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Polysciences现货代理 Polysciences脂质体,BLI234A BLI234A-1 QuantumPlex SP Single Population Carboxyl 4.4µm蚂蚁淘商城
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Polysciences/QuantumPlex™ SP Carboxyl 4.4µm | Polysciences, Inc./1 ml/BLI234A-1
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Polysciences/QuantumPlex™ SP Carboxyl 4.4µm | Polysciences, Inc./1 ml/BLI234A-1
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Polysciences
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The microsphere populations in the QuantumPlex™five-bead kits are encoded with different intensities of Starfire Red™, and microspheres in our ten-bead kits are distinguished by both fluorescence intensity and size. Starfire Red™ is a fluorescent dye with unique characteristics that make it ideal for multiplexing applications. The dye"s broad excitation band allows it to be excited at a number of wavelengths, and it emits in the FL3 channel (685nm) with very little carry-over into FL1 or FL2, leaving othe detectors available for determination of positive binding events via common reporters such as FITC and PE.

QuantumPlex™ Single Population (SP) kits consist of 1-particle, dyed with Bangs" Starfire Red™ dye, which is suitable for use with any standard flow cytometer. Particles are available with carboxyl or streptavidin coating for biotin binding. For Flow Cytometry Resources, visit the Bangs Flow Blog.

polysciences是一家化学品制造公司,产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年,起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案,帮助科学家揭示未知领域。随后,开拓了在病理(组织研究)应用产品,使组织除了石蜡包埋外,还能够包埋在塑料块中;开发染料和染色剂,以实现更好的样品观测方式。与政府机构合作,开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家癌症中心合作,开发天然产物分离和纯化产品,并用于紫杉醇的初步临床试验。继而开发出超顺磁珠,用于DNA、蛋白质和肽的研究。Polysciences的高纯度单体和聚合物产品在医疗器械中有许多应用,并不断开发和增强其性能。近期业务扩展到电子产品,Polysciences的精密微粒子产品拓展了纳米技术应用中测量精度。公司秉承为应用而研发,目前已拥有超过3000种产品。PolysciencesInc.致力于提供先进的技术、制造能力和技术支持,帮助客户实现他们的目标。

Polysciences, Inc. 成立于1961年,总部位于宾夕法尼亚州沃灵顿,是一家生产研发化学产品的公司。该公司的产品种类已经累计超过3000种,其产品的特点是体积小,附加值高。

Polysciences产品主要包含:

1、  单体和聚合物

2、  微球和粒子(有机、无机、可生物降解、磁珠、荧光素、染料、特异性抗体和蛋白包被颗粒,直径从40nm10mm)用于核酸提取、蛋白分离和纯化等。

3、  高性能粘合剂、涂料和密封剂

国际上推出了一些阳离子聚合物基因转染技术,以其适用宿主范围广,操作简便,对细胞毒性小,转染效率高受到研究者们的青睐。其中树枝状聚合物(Dendrimers)和Polysciences聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的转染性能最佳,但树枝状聚合物的结构不易于进一步改性,且其合成工艺复杂。Polysciences聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳个原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(protonsponge)体。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞,其效果好于脂质聚酰胺,经进一步的改性后,其转染性能好于树枝状聚合物,而且它的细胞毒性低。大量实验证明,PEI是非常有希望的基因治疗载体。目前在设计更复杂的基因载体时,PEI经常做为核心组成成分。


转染技术新宠-Polysciences阳离子聚合物基因转染技术

其优点:适用宿主广泛,操作简便,细胞毒性小,转染率高。其中聚乙烯亚胺(PEI)的转染性能最好。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔两个碳原子,就是第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何PH下都能充当有效的“质子海绵”体。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞,其效果好于脂质聚酰胺,而且细胞毒性低。大量实验证明,PEI是非常有希望的基因治疗载体。目前在设计更复杂的基因载体时,PEI经常做为核心组成成分。


Polysciences线性聚乙烯亚胺(LinePEI)转染复合物的细胞毒性低,有利于细胞定位,而且转染率极高。

Polysciences公司的两款明星产品线性聚乙烯亚胺(23966-1和24765-1)近年来越来越多的受到研究者们的青睐。其产品被运用到大量的转染实验中,也出现在大量的文献中。


聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳个原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(protonsponge)体。PEI,可用作转染试剂它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明,分子量25000的线性PEI即Polysciences 23966转染效率zui高。


美国POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生产和经营LIFESCIENCES生命科学(胶体金,不含甲醛的甲醇等),病理学和显镜学微球和粒子和磁珠各种单体和聚体等产品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供应商,同时是世界*的免疫学,组织化学试剂耗材供应商.



