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ECM BIOSCIENCES/A431 + Calyculin A (30min) Treated/100 μl/AL9101
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ECM BIOSCIENCES/A431 + Calyculin A (30min) Treated/100 μl/AL9101
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ecm
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AL9101
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Calyculin A is a serine/threonine phosphatase inhibitor that inhibits the activity of protein phosphatases PP1 and PP2A. Human carcinoma A431 cells treated with calyculin A for 30 minutes can undergo significant threonine phosphorylation, as shown by western blotting using anti-Phospho-Akt (Thr-34), cat.# AP1001, as compared to untreated, control cell lysates.

Confluent cultures of A431 cells were serum starved overnight. Cells were then either left untreated (Cat.# AL9001) or treated with Calyculin A at a final concentration of 100 nM for 30 minutes at 37°C (Cat.# AL9101). Cells were lysed in 1% SDS, 1.0 mM sodium ortho-vanadate, 1 mM sodium fluoride, 10 mM Tris (pH 7.4) buffer. Protein concentration was determined using the BCA method (Pierce) before diluting to final concentration and buffer.

Western blot analysis of A431 cells (20 µg/lane) serum starved overnight (lanes 1 & 3) and Calyculin A (100 nM) treated for 30 minutes (lanes 2 & 4). The blot was probed with anti-phospho-Akt (Thr-34) (lanes 1 & 2) or anti-Akt (lanes 3 & 4).

Cell Lysates are supplied at a concentration of 1 mg/ml in electrophoresis sample buffer (62.5 mM Tris pH 6.8, 2% SDS, 5% glycerol, 0.003% bromophenol blue, 0.9% β-mercaptoethanol). Store at –20°C. Do not boil or dilute. Stable for 1 year.

The products are are safely shipped at ambient temperature for both domestic and international shipments. Each product is guaranteed to match the specifications as indicated on the corresponding technical data sheet. Please store at -20C upon arrival for long term storage.

*All molecular weights (MW) are confirmed by comparison to Bio-Rad Rainbow Markers and to western blotmobilities of known proteins with similar MW.

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B cell and T cell lymphocytes interact with a variety of cells as part of their immune function, circulating and homing in on specific stimuli in tissues like 查看更多>
Cell adhesion is a fundamental feature of multicellular organisms including their defense mechanisms. In the later case in mammals, leukocytes play central rol 查看更多>
  多药耐药 (multidrug resistance,MDR),是指由一种药物诱发,同时对其他孙和作用机理不同的多种抗肿瘤药物具有交叉耐药性。目前认为 MDR 是肿瘤细胞对化疗药物毒性损伤的最重要的自我保护防御机制,是肿瘤细胞耐药的常见形式,也是白血病化疗失败和复发的主要原因而成为当今肿瘤治疗的一大难题,据美国癌症协会估计,90% 以上肿瘤患者死于不同程度的耐药。据此逆转 查看更多>
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一、ChIP实验的技术基因表达的控制从根本上来说是蛋白-DNA的相互作用。这些相互作用可通过生化分析轻松地弄清,如凝胶阻滞分析。但如果研究人员想知道基因组DNA的特定部分是否参与,通常会选择染色质免疫沉淀技术(ChIP)。ChIP是在全基因组范围内识别DNA与蛋白质相互作用的标准方法,最初用于组蛋白修饰研究,后来也用于转录因子。整个实验涉及到一系列蛋白质组学和 查看更多>
Like ubiquitin, SUMO (small ubiquitin-related modifier) proteins are small protein tags that are conjugated to proteins to modify their function. The ubiquiti 查看更多>
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一、电泳分类 根据缓冲体系和凝胶孔径的不同,可以分为连续电泳和不连续电泳;根据样品的处理方式的不同,又可以分为变性SDS-PAGE及活性SDS-PAGE电泳,以及带有烷基化作用的还原SDS电泳;根据电泳的形式,又可以分为圆盘电泳,水平电泳,垂直电泳及平板电泳。 目前实验室常用的为不连续的变性的还原SDS-PAGE垂直电泳。 二、垂直电泳装备 三、不连续电泳 用浓缩胶(上 查看更多>
范可尼贫血(FA)是骨髓衰竭(BMF)的最常见遗传性原因,现已鉴定 18 个 FA 基因,其中 FANCA、FANCC、FANCG 和 FANCD2 最常见。FA 在儿童早期出现进行性 BMF,此时通过染色体断裂试验通常可以诊断。FA 患者的造血干细胞基因终生处于不断变化中,可发展为骨髓增生异常综合征(MDS)或急性髓系白血病(AML),突出特征是染色体不平衡易位,导致拷贝数异常。此外 FA 患者发生实体瘤 查看更多>
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1.凝胶阻滞实验:在凝胶电泳中,由于电场的作用,裸露的DNA分子向正电极移动距离的大小是同其分子量的对数成反比.如果某种DNA分子结合上一种特殊的蛋白质,那么由于分子量的加大它在凝胶中的迁移作用便会受到阻滞,于是朝正极移动的距离也就相应的缩短,因而在凝胶中出现滞后的条带,这就是凝胶阻滞实验的基本原理. 2.DNaseI足迹试验(DNaseI footFIrinting assay) DNaseI足迹试验是一种测定DNA结合蛋白在DNA上的准确结合位点的技术.当DNA分子中的某一区段同特异的转录因子结合之后便可以得到保护而免受DNaseI 酶的切割作用,而不会产生出相应的切割分子,结果在凝胶电泳放射性自显影图片上便出现了一个空白区,俗称为“足迹”. 3.甲基化干扰实验(Methylation interference assay)是根据DMS(硫酸二甲酯)能够使DNA分子中裸露的鸟嘌呤(G)残基甲基化,而六氢吡啶又会对甲基化的G残基作特异性的化学切割这一原理设计的另一种研究蛋白质同DNA相互作用的实验方法. 4.Pull-down实验:拉下实验又叫做蛋白质体外结合实验(binding assay in vitro),是一种在试管中检测蛋白质之间相互作用的方法.其基本原理是将某种小肽(例如生物素、6-His标签以及谷胱甘肽转移酶等)的编码基因与诱饵蛋白的编码基因重组,表达为融合蛋白.分离纯化融合蛋白并与磁珠结合,使之固相化之后,再与表达目的细胞提取物混合保温适当时间,例如在4℃下保温过夜,使目标蛋白同已经固定在磁珠表面的融合蛋白中的诱饵蛋白充分的结合.然后回收磁珠,pull出目的片段 5.生物芯片技术是基于生物大分子间相互作用的大规模并行分析方法,使得生命科学研究中所涉及的样品反应、检测、分析等过程得以连续化、集成化和微型化,现已成为当今生命科学研究领域发展最快的技术之一 6.染色体沉淀:用细菌基因组与目的蛋白孵育,然后用甲醛交联,随机断裂,然后WB分析. 7.酵母单杂交: 酵母单杂交(Yeast one-hybrid)是根据DNA结合蛋白(即转录因子)与DNA顺式作用元件结合调控报道基因表达的原理,克隆与靶元件特异结合的转录因子基因(cDNA)的有效方法.其理论基础是:许多真核生物的转录激活子由物理和功能上独立的DNA结合区(DNA-binding domain BD)和转录激活区(Activation domain AD)组成,因此可构建各种基因与AD的融合表达载体,在酵母中表达为融合蛋白时,根据报道基因的表达情况,便能筛选出与靶元件有特异结合区域的蛋白.理论上,在单杂交检测中,任何靶元件都可被用于筛选一种与之有特异结合区域的蛋白.
氮丙啶交联剂 123
eyhwplxy2021-08-02
相关疾病:中毒性别:男孩,年龄:8岁主诉:误喝多功能氮丙啶交联剂4小时5病史与辅助检查:月17日下午5点多误喝多功能氮丙啶交联剂(制衣服的染料)一口,约15ML左右,喝后即呛咳,家人立刻发现,随后用手刺激咽喉推吐......
我需要做一个人类膜蛋白的co-ip,现在有三种抗体可以选择,请问大侠我选择哪种比较好:
1.用这个人类膜蛋白c端末短肽(14个残基,478-492)偶联KLH生产的兔多克隆抗体(abcam公司产品)
2.用大鼠的同源膜蛋白c端(具体哪一段不清楚)生产的兔多克隆抗体(abcam公司产品),我比对过人和大鼠的这个膜蛋白,同源性很高,c端完全一样(这里也很困惑公司为什么说是大鼠来源的)
3.用这个人类膜蛋白两个跨膜区之间的一个loop环序列(42个残基,218-260)生产的兔多克隆抗体(santa公司产品)
这三个抗体理论上来讲哪个更好些呢?请有经验的大虾给予指点!
另:我听说abcam的抗体比santa好,是吗?
在线等,急!
实验五DNS法分析蛋白质N末端 123
青蛙爱吃蛋♀2021-08-11
这个课题怎么做?
要用几种不同材料来做这个实验
还要自己设计试验方法步骤所用仪器用品!

