
BoilingPoint:175°/0.01sub
MeltingPoint:220-3°
MolecularWeight:406.63
HMISKey:2-2-0-X
Formula:C22H38CaO4
Application:EmployedinMOCVDofthinfilmsuperconductors.1,2
FormsCaSwithH2S<450° suitable="" for="" electroluminescent="">450°>3
Reference:1.Kobayashi,K.etal.Chem.Lett.1989,1415.
2.Richeson,D.etal.Appl.Phys.Lett.1989,54,2154.
3.Rautanen,J.etal.Appl.Surf.Sci.1994,82/83,553.
AdditionalProperties:Metalcontent:9.0-10.7%Ca
Soluble:ethanol,toluene,methoxyethanolDecomposes190?;formsCaOat625?
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对在动物体内发生免疫反响而言,大多数多肽的分子量都太小。将多肽与载体蛋白如KLH等交联以后,不仅能添加抗原的巨细,也能增强免疫性。咱们能够提供与KLH和BSA两种蛋白的交联。大多数客户挑选与KLH交联,由于KLH的免疫性非常好,而且BSA在许多试验中作为Blocking试剂,由于动物体内既会发生对多肽的抗体也会发生对载体蛋白的抗体,这么会呈现假阳性。
二、抗体的运用
由于抗体与许多生物分子,以蛋白和多肽等尤为明显,有很强的联系才能,抗体在生物医学研讨中占据共同的主要位置,在对蛋白的特性、含量的测定、散布状况的分析和蛋白的确证等方面都需要用到抗体。例如:确诊试剂盒如早孕试剂盒等,蛋白microalloy、immunohistochemistry 和普通的ELISA试验等。由于抗体有对特定分子很强的联系才能的特点,用抗体进行体内医治成了许多尽力的方向。成功的典范包含Genetech的Herceptin,用于医治一类特殊的乳腺癌和IDEC药业公司的Ritaxan,用于特定类型的Non-Hodgkin`s Lymphomas B-细胞。
三、抗原和辨认区域
大多数状况下,antigen和immunogen两个字是能够交换运用的,它们的差别是很小的。他们是别离指一个分子与免疫系统之间的两种类型的相互作用。一个immunogen是指能使一个生物组织的免疫系统发生免疫反响的分子,而一个antigen是指能与这种免疫反响的产品联系的分子,所以immunogen一定是antigen,但antigen纷歧定是immunogen,咱们这儿通用antigen,特指能与免疫反响的产品—抗体联系的分子。 辨认区域(epitopes)是指一个抗原分子中一个与抗体直接联系的一段特定的序列,关于任何抗原(抗原蛋白),很有可能有多个抗体辨认区域,对出产抗体而言,易于抗体辨认的部位的辨认区域最为理想。
四、进行KLH交联的化学办法
我们用MBS活化KLH,这么能将载体蛋白(KLH)上面的自在-SH与多肽末端的Cys的侧链-SH连接起来,这种办法直接,特异性高,而且安稳,一般挑选对免疫不主要的一端进行交联。 EDC活化载体上的-COOH,将载体的-COOH和多肽的-NH2连接起来也是一种可行的办法。但咱们只主张在多肽序列中有多个Cys时采用该办法。如果肽链中含有多个-COOH或-NH2基因,不主张运用该办法,由于会构成多重点交联的状况,使多肽构造受影响。常用载体蛋白除KLH外,还有BSA,Ovalbumin等,构成KLH的优势是它不搅扰ELISA或Western Blot等试验。
五、对抗原多肽交联适宜的肽链长度
一般主张10-15个残基进行交联。肽链越长,抗体辨认的区域越多,但也就越多时机构成安稳的二级构造。就不再是天然的方式了。太短的肽一般是没有用的,除非有足够的理由,如与有关宗族蛋白或别的蛋白有序列同源性等。
六、KLH交联多肽溶液呈乳状的要素
KLH是一个很大的而且聚合的蛋白。由于它的构造和巨细,它在水中的溶解度是很有限的,因而是乳状,这并不影响它的免疫性,这种混浊的溶液能够直接免疫动物。
七、抗体的产值
抗体的产值取决于许多要素:辨认区域的挑选,多肽的合成,载体的交联,免疫的操作步骤和动物的生理系统等等,因而抗体的产值是不等的。5-25mg都归于正常规模。
要用几种不同材料来做这个实验
还要自己设计试验方法步骤所用仪器用品!
