
Catalog Code Prefix | In Stock | Catalog Number | Catalog Code | Lot Number | Mean Diameter (µm) | Std Dev or Range (µm) | Polymer Description | % Solids | Density | Safety Data Sheet | Product Mode | |
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NT | Order | NT16N | NT16N | 14481 | 1.54 | 0.039 | NIST Traceable Particle Size Standard, 1.5µm | 1 | 1.05 | SDS ST351 | A |
BangsLaboratories位于美国印地安那州,成立于1988年,专业生产生命科学研究用的各种微球达2000种以上,用于流式细胞分析,生物大分子的分离与检测,激光共聚焦,生物影像等。BangsLaboratories于2000年收购了成立于1984年的流式标准品公司,该公司掌握了许多标准品和校正品的专利。Bangs产品通过与流式细胞仪及试剂厂家的OEM合作,进入世界各地实验室。BangsLaboratories的流式分部前称为流式标准品公司,成立于1984年。目前为止,公司自己研发了许多标准品和校正品,并获得美国和其他国家的专利保护。公司的荧光标准品可帮助科研和临床工作人员在实验时更容易更准确地评估数据。公司提供下列领域的质控可定量标准品:流式、荧光显微镜、屏象分析(imageanalysis)以及其它荧光分析。
Bangslabs(BangsLaboratories,Inc.)是高品质特种微球供应商,其产品广泛用于诊断试剂、免疫分析、分子及细胞生物学、流式检测应用等,产品种类已达2000余种,并且逐年递增,完善的技术支持体系为客户提供全方位的项目服务。 热销产品有羧基荧光微球、铕螯合微球、分离磁珠、标准微球、CD抗原标记微球等,适用于时间分辨荧光检测、免疫层析或比浊、细胞及遗传物质分离纯化等科研及工业应用。
BangsLaboratories公司位于美国印地安那州,成立于1988年4月。专业提供生命科学研究用的各种微球。其种类齐全(2000种以上),可用于流式细胞仪检测,细胞与生物大分子的分离与检测,电镜、共聚焦成像仪、荧光显微镜与相差显微镜的观察等。微球除聚苯乙烯外,还有聚甲基丙烯酸酯,聚乙烯甲苯和硅等多种材料,部分提供羧基或氨基修饰,直径大小从20nm-200um不等,均一性高,有很好的热稳定性。公司可提供个性化服务,根据你需要的颜色染色。BangsLaboratories的流式分部前称为流式标准品公司,成立于1984年。目前为止,公司自己研发了许多标准品和校正品,并获得美国和其他国家的专利保护。Bangs作为流式定量领域的领导者,产品已进入世界各地。公司的荧光标准品可帮助科研和临床工作人员在实验时更容易更准确地评估数据。公司提供下列领域的质控可定量标准品:流式、荧光显微镜、屏象分析(imageanalysis)以及其它荧光分析。QuantumTMplex在流式细胞仪的基础上,实现多样品检测或多指标检测,用于细胞因子检测、病毒筛选、自免疫分析、抗体检测、药物、血型、分子诊断以及基因组分析等。使用本试剂盒可在流式细胞仪上对一个样品同时检测20个不同指标(如不同细胞因子或不同抗原)。QuantumPlex?SP微球同样是研究者理想的选择,由于它是以QuantumPlexmultiplex试剂盒内的StarfireRed染料染色,研究者可以在花费不多的情况下处理表面偶联物。QuantumTMMESFKits用于流式细胞仪的标准曲线制作与仪器校正,与QuantumTMplex配套。试剂盒中的每种微球均对应溶液中一定量的荧光分子,用于流式细胞仪的荧光强度校正。试剂盒内除了荧光标准品外,还有一个未染色的微球population以测定荧光阈值或设备的噪音水平。盒内提供QuickCal数据光盘。QuantumTMSimplyCellular®kit本试剂盒是BangsLabs最复杂产品之一,用于流式实验室可直接而简单地定量检测细胞的抗体结合能力和细胞表面的抗原表达。盒内有五种微球,一个为未标记的空白对照,其余四个与不同量人IgGI和IgGII抗体的Fc区特异性抗体偶联,分别具有不同的与小鼠IgG单抗结合的能力。QC3TMkit&QC3Windows®kitQC3kit用于监控与校正仪器的设置及性能,使不同实验室间流式细胞仪的检测结果具有可比性,避免因为污染或pH改变造成的偏差;QC3Windows?kit含有3种不同荧光的QC3微球与一种空白微球。