CHOLIC ACID (2,2,4,4-D4, 98%)
Item Number | DLM-2611-PK |
Chemical Formula | C24H36D4O5 |
Unlabeled CAS# | 81-25-4 |
Labeled CAS# | 116380-66-6 |
Molecular Weight* | 412.60 |
Chemical Purity | 98% |
* For isotopically labeled compounds, MW listed is for the fully enriched product. | |
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1.用这个人类膜蛋白c端末短肽(14个残基,478-492)偶联KLH生产的兔多克隆抗体(abcam公司产品)
2.用大鼠的同源膜蛋白c端(具体哪一段不清楚)生产的兔多克隆抗体(abcam公司产品),我比对过人和大鼠的这个膜蛋白,同源性很高,c端完全一样(这里也很困惑公司为什么说是大鼠来源的)
3.用这个人类膜蛋白两个跨膜区之间的一个loop环序列(42个残基,218-260)生产的兔多克隆抗体(santa公司产品)
这三个抗体理论上来讲哪个更好些呢?请有经验的大虾给予指点!
另:我听说abcam的抗体比santa好,是吗?
在线等,急!
本人使用的Collagen是sigma公司的,TypeI,BovineCollagenSolution,浓度为6mg/ml,用浓度为1M的NaOH溶液进行中和。200微升Collagen用了30微升的NaOH溶液,在调PH过程中有絮状物质产生并有局部凝胶,然后将调好PH的Collagen放至细胞培养箱中进行培养,2个小时之后也没有凝胶。是NaOH溶液加多了还是没有搅拌均匀,现在还在摸索阶段,不知道具体该加多少NaOH,还有如何将溶液混合均匀是个问题。求大神指导
明胶与干酪素都是蛋白质类,其分子结构同属氨基酸,但前者比后者价格便宜很多,而且在我国的产盆很大,因此具有代替干酪素做涂料胶粘剂的可能性。
高分子化合物是指那些由众多原子或原子团主要以共价键结合而成的相对分子量在一万以上的化合物,由千百个原子彼此以共价键结合形成相对分子质量特别大、具有重复结构单元的化合物(可分为无机高分子化合物和有机高分子化合物)。
是由一类相对分子质量很高的分子聚集而成的化合物,也称为高分子、大分子等。大多数高分子的相对分子质量在一万到百万之间,其分子链是由许多简单的结构单元通过共价键重复连接而成。一般把相对分子质量高于10000的分子称为高分子。高分子通常由10^3~10^5个原子以共价键连接而成。由于高分子多是由小分子通过聚合反应而制得的,因此也常被称为聚合物或高聚物,用于聚合的小分子则被称为“单体”。
举例:纤维素、蛋白质、蚕丝、橡胶、淀粉等天然高分子化合物,以及以高聚物为基础的合成材料,如各种塑料,合成橡胶,合成纤维、涂料与粘接剂等。
同一种高分子化合物的分子链所含的链节数并不相同,所以高分子化合物实质上是由许多链节结构相同而聚合度不同的化合物所组成的混合物,其相对分子质量与聚合度都是平均值。
高分子化合物几乎无挥发性,常温下常以固态或液态存在。固态高聚物按其结构形态可分为晶态和非晶态。前者分子排列规整有序;而后者分子排列无规则。同一种高分子化合物可以兼具晶态和非晶态两种结构。大多数的合成树脂都是非晶态结构。
高分子的分子结构基本上只有两种,一种是线型结构,另一种是体型结构。线型结构的特征是分子中的原子以共价键互相连结成一条很长的卷曲状态的“链”(叫分子链)。体型结构的特征是分子链与分子链之间还有许多共价键交联起来,形成三度空间的网络结构。这两种不同的结构,性能上有很大的差异。
我现在做关于细胞膜分子交联,然后用western检测多聚体的实验
遇到很大的困难
刚开始用真核细胞做,就发现细胞交联后提取蛋白,比未交联的细胞蛋白总量减少
后来用原核先提取蛋白做实验
发现交联终止后,做western交联的孔曝光没有条带,后来用同样的方法重新做了一次PAGE,染胶,发现蛋白不见了
为什么交联后蛋白减少或是不见了呢
我用的都是Pierce公司的交联剂,用过EGS和BOSCOES,都有同样的问题
方法是综合说明书和一片文献上来的
到底问题出在哪里呢
请各位大侠帮帮忙
实验卡在这里进行不下去了
我快急死了
请有经验的,用过交联剂的老师,同学多多指导
万分感谢!!
