
The maximum binding of acetylated BSA with ICP0388-2MG.
-50 µl of ICP0388-2MG were incubated with 1 mg of acetylate BSA in a 1 ml tube for 60 min.
- After washing with PBST 4 times, the bound acetylated BSA was eluted with 1 ml of 0.5 M HCl
-5 µl / lane of the eluted acetylated BSA was resolved by SDS-PAGE and blotted wih monoclonal Mouse anti-Acetylated Lysine (ICP0390)
Formulation

0.5 mL of agarose beads suspended in 1 mL of slurry

Antibody Immobilized

4 mg/ml antibody is covalently linked through amide bonds with NHS activated-SMCC, which further conjugates to thiolated agarose beads via thiol ether bonds.

Specificity

The antibody selectively captures proteins/peptides wtih acetylated lysine residues (N-epsilon). No cross reactions to methylated proteins/peptides.

BindingCapacity

Approximately 0.2 mg of acetylated histone / mL slurry.
Applications

Rapid isolation and purification of proteins/peptides with acetylated lysine residues from cell lysate or protease-digested mixtures.

Scientific Description

Protein acetylation is a form of post-translational modification known to regulate many diverse biological processes. Detection, isolation and identification of acetylated proteins/peptides is essential in proteomic studies. Affinity chromatography is one of the most efficient and rapid methods to enrich and purify the acetylated species for further MS/MS identification.

Storage & Stability

Product is stable for 30 days at room temperature. For extended storage, store product at -20°C. Shake thoroughly before use.Expiration date is one year from date of shipping if properly stored.

Product Specific References
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丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法……1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。2,免疫沉淀法:得有特异性抗体!3,硫酸铵沉淀法:利用高浓度 查看更多>
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血清前白蛋白是主要存在于血液中的运输蛋白,因电泳时位于白蛋白(Alb)之前而得名。PA的主要生理功能是结合、运输维生素A和甲状腺素,从而参与它们的调节。此外,PA还具有胸腺活性,可通过促进淋巴细胞成熟来增强机体免疫力,并在抗肿瘤方面有潜在的作用。人血清PA含量与人体的生理、病理状... 查看更多>
血清蛋白质是各种蛋白的复杂混合物。可利用不同的方法将其分离。血浆中的白蛋白、a1、a2、β球蛋白,纤维蛋白原,凝血酶原和其它凝血因子等均由肝细胞合成。γ球蛋白主要来自浆细胞。当肝脏发生病变时,肝细胞合成蛋白质的功能减退,血浆中蛋白质即会发生质和量的变化。临床上用各种方法检... 查看更多>
糖化血清蛋白(GSP)与糖化血红蛋白相似,反映的是过去1~3周平均血糖浓度,由于所有糖化血清蛋白都是果糖胺,故认为测定果糖胺主要是测定糖化血清蛋白。由于血清蛋白合成比血红蛋白快(清蛋白半衰期约20天),所以糖化血清蛋白的浓度反映的是近1~3周血糖的情况,在反映控制血糖效果上比糖... 查看更多>
Preparation of Brain Cytosol1. Chill a glass plate on ice. 2. Place brain tissue on the chilled glass plate and cut slices of brain into small pieces. 3. Resus 查看更多>
制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低将直接影响试验的成败。 通过不同方法制备的抗体往往与多种杂蛋白混杂在一起,为了获得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用途,就需要进行抗体纯化。从成分的角度分析, 抗体分子是一类蛋白质分子,与其他蛋白质一样... 查看更多>
蛋白质的分离纯化方法很多,主要有:(一)根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析  中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加 查看更多>
血清铁蛋白(serum ferritin,SF)是去铁蛋白和铁核心Fe3 形成的复合物,是铁的贮存形式,它是判断机体是否缺铁或铁负荷过多的有效指标。... 查看更多>
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我有些问题向各位请教:
①在用超滤白蛋白,IgG中硫酸铵盐时,膜包该如何选择?选择几个?
②如用凝胶过滤来分级纯化血清中65%硫酸铵盐析出的白蛋白和纯化33%硫酸铵盐析出的IgG,其填充介质应选择什么?其洗脱缓冲液应用什么好?

