Lowicryls are low viscosity, highly cross-linked acrylate and methacrylate based embedding media. They are designed to preserve molecular structure/antigens by being applied at low temperatures. Because they preserve antigenicity, Lowicryls are a useful alternative to epoxy resins in immunochemistry.
Lowicryl® K kits are polar and hydrophilic and have many advantages over other methods. During dehydration and infiltration specimens may be kept partially hydrated and polymerized with up to 5% water. They are also useful in immunolabeling of sections using specific antisera, lectins and colloidal gold particles.
Lowicryl® K4M kit can be used for tissue infiltration and polymerization at temperature as low as −35ºC. The use of K4M results in better structural/antigen preservation and lower background labeling compared to other methods.
Kit contains: 1x130gm of Crosslinker A, 3x250gm of Monomer B, and 2x4.8gm of Initiator C
polysciences是一家化学品制造公司，产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年，起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案，帮助科学家揭示未知领域。随后，开拓了在病理（组织研究）应用产品，使组织除了石蜡包埋外，还能够包埋在塑料块中；开发染料和染色剂，以实现更好的样品观测方式。与政府机构合作，开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家癌症中心合作，开发天然产物分离和纯化产品，并用于紫杉醇的初步临床试验。继而开发出超顺磁珠，用于DNA、蛋白质和肽的研究。Polysciences的高纯度单体和聚合物产品在医疗器械中有许多应用，并不断开发和增强其性能。近期业务扩展到电子产品，Polysciences的精密微粒子产品拓展了纳米技术应用中测量精度。公司秉承为应用而研发，目前已拥有超过3000种产品。PolysciencesInc.致力于提供先进的技术、制造能力和技术支持，帮助客户实现他们的目标。
Polysciences, Inc. 成立于1961年，总部位于宾夕法尼亚州沃灵顿，是一家生产研发化学产品的公司。该公司的产品种类已经累计超过3000种，其产品的特点是体积小，附加值高。 Polysciences产品主要包含： 1、 单体和聚合物 2、 微球和粒子（有机、无机、可生物降解、磁珠、荧光素、染料、特异性抗体和蛋白包被颗粒，直径从40nm到10mm）用于核酸提取、蛋白分离和纯化等。 3、 高性能粘合剂、涂料和密封剂 国际上推出了一些阳离子聚合物基因转染技术，以其适用宿主范围广，操作简便，对细胞毒性小，转染效率高受到研究者们的青睐。其中树枝状聚合物（Dendrimers）和Polysciences聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）的转染性能最佳，但树枝状聚合物的结构不易于进一步改性，且其合成工艺复杂。Polysciences聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳个原子，即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(protonsponge)体。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞，其效果好于脂质聚酰胺，经进一步的改性后，其转染性能好于树枝状聚合物，而且它的细胞毒性低。大量实验证明，PEI是非常有希望的基因治疗载体。目前在设计更复杂的基因载体时，PEI经常做为核心组成成分。 转染技术新宠-Polysciences阳离子聚合物基因转染技术 其优点：适用宿主广泛，操作简便，细胞毒性小，转染率高。其中聚乙烯亚胺（PEI）的转染性能最好。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔两个碳原子，就是第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何PH下都能充当有效的“质子海绵”体。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞，其效果好于脂质聚酰胺，而且细胞毒性低。大量实验证明，PEI是非常有希望的基因治疗载体。目前在设计更复杂的基因载体时，PEI经常做为核心组成成分。 Polysciences线性聚乙烯亚胺（LinePEI）转染复合物的细胞毒性低，有利于细胞定位，而且转染率极高。 Polysciences公司的两款明星产品线性聚乙烯亚胺（23966-1和24765-1）近年来越来越多的受到研究者们的青睐。其产品被运用到大量的转染实验中，也出现在大量的文献中。
美国POLYSCIENCES公司成立于1961年，主要生产和经营LIFESCIENCES生命科学（胶体金,不含甲醛的甲醇等），病理学和显镜学微球和粒子和磁珠各种单体和聚体等产品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供应商,同时是世界*的免疫学,组织化学试剂耗材供应商.