对在动物体内发生免疫反响而言,大多数多肽的分子量都太小。将多肽与载体蛋白如KLH等交联以后,不仅能添加抗原的巨细,也能增强免疫性。咱们能够提供与KLH和BSA两种蛋白的交联。大多数客户挑选与KLH交联,由于KLH的免疫性非常好,而且BSA在许多试验中作为Blocking试剂,由于动物体内既会发生对多肽的抗体也会发生对载体蛋白的抗体,这么会呈现假阳性。
二、抗体的运用
由于抗体与许多生物分子,以蛋白和多肽等尤为明显,有很强的联系才能,抗体在生物医学研讨中占据共同的主要位置,在对蛋白的特性、含量的测定、散布状况的分析和蛋白的确证等方面都需要用到抗体。例如:确诊试剂盒如早孕试剂盒等,蛋白microalloy、immunohistochemistry 和普通的ELISA试验等。由于抗体有对特定分子很强的联系才能的特点,用抗体进行体内医治成了许多尽力的方向。成功的典范包含Genetech的Herceptin,用于医治一类特殊的乳腺癌和IDEC药业公司的Ritaxan,用于特定类型的Non-Hodgkin`s Lymphomas B-细胞。
三、抗原和辨认区域
大多数状况下,antigen和immunogen两个字是能够交换运用的,它们的差别是很小的。他们是别离指一个分子与免疫系统之间的两种类型的相互作用。一个immunogen是指能使一个生物组织的免疫系统发生免疫反响的分子,而一个antigen是指能与这种免疫反响的产品联系的分子,所以immunogen一定是antigen,但antigen纷歧定是immunogen,咱们这儿通用antigen,特指能与免疫反响的产品—抗体联系的分子。 辨认区域(epitopes)是指一个抗原分子中一个与抗体直接联系的一段特定的序列,关于任何抗原(抗原蛋白),很有可能有多个抗体辨认区域,对出产抗体而言,易于抗体辨认的部位的辨认区域最为理想。
四、进行KLH交联的化学办法
我们用MBS活化KLH,这么能将载体蛋白(KLH)上面的自在-SH与多肽末端的Cys的侧链-SH连接起来,这种办法直接,特异性高,而且安稳,一般挑选对免疫不主要的一端进行交联。 EDC活化载体上的-COOH,将载体的-COOH和多肽的-NH2连接起来也是一种可行的办法。但咱们只主张在多肽序列中有多个Cys时采用该办法。如果肽链中含有多个-COOH或-NH2基因,不主张运用该办法,由于会构成多重点交联的状况,使多肽构造受影响。常用载体蛋白除KLH外,还有BSA,Ovalbumin等,构成KLH的优势是它不搅扰ELISA或Western Blot等试验。
五、对抗原多肽交联适宜的肽链长度
一般主张10-15个残基进行交联。肽链越长,抗体辨认的区域越多,但也就越多时机构成安稳的二级构造。就不再是天然的方式了。太短的肽一般是没有用的,除非有足够的理由,如与有关宗族蛋白或别的蛋白有序列同源性等。
六、KLH交联多肽溶液呈乳状的要素
KLH是一个很大的而且聚合的蛋白。由于它的构造和巨细,它在水中的溶解度是很有限的,因而是乳状,这并不影响它的免疫性,这种混浊的溶液能够直接免疫动物。
七、抗体的产值
抗体的产值取决于许多要素:辨认区域的挑选,多肽的合成,载体的交联,免疫的操作步骤和动物的生理系统等等,因而抗体的产值是不等的。5-25mg都归于正常规模。
我最近在做磁珠与蛋白的偶联,想利用测上清液中剩余的蛋白量来检测偶联率,但是我发现交联剂对BCA法检测上清蛋白含量有显然影响,不知道有没有师兄师姐做过,最后是怎么解决偶联率检测的问题的。求教,谢谢!
在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题.
重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因.现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性.为此需要:
a、鉴定分析参与基因表达调控的DNA元件;
b、分离并鉴定这些顺式元件特异性结合的蛋白质因子;
这些问题的研究都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用.
研究DNA-蛋白质相互作用的实验方法主要包括:
a、凝胶阻滞实验; b、DNase 1 足迹实验;
c、甲基化干扰实验; d、体内足迹实验; f、拉下实验.
不知道你想做什么产品?
具体的反应条件会影响作出的产品
指在光、热、高能辐射、机械力、超声波和交联剂等作用下,大分子链间通过化学键联结起来,形成网状或体形结构高分子的过程。橡胶的硫化、不饱和树脂的交联、环氧树脂的熟化等都是化学交联的例子。通过化学交联可改善聚合物的性能。如聚乙烯的化学交联可提高其强度和耐热性,又如皮革的鞣制过程是利用其蛋白质分子与甲醛作用,生成交联桥,以至失去溶解性。