下面有些关于这方面的数据,供参考:
①牛血清白蛋白:分子量:66210;分子形状:椭圆形;分子大小:
40Å*140Å;等电点:4.7;血浆中的含量:52.0g/L。
②IgG:分子量:15300;分子形状:球状;等电点:5.8—7.3;血浆中含量:2.0g/L。
③另外,我从书上看到说:凝胶过滤在分级方法中分辨率为中等,但对脱盐效果优良;流速较低,对分级每周期约≥8小时,对脱盐仅30分钟;适用于大规模纯化的最后步骤,在纯化过程的任何阶段均可进行脱盐处理,尤其适用于两种缓冲液交替时。
期待您的帮助,谢谢您。
甲醇高氯酸沉淀蛋白区别
盐析 ——用于各种蛋白质酶离纯化;
蛋白质溶液加入量性盐破坏蛋白质胶体稳定性使其析种称盐析用性盐硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等各种蛋白质盐析所需盐浓度及pH同故用于混蛋白质组离例用半饱硫酸铵沉淀血清球蛋白饱硫酸铵使血清白蛋白、球蛋白都沉淀盐析沉淀蛋白质经透析除盐仍保证蛋白质性调节蛋白质溶液pH至等电点再用盐析则蛋白质沉淀效更盐析两类第类叫Ks段盐析定PH温度通改变离强度实现用于早期粗提液;第二种叫b段盐析定离强度通改变PH温度实现用于期进步离纯化结晶影响盐析素包括:蛋白质浓度、离强度类型、PH值、温度等针温度条需要强调:低离强度或纯水蛋白质溶解度定范围内随温度增加增加高浓度蛋白质、酶肽类物质溶解度随温度升降般情况蛋白质盐析温度特殊要求室温进行某些温度比较敏酶要求0-4℃进行
使用硫酸铵沉淀蛋白需要注意:硫酸铵含少量重金属离蛋白质巯基敏作用使用前必须用H2S处理:硫酸铵配浓溶液通入H2S饱放置夜用滤纸除重金属离浓缩结晶100℃烘干使用另外高浓度硫酸铵溶液般呈酸性(PH=5.0左右)使用前需要用氨水或硫酸调节至所需PH
机溶剂沉淀 ——用于物、糖及核酸产品离纯化;
机溶剂沉淀机理降低水介电数导致具表面水层物脱水相互聚集析该优点于:1)辨能力比盐析高即蛋白质或其溶剂比较窄机溶剂浓度沉淀;2)沉淀用脱盐滤较容易;3)化制备应用比盐析广泛温机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性例酒精消毒灭菌操作要求低温进行机溶剂选择首先能水混溶使用较机溶剂乙醇、甲醇、丙酮二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈2-甲基-2,4戊二醇等
等电点沉淀 ——单独应用较少与其结合使用;
两性电解质净电荷零溶解度低同两性电解质具同等电点基础进行离工业产胰岛素粗提液先调PH8.0除碱性蛋白质再调PH3.0除酸性蛋白质利用等电点除杂蛋白必须解制备物酸碱稳定性盲目使用十危险少蛋白质与金属离结合等电点发偏移故溶液含金属离必须注意调整PH值等电点与盐析、机溶剂沉淀或其沉淀联合使用提高其沉淀能力
重金属盐沉淀 ——用于抢救误服重金属盐毒病;
许机物质包括蛋白内碱性溶液带负电荷能与金属离形沉淀根据机物与间作用机制羧酸、胺及杂环等含氮化合物类铜锌镉;亲羧酸疏含氮化合物类钙镁铅;亲硫氢基化合物类汞银铅蛋白质-金属离复合物重要性质溶解度溶液介电数非敏调整水溶液介电数(加入机溶剂)即沉淀种蛋白沉淀条件pH稍于等电点宜重金属沉淀蛋白质变性若低温条件并控制重金属离浓度用于离制备变性蛋白质临床利用蛋白质能与重金属盐结合种性质抢救误服重金属盐毒病给病口服量蛋白质用催吐剂结合重金属盐呕吐解毒
血清中蛋白质按电泳法一般可分为五类:清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白,其中γ-球蛋白含量约占16%,100 mL血清中约含1.2 g左右。不同种类的蛋白质其分子量、溶解度,以及在一定条件下带电荷的情况有所不同,可根据这些性质的差别,分离及提纯蛋白质。首先利用清蛋白和球蛋白在高浓度中性盐溶液中(常用硫酸铵)溶解度的差异而进行沉淀分离,此为盐析法。半饱和硫酸铵溶液可使球蛋白沉淀析出,清蛋白则仍溶解在溶液中,经离心分离,沉淀部分即为含有γ-球蛋白的粗制品。用盐析法分离而得的蛋白质中含有大量的中性盐,会妨碍蛋白质进一步纯化,因此首先必须去除。常用的方法有透析法、凝胶层析法等。本实验采用凝胶层析法,其目的是利用蛋白质与无机盐类之间分子量的差异。当溶液通过SephadexG-25凝胶柱时,溶液中分子直径大的蛋白质不能进入凝胶颗粒的网孔,而分子直径小的无机盐能进入凝胶颗粒的网孔之中.因此在洗脱过程中,小分子的盐会被阻滞而后洗脱出来,从而可达到去盐的目的。纯化后的γ-球蛋白可利用醋酸纤维素薄膜电泳法鉴定其纯度。