QuickCalTMv.2.1用于BangsLabs公司所有Quantum产品的检测结果的分析。该软件适用于所有的流式细胞仪软件可根据MESF微球的荧光强度等建立标准曲线。该软件还可保存仪器设置,使仪器的性能得到长期有效保证。ProActiveTMProtein-activatedorProtein-CoatedMicrospheres采用独有的包被技术偶联生物素、DNA、HRP/AP以及抗体等,确保包被微球更稳定、包被效果更好。用于免疫学和分子生物学检测 Superparamagnetic磁珠Superparamagnetic磁珠表面可高效共价交联蛋白质或DNA等,被广泛应用于诊断与其它生命科学研究。COMPEL?磁珠适用于各种生物学检测与分离,有3、6和8um等几种直径,磁珠受强磁性吸引,使其与溶液的分离极为方便,同时残余磁性极低,是生命科学研究的理想选择。磁珠分离器MagneticSeparatorsBangsLaboratories公司1.5mL磁珠分离器用于各种不同的磁珠分离实验中,包括细胞分选、mRNA与DNA分离与其它生物大分子的纯化等。使用时,只要将装有磁珠的离心管放入分离器中,仪器就能产生高能磁场使磁珠得以与溶液分离开,从而实现磁珠的分离。此外,BangsLaboratories公司提供各种微球标准,如不同直径、不同荧光的荧光强度;硅微球UniformSilicaMicrospheres除各种分子生物学与免疫学检测用途外,还可用于毛细管电色谱分析(capillaryelectrochromatography,CEC)
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从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法众多,其分离的依据可利用分子大小不同,碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。碱基性法抽提效果良好,既经济且得率较高。抽提到的质量DNA可用于酶切、连接和转化。对于分子量较大拷贝较少对的质粒DNA,由于DNA片段较大易于损伤断裂,因此选用吕华铯密度超高离心法抽提DNA,且具有纯度高、步骤少、方法稳定且获得的质量DNA是超螺旋构型等特点。对于高拷贝数质粒,用少量制备法抽提质粒DNA就有足够量可用于基因操作。
质粒DNA纯化的试验步骤:
测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液(10mg/ml溶于水);立即将溴化乙锭溶液(漂浮在表层)与DNA-氯化铯溶液混匀, 溶液的终密度应为1.55g/ml(溶液的折射率为1.3860)溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内(如用锡箔完全包裹的瓶子),于室温保存。
室温下用Sorvall SS34头(或与其相当的转头)以8000rpm离心5min, 浮在溶液上面的水垢状浮渣是溴化乙锭和细菌蛋白所形成的复合物。
用巴斯德吸管或带大号针头的一次性注射器将浮渣下的清亮红色溶液转移到离心管中。用轻石蜡油加满管的其余部分并封口。
以20℃对所得的密度梯度以45 000rpm离心16h(VTi65 转头)、 以45 000rpm离心48h(Ti50转头)、以60 000rpm离心24h(Ti65转头)或者以60 000rpm离心24h(Ti70.1转头)。普通光照下,在梯中心可见两条DNA区带, 上部区带材料通常较少,由线状的细菌(染色体)DNA和带切口的环状质粒DNA组成:下部区带则由闭环质粒DNA组成。管底部深红色的沉淀是溴化乙锭RNA复合物,位于CsCl溶液和石蜡油之间的是蛋白质。Beckman Quick-Seal离心管中的CsCl-溴化乙锭梯度可容纳4mg 闭环质粒DNA而不至超负荷。如有更大量的质粒存在,将扩展为一条宽带,并与染色体DNA相重叠。这种问题只有在质粒复制达到极高水平时才会出现,只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现负荷,可收集整个DNA区高产水平时才会出现,只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现超负荷,可收集整个DNA区带,用CsCl溶液(ρ=1.58g/ml)将体积调到15ml,在两个离心管中再度离心,使DNA达到平衡。
