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实验方法原理 | 在酶测定中二氧化碳的释放可以用压力计或14C1-丙酮酸盐测定。在此将描述一个与ADH有关的实验。 | ||||||||||
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实验材料 | 酶样品 试剂、试剂盒 | 柠檬酸缓冲液丙酮酸焦磷酸硫胺素MgCl2NADHADH 仪器、耗材 | 分光光度计 实验步骤 | 实验所需「试剂」具体见「其他」 0.98ml实验混合物 0.02ml酶样品 记录340nm、25℃处吸光值的减少,ε340=6.3×103l/(mol·cm)。 注意事项 | 展开 其他 | 试剂: 0.2mol/L柠檬酸缓冲液,pH6.0 1mol/L丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110.0;1.1g溶于10mlH2O) 0.01mol/L焦磷酸硫胺素(ThDP,脱竣辅酶,Mr=460.8;46.1mg溶于10mlH2O) 0.1mol/LMgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203mg溶于10mlH2O) 0.01mol/LNADH(二钠盐,Mr=709.4;71mg溶于10mlH2O) ADH来自酵母(20mg/ml) |
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发布于 : 2018-08-10
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