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一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的 查看更多>
Reagents Heparin - 1000 U/ml Ficoll-Hypaque PBS RPMI-1640 supplemented with 10 mM glutamine and 15% FBS AET (0.14M) Dissolve 1.967 g AET in 35 ml di-H2O. Adjus 查看更多>
1. Obtain the last 2mm of tail and place directly into 200ul 1X PCR Bufferwith Nonionic Detergents (PBND) in a 1.5ml microfuge tube. (Tails can bestored at fro 查看更多>
Dye Filling to Stain Amphid and Phasmid Neurons by Michael Koelle, from Beth Sawin 4/6/94 1. Buy DiO from Molecular Probes, catalog # D-275. DiO fluorescesces 查看更多>
Fixation and permeabilization protocol 5/30/91 Mike FinneyThis protocol works for all stages except dauers (which won"t open) andhypoclorite-treated eggs (whic 查看更多>
一、原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹,以辨认全部染色体。GTG即G带,Trypsin(胰酶),Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪--曙红染料,染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红(2∶1)的沉淀物。着色首先取决于二 查看更多>
Rhodamine-Phalloidin/Calcofluor StainingDavid AmbergGrow 50 mls of yeast to 5x10E6. Add formadehyde to the media to 4% (33 mls. of 10%). Fix in media at temper 查看更多>
EM Fixation of EmbryosAdapted following advice from Andy Fire and Jim Priess1. Mount embryos on slides as if for DIC, except agar has fixative. Agarose Fixativ 查看更多>
Making Boiled Donkey (or whatever) Serum (BDS) for Blocking You want a final working concentration of 5% Serum. Order the serum from the same company and organ 查看更多>
2021-08-14
1、 取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、 将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、 将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止液终止消化,并将分裂相细胞收集 查看更多>
METHOD 1:Formaldehyde preservative – 2% formaldehyde solution in protein-free phosphate-buffered saline (PBS).Prepare as follows:Add 2 g paraformaldehyde powde 查看更多>
Exalpha Biologicals produces and sells products for Life Science Research, including monoclonal and polyclonal antibodies, for use in immunohistochemistry, wes 查看更多>
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请问荧光PCR获得的数据如何处理成扩增曲线,还有标准曲线怎么做啊?有没有什么资料可参考?
溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合,进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加,作为补偿,将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后,超螺旋度大为增加, 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限,可继续结合更多溴化乙锭,直至达到饱和( 每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子) 。由于染料的结合量有所差别,线状和闭环DNA分子在含有饱和量溴化乙锭的氯化铯度中的浮力密度也有所不同。多年来,氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心已成为制备大量质粒DNA 的首选方法。然而该过程既昂贵又费时,为此发展了许多替代方法。其中主要包括利用离子交换层析、凝胶过滤层析、分级沉淀等分离质粒DNA和宿主DNA的方法。尽管这些方法大多数均被束之高阁,但其中最好的方法,也应是聚乙二醇分级沉淀法。
从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法众多,其分离的依据可利用分子大小不同,碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。碱基性法抽提效果良好,既经济且得率较高。抽提到的质量DNA可用于酶切、连接和转化。对于分子量较大拷贝较少对的质粒DNA,由于DNA片段较大易于损伤断裂,因此选用吕华铯密度超高离心法抽提DNA,且具有纯度高、步骤少、方法稳定且获得的质量DNA是超螺旋构型等特点。对于高拷贝数质粒,用少量制备法抽提质粒DNA就有足够量可用于基因操作。