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对于六分之一效率（99.9999％）ULPA过滤器，该系统挑战将产生100个粒子/ 立方英尺的下游气溶胶浓度或将在标称1.0cfm激光粒子计数器（LPC）中产生100个粒子/分钟的计数速率。
过滤器效率以及过滤器中任何相关联的泄漏可以通过LPC简单地检测。标准集团的高输出PSL气溶胶发生器取代了传统过滤器测试和无尘室认证中使用的DOP（邻苯二甲酸二辛酯）和其他油基气溶胶发生器。
靶向性——脂微球载体以其特有的亲和力聚集于病变部位；
持续性——在脂微球的保护作用下，前列地尔主要在肺部的灭活明显降低；
高效性——仅需传统剂型几十分之一的给药量，且疗效更佳；
低副作用——在脂微球的屏障作用下，前列地尔对血管的刺激和炎性反应明显减少；
“脂微球保护技术”的引入，使得优帝尔的剂型稳定性更高，用药更安全：
剂型稳定性更高——优帝尔仅需在阴凉处（不超过20℃）保存，这样带来的好处是：南方地区无需冷藏储存，北方地区也不用再担心药物因温度过低而冻结，从而影响临床用药。（蓓畅、凯时等同类产品在运输、贮藏过程中必须保证环境温度范围在0-5℃）
用药更安全——市场上已有北京泰德制药有限公司生产的“前列地尔注射液”，商品名“凯时”，该品种也是运用脂微球化技术的一类制剂。但是该品种由于自身生产工艺的缺点，其中的主要杂质—PGA1相当高，质量标准中规定其限度高达60%，对产品中其他杂质也未进行控制。而药友公司通过长达近10年的摸索，通过无菌过滤和低温冷冻干燥技术，制备的“注射用前列地尔干乳剂”可将杂质PGA1严格控制在10%以内，其他杂质控制在1%以内，表明药友公司采用的冷冻干燥方法更加有利于产品的质量控制。因此药友公司注射用前列地尔干乳剂提出了比“凯时”更为严格的质量标准要求，有效保证产品质量。由于本品质量的提升，使得本品可以储存在常见的阴凉条件下，而不是“凯时”相当苛刻的储存条件要求。药友公司技术人员通过大量科学研究，探索出特殊的冻干保护剂和严格的冻干过程控制实现了脂微球的冻干技术，使本品既保留了脂微球的物理性质，又显著提升了脂微球的化学稳定性。因此，“优帝尔”的执行标准仅为前列地尔注射液执行标准的六分之一。
目前国内的制药企业对微粒释放系统的立项开发越来越多，园子里已经就脂质体展开了很多火热的讨论，我个人也参与其中，大家交流经验，取长补短，渐渐的找到了方向，系统而固定的讨论交流是非常有好处的。
因此在此倡议建立一个微球的交流区，让大家相互交流比如：微球产业化、技术难点、实验中遇到的问题、相关理论的探讨、最新进展交流等等
现分享于此：
LatexBeadsPhagocytosisassay
---Materials
*Fluorescencelabeledlatexbeads(1umdiameter),2.5%aqueoussUSPension
*3%BSAcontaining25mMNa2HPO4,pH6.0
*0,3%(w/v)azide
*Culturemediumcontaining5%FBS
*Distilledwater,PBS
*Bathsonication,6(12)-wellplates
---Cellcultureandtreatment
1,Inoculateplateswith7,0104cells/cm2perwell.Incubateat37℃,5%CO2for24hr,bestuntil50-70%confluenceisreached
2,Removeculturemediumandexposethecellstotestmaterial.Incubateat37℃,5%CO2for24hr.
---Preparationofcoatedlatexbeads
1，Washlatexbeadswithdistilledwaterandpelletat10,000gfor8minatRT.
2，Resuspendlatexbeadsin3%BSAcontaining25mMNa3PO4(pH6.0)andincubateatRTfor15minwithbathsonication.
*CoatingbeadsinBSAinsuresbeadsremaininamonodispersestate.
3，Washthebeadsoncewithculturemediumcontaining5%FBS.
4，Resuspendthebeadsinculturemediumatconcentration2.0%.Thisisbeadsstock.Storedindarknessat4℃.
---Assay
1，Controlsandsamples:Intactcontrol(Nostaining)1well
-Negativecontrol(azidetreated)1well
-Normalcontrol1well
-sample5wells
*Inordertodifferentiatebetweenphagocytosedbeadsandbeadsnonspecificallyadheretothecellsurface,controlcellsareexposedto0,3%(w/v)azidefor10minpriortotheadditionofcoatedbeads.Thistreatmentcompromisesmicroglialenergeticprocessesandfewbeadswereinternalizedasobservedbyfluorescentmicroscopy.Meanfluorescenceofazide-treatedmicrogliawasusedasthenegativecontrolandwassubtractedfromvaluesobtainedinexperimentalsamples.