实在很是头疼谢谢!
聚丙烯酰胺凝胶有以下优点:
①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N,N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有
格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物,没有或很少带有离子的侧基,因而电渗作用比较小,不易和样品相互作用。
②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质,在聚合前可调节单体的浓度比,形成
不同程度交链结构,其空隙度可在一个较广的范围内变化,可以根据要分离物质分子
的大小,选择合适的凝胶成分,使之既有适宜的空隙度,又有比较好的机械性质。一
般说来,含丙烯酰胺7-7.5%的凝胶,机械性能适用于分离分子量范围不1万至100万物
质,1万以下的蛋白质则采用含丙烯酰胺15-30%的凝胶,而分子量特别大的可采用含
丙烯酰胺4%的凝胶,大孔胶易碎,小孔胶则难从管中取出,因此当丙烯酰胺的浓度增 加时可以减少双含丙烯酰胺,以改进凝胶的机械性能。
③在一定浓度范围聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明,易观察,可用检测仪直接测定。
④丙烯酰胺是比较纯的化合物,可以精制,减少污染。合成聚丙烯酰胺凝胶的原料是丙烯酰胺和甲撑双丙烯酰胺。丙烯酰胺称单体,甲撑双
丙烯酰胺称交联剂,在水溶液中,单体和交联剂通过自由基引发的聚合反应形成凝 胶。
在聚丙烯酰胺凝胶形成的反应过程中,需要有催化剂参加,催化剂包括引发剂和
另速剂两部分。引发剂在凝胶形成中提供始自由基,通过自由基的传递,使丙烯酰胺
成为自由基,发动聚合反应,加速剂则可加快引发剂放自由基的速度。常用的引发剂 和加速剂的配伍如下表:
聚合反应催化剂配伍
引 发 剂 加 速 剂
(NH4)2S2O8 TEMED
(NH4)2S2O8DMAPN
核 黄 素 TEMED
注:(NH4)2S2O8,过硫酸胺 TEMED:N,N,N,N';四甲基乙二胺 DMAPN:β-二甲基胺基丙晴
用过硫酸铵引发的反应称化学聚合反应;用核黄素引发,需要强光照射反应液, 称光聚合反应。 聚丙烯酰胺聚合反应可受下列因素影响:
1、大气中氧能淬灭自由基,使聚合反应终止,所以在聚合过程中要使反应液与空气 隔绝。 2、某些材料如有机玻璃,能抑制聚合反应。
3、某些化学药物可以减慢反应速度,如赤血盐。 4、温度高聚合快,温展开
在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题.
重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因.现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性.为此需要:
a、鉴定分析参与基因表达调控的DNA元件;
b、分离并鉴定这些顺式元件特异性结合的蛋白质因子;
这些问题的研究都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用.
研究DNA-蛋白质相互作用的实验方法主要包括:
a、凝胶阻滞实验; b、DNase 1 足迹实验;
c、甲基化干扰实验; d、体内足迹实验; f、拉下实验.
指在光、热、高能辐射、机械力、超声波和交联剂等作用下,大分子链间通过化学键联结起来,形成网状或体形结构高分子的过程。橡胶的硫化、不饱和树脂的交联、环氧树脂的熟化等都是化学交联的例子。通过化学交联可改善聚合物的性能。如聚乙烯的化学交联可提高其强度和耐热性,又如皮革的鞣制过程是利用其蛋白质分子与甲醛作用,生成交联桥,以至失去溶解性。