质粒DNA纯化的试验步骤:
测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液(10mg/ml溶于水);立即将溴化乙锭溶液(漂浮在表层)与DNA-氯化铯溶液混匀, 溶液的终密度应为1.55g/ml(溶液的折射率为1.3860)溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内(如用锡箔完全包裹的瓶子),于室温保存。
室温下用Sorvall SS34头(或与其相当的转头)以8000rpm离心5min, 浮在溶液上面的水垢状浮渣是溴化乙锭和细菌蛋白所形成的复合物。
用巴斯德吸管或带大号针头的一次性注射器将浮渣下的清亮红色溶液转移到离心管中。用轻石蜡油加满管的其余部分并封口。
以20℃对所得的密度梯度以45 000rpm离心16h(VTi65 转头)、 以45 000rpm离心48h(Ti50转头)、以60 000rpm离心24h(Ti65转头)或者以60 000rpm离心24h(Ti70.1转头)。普通光照下,在梯中心可见两条DNA区带, 上部区带材料通常较少,由线状的细菌(染色体)DNA和带切口的环状质粒DNA组成:下部区带则由闭环质粒DNA组成。管底部深红色的沉淀是溴化乙锭RNA复合物,位于CsCl溶液和石蜡油之间的是蛋白质。Beckman Quick-Seal离心管中的CsCl-溴化乙锭梯度可容纳4mg 闭环质粒DNA而不至超负荷。如有更大量的质粒存在,将扩展为一条宽带,并与染色体DNA相重叠。这种问题只有在质粒复制达到极高水平时才会出现,只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现负荷,可收集整个DNA区高产水平时才会出现,只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现超负荷,可收集整个DNA区带,用CsCl溶液(ρ=1.58g/ml)将体积调到15ml,在两个离心管中再度离心,使DNA达到平衡。
收集DNA带。将21 号皮下注射针头插入管的顶端以使空气进入,为尽量减少污染的机会,首先用18号皮下注射针头按下述方法收集上部的区带(杂色体DNA):用乙醇小心擦拭管外壁以除去任何油脂,然后将一块Soctch胶带贴于管外壁。穿过Soctch胶带将18号皮下注身针头(其斜面向上)插入管中,以便使针头的斜面开口恰好位于染色体DNA区带之下并与该区带相平行。将粘稠状DNA收集到一次性使用的管内,用造型粘土块封住皮下注射针头的末端并将第2根针头留于原处。 穿过Soctch 胶带插入第3根皮下注射针头(18号),将下部的质粒DNA区带收集到玻璃或塑料管中。展开
碘化丙啶(propiolium iodide,PI)能嵌入DNA双螺旋中,可使荧光强度增加约20倍,以488nm波长激发,DNA/PI复合物最大的发射波长约为615nm。小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗。(2).去除结缔组织及,剪碎肿块。(3).小碎片移入1.20×38mm针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中。(4).将200~300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20~30分钟。(5).测定580~750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分。注:PI染色液:0.1%柠檬酸钠1000mL+PI 5mg + 1% Nonide P40水。2. 培养细胞DNA的流式细胞仪分析(1).从培养皿中吸去培养基,以HBSS冲洗二次。(2).加入PI5mL于培养皿中,在4℃放10分钟。(3).用吸管反复次打细胞,使细胞破坏,胞核释放出来,再行流式细胞仪分析。3. 完整细胞DNA的PI染色(1).70%乙醇固定的细胞悬液,离心,去固定液。(2).室温条件下加入PI染色一批细胞(105~106细胞/mL),时间为30分钟,然后行流式细胞仪分析。(二)吖啶橙染色1. DNA和RNA的鉴别染色利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。方法如下:1)试剂:(1)溶液A:低温保存,稳定期约2周。Triton X-100(0.1%) 0.1mL,1mol/L HCL 8mL1mol/L NaCL 15ml蒸馏水76mL,P
荧光染料按照化学架构分属于什么染料
这些染料的结构式基本是保密的。有些地方能查到,象维基上就有SYBR Green的结果式,但谁也不能肯定是否是正确的。
GFP、EGFP、RFP,最常用的就是这三种自发荧光的蛋白了,还有FLuc,RLuc,这是两种需要激发的荧光蛋白
染料有lucifer!Gfp rfp 地高辛标记的碱性磷酸酶
最近在看文献时,看到realtime-PCR做相对定量的时候,要求目标序列和内参序列的扩增效率必须相等。我现在要做一些基因的相对定量,所以有几个问题想问问主任和各位高手。
1.怎么看两个反应-即目标基因和内参基因是否具有相同的扩增效率?
2.每次PCR反应的扩增情况都有差异,多次反应的扩增效率岂不是都不一样了吗?
3.如何设计才能让相对定量更可行?
由于对定量PCR的接触不多,希望各位高手多多帮助!谢谢!
我想做实时荧光定量PCR,是荧光染料法,仪器是Roche公司的,做绝对定量,想自己制备目标基因标准品,如何办.请指教.
普通的节能灯,日光灯发出的光各种波长都有,波长范围很宽。激光单色性很好,波长范围很窄,波长650nm指的是这种激光笔发出的光波长在650nm附近很窄的范围里。可见光的波长范围在390—770纳米之间。红:770—622nm;橙:622—597nm;黄:597—577nm;绿:577—492nm;蓝靛:492—455nm;紫:455—390nm。650nm应该是红光。所以是红色光的激光笔。
对不同材料来说不同,绝大多数情况下,发射波长会随着激发波长的偏移而有所偏移。 对于固态物质,主要是因为分子与其它材料形成了π建 对于量子点溶液,激发波长也会显著导致发射光谱的不同。但是不是绝对的,比如对于Alex555分子,发射波长的便宜往往就相对较小,这是由于分子内部的能带结构所决定的。 如果是单纯的回答问题,答案是:有关。
http://www.dojindo.cn/products/C/cfse.htm
罗丹明B,
我是定量PCR的新手,有很多问题要请教大家。
我做的病毒的普通PCR结果还可以。我现在要做该病毒的定量。用的是ICycler定量PCR仪器。有那位高手能告诉我怎样操作该仪器。
我还要重新设计目的基因片段的因物吗?如果不用重新设计,那我下一步应该为做定量PCR做哪些准备呐?还需要设计参照模板吗?
这种实验的把握性有多大?
大家有什么更好的建议吗?