收集DNA带。将21 号皮下注射针头插入管的顶端以使空气进入,为尽量减少污染的机会,首先用18号皮下注射针头按下述方法收集上部的区带(杂色体DNA):用乙醇小心擦拭管外壁以除去任何油脂,然后将一块Soctch胶带贴于管外壁。穿过Soctch胶带将18号皮下注身针头(其斜面向上)插入管中,以便使针头的斜面开口恰好位于染色体DNA区带之下并与该区带相平行。将粘稠状DNA收集到一次性使用的管内,用造型粘土块封住皮下注射针头的末端并将第2根针头留于原处。 穿过Soctch 胶带插入第3根皮下注射针头(18号),将下部的质粒DNA区带收集到玻璃或塑料管中。展开
检测荧光信号的步骤有误:一般SG法采用72℃延伸时采集,Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。
引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性。
模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。
模板降解:避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。
2.Ct值出现过晚(Ct>38)
扩增效率低:反应条件不够优化。设计更好的引物或探针;改用三步法进行反应;适当降低退火温度;增加镁离子浓度等。
PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。
PCR产物太长:一般采用80-150bp的产物长度。
3.标准曲线线性关系不佳
加样存在误差:使得标准品不呈梯度。
标准品出现降解:应避免标准品反复冻融,或重新制备并稀释标准品。
引物或探针不佳:重新设计更好的引物和探针。
模板中存在抑制物,或模板浓度过高
4.负对照有信号
引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
引物浓度不佳:重庆新桥医院网上预约挂号www.cqxqyy.net适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。
镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。
模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。
5.溶解曲线不止一个主峰
引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。
镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。
模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。
6.扩增效率低
反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。
反应条件不够优化:可适当降低退火温度或改为三步扩增法。
反应体系中有PCR反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。
7.同一试剂在不同仪器上产生不同的曲线,如何判断?
判断标准:扩增效率,灵敏度,特异性
如果扩增效率在90%-110%,都是特异性扩增,都可以把数据用于分析。
8.扩增曲线的异常?比如“S”型曲线?
参比染料设定不正确(MasterMix不加参比染料时,选NONE)
模板的浓度太高或者降解
荧光染料的降解
这些染料的结构式基本是保密的。有些地方能查到,象维基上就有SYBR Green的结果式,但谁也不能肯定是否是正确的。
既说像坐标画曲线曲线应纵轴该荧光强度吧轴数值变化代表荧光强度变化荧光强度变化代表钙离浓度变化 我觉直接用荧光强度值变化代替钙离浓度变化研究意义该钙离浓度变化吧
非要荧光强度值换算钙离浓度需要做列工作
1 取标准钙离浓度染色用共聚焦显微镜测荧光强度
2 标准品需要同像环境主要曝光间相同激光波及能量
3 标准品要用同浓度荧光染料
才能根据标准荧光强度关系推算品钙离浓度
所以想请大家给推荐一个效果好的最好是国产的质粒提取试剂盒。
多谢!
对不同材料来说不同,绝大多数情况下,发射波长会随着激发波长的偏移而有所偏移。 对于固态物质,主要是因为分子与其它材料形成了π建 对于量子点溶液,激发波长也会显著导致发射光谱的不同。但是不是绝对的,比如对于Alex555分子,发射波长的便宜往往就相对较小,这是由于分子内部的能带结构所决定的。 如果是单纯的回答问题,答案是:有关。
你的荧光染料具体是哪一种?你可以通过染色试验来决定是否有效啊?一般荧光染料染色后,都会呈现明亮的颜色,比一般同样颜色要亮的多。只要能染上、只要有亮度,就是没失效。