我们所说的血清总蛋白,主要反映肝脏合成功能和肾病造成的蛋白丢失的情况,血清总蛋白检查结果偏高并没有什么太大的临床意义的,因为它的分类中白蛋白以及球蛋白是没有什么问题的,你可以注意休息,保持心情舒畅,饮食清淡规律即可.
【求助】纯化蛋白123
catzp2021-08-08
各位大虾,我想问春花出来的蛋白如果用来打兔子制作一抗,那么变性纯化的蛋白用不用复性?我的蛋白是用Ni柱纯化,其中含有尿素和咪唑,这些用不用除去在进行注射呢?
谢谢各位
好难问题太笼统了
我想做关于血清铁蛋白的电泳,首先要分离和纯化铁蛋白。请各位老师和学长指点。
蛋白质的分离纯化方法123
哲宇丶01962021-08-16
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取
1. 血细胞与血清分离:
取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).
2. 乳糜粒分离:4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心
梯度液配置:离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 乳糜粒上浮,将乳糜粒吸出,留其余液体备用.
3. 血清蛋白分离:除去球蛋白,白蛋白及其它蛋白质.
抗体ProteinA纯化方法123
nkylijing2018-01-23
抗体纯化分了几种类型,根据用途决定选择哪种方法进行纯化:
1. 粗纯:将制备抗体的血清或是腹水,细胞上清,直接用盐析法进行处理,这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉,获得蛋白的成分,但是由于是粗纯,里面会混有大量的其他蛋白,这样获得的抗体,纯度较低,用于实验中背景比较高。
2.通用型纯化:用抗体结合蛋白Protein A,Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同,所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体,则多半使用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后,溶液中基本只保留了抗体的成分,其他蛋白都去掉了,抗体纯度可以比较高。相对来说,这种方法是大规模抗体制备中,用得最多的纯化方法,很多抗体公司都采用这种方法来对抗体进行纯化。
3.特异型纯化:但是有些抗体,需要纯度特别高,特异性特别好,就不能简单采用上述两种方法进行纯化了。必须要通过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱,再纯化抗体。这个时候得到的就全是针对一种抗原的抗体了,特异性最好。当然,由于牵涉到抗原固定等操作,成本相应是最高的。
求大神赐教,急急急!!!!在这里先谢过大家。。。
问个小小白的问题:
样本是经过磁珠纯化过的血清蛋白,用MALDI-TOF-MS仪器得到质谱图。请教下:
1.每个峰都是一个纯的蛋白?
2.根据m/z能匹配蛋白的名称不?
血清脂蛋白有三种

(一)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)
【参考值】

0.94~2.0mmol/L
【临床意义】

降低具有临床意义。HDL-C与TG呈负相关系,见于冠心病、动脉粥样硬化、糖尿病、肝脏损害、肾病综合征。

(二)低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)
【参考值】

沉淀法:2.07~3.12mmol/L,3.15~3.61mmol/L为边缘升高,≥3.64mmol/L为升高。
【临床意义】

升高具有临床意义。LDL-C升高与冠心病发病呈正相关系。

(三)脂蛋白(a),LP(a)
【参考值】 <300mg/L
【临床意义】

脂蛋白(a)升高已作为冠心病及脑血管疾病发病的独立危险因素。