2，Forexperimentsusing6well-plates,15μlbeadsstockin1mlculturemediumisappliedtoeachwell.Votexthebeadsstockwellandtakeout105μlandaddinto7mlculturemedium.Bathsonificatefor10minatRTindarkness.Thisisbeadsworkingsolution.
Forexperimentsusing12well-plates,6μlbeadsstockin0.4mlculturemediumisappliedtoeachwell.
3，WasheachwelltwicewithPBSandreplacewithbeadsworkingsolution,1ml/wellfor6-wellplate,0.4ml/wellfor12well-plate.Incubateinthedarkat37℃for80-120min.
4，Removebeadsworkingsolutionandwash3timeswithPBStoremoveexcessbeads.
5，LiftthecellsbyscrappingortrypsinizationandwashthecellswishPBS.
6，StainwithPI(4ug/mlfinalconcentration)andrunforFACS.
以BD出品的为例，你可以购买现成的或者可以根据你要检测的不同细胞因子和厂家定制bead array。基本原理就是试剂盒含有多种微球，每一种都是两种不同荧光强度组合，所以在流式检测的时候会形成一个矩阵。每种微球上附着有可以识别一种细胞因子的抗体。和样本孵育后，再加入荧光标记的抗不同细胞因子的抗体（同样颜色）。这样，只要微球上结合有细胞因子，这个微球就会有三种荧光了。
前两种荧光来判断是哪种微球（哪种细胞因子），第三种荧光是识别抗体上的，来定量。试剂盒还会提供标准品，用来做标准曲线。
以FITC和PE为例来看光谱重叠。FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中，而这部分需要从PE通道中减掉溢漏过来的FITC荧光。那么荧光补偿该如何调节呢？l 调节电压l 检测荧光通道的自发荧光l 每个荧光通道做单染管对照检测何为单染管对照？l 细胞l 补偿微球细胞通常是流式抗体单染管对照的样本首选，但是当细胞数量有限，无多余细胞用于抗体单染或感兴趣的表面抗原表达较低，阳性分群不明显不足以用来调节补偿时，建议选择补偿微球。补偿调节时要注意：l 使用未染色的细胞做PMT的电压设置l 不要使用未染色的补偿微球设置电压eBioscience提供两种补偿微球：OneComp eBeads与UltraComp eBeads。微球大小和淋巴细胞相当，可连接各种荧光标记的抗体来调节补偿。每滴微球中都含有两群：一群是可以结合抗体的阳性群，一群是不会与抗体反应的阴性群。优点：l 使用方便，一滴即可l 使用实验抗体与微球有效结合调节补偿，无需再用CD4分群来调节l 细胞替代物，适应各种孵育时间，结果稳定流式细胞术中荧光补偿该如何调节？l 能与各种种属和亚型的抗体反应ProductSpecies CompatibilityChain RecognitionFeaturesMouse IgRat IgHamster IgRabbit IgKappa Light ChainLambda Light ChainOne DropOne VialAll cell sizesViolet LaserUltraComp eBeads 01-2222√√√√※√√√√√√OneComp eBeads 01-1111√√√√※√√√√√Competitor X Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Anti-Rat Ig, k√√Competitor X Anti-Rat/Hamster Ig, k√√√Competitor X Plus Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Plus Anti-Rat Ig, k√√Competitor Z Anti-Mouse Bead Kit√√√
竞争品牌的微球是分种属的，使用不同抗体要购买多个产品以使用注：兔来源的抗体与微球结合力较弱，但某些还是可以使用l 适用于各种激发光---适用于488 nm 蓝光，532 nm 绿光，561 nm 黄光，633-635 nm 红光，UltraComp eBeads尤其适用紫外 (355 nm) 或者 紫色 (405 nm) 激光器l 微球本身信号经过优化适合补偿调节l 价格相当，有小包装操作步骤：1. 准备好流式管，每种荧光抗体一个；2. 将微球翻转或者涡旋混匀；3. 在每管中加入一滴微球；4. 在管中分别加入相应的 1 test 抗体（不同抗体 1 test 的用量不同，具体参见说明书）；5. 敲击或者涡旋混匀；6. 2-8℃暗处孵育 15-30 分钟；7. 每管加 2ml 流式染色缓冲液，400-600 x g 离心 3-5 分钟；8. 弃上清，每管加入 0.2-0.4 mL 流式染色缓冲液；9. 混匀后上机分析