实在很是头疼谢谢!
AMPK研究进展123
2021-08-08
宿州景宇环保:您好,可以给您提供小样试试
蛋白质的交联作用 :在一定条件下,蛋白质分子问可以通过其侧链上的特定基团联结在一起形成更大的分子从而使蛋白质变性,即分子交联。在氧化剂(如空气中的氧)存在的条件下,蛋白质分子可发生硫氢基与硫氢基的氧化型交联从而生成二硫键。蛋白质中的半胱氨酸易于发生这种二硫键型交联,使食物的机械强度增加,例如面粉在加水揉制成面团的过程中就发生了这样的变化。拒绝采集!在强热下,蛋白质分子可通过氨基酸残基上的羟基、氨基、羧基之间的脱水缩台而交联,而这种交联多数情况下不利于我们对食品蛋白质的消化利用。在碱性条件下,蛋白质中的半胱氨酸(胱氨酸)或羟基氨酸可发生消去反厦脱去H。s、HzO等,产生脱氢丙氨酸残基。该残基还可与赖氨酸反应.生成对人体不利的赖丙氨酸,使可利用的赖氨酸含量降低-严重降低蛋白质的营养价值。
Chemical cross-linking化学交联

指在光、热、高能辐射、机械力、超声波和交联剂等作用下,大分子链间通过化学键联结起来,形成网状或体形结构高分子的过程。橡胶的硫化、不饱和树脂的交联、环氧树脂的熟化等都是化学交联的例子。通过化学交联可改善聚合物的性能。如聚乙烯的化学交联可提高其强度和耐热性,又如皮革的鞣制过程是利用其蛋白质分子与甲醛作用,生成交联桥,以至失去溶解性。
可用气相色谱法测定聚氨酯涂料中的游离甲苯二异氰酸酯。

甲苯二异氰酸酯(TDI)有两种异构体:2,4-甲苯二异氰酸酯和2,6-甲苯二异氰酸酯。甲苯二异氰酸酯是水白色或淡黄色液体,具有强烈的刺激性气味,在人体中具有积聚性和潜伏性,对皮肤、眼睛和呼吸道有强烈刺激作用,吸入高浓度的甲苯二异氰酸酯蒸气会引起支气管炎、支气管肺炎和肺水肿;液体与皮肤接触可引起皮炎。液体与眼睛接触可引起严重刺激作用,如果不加以治疗,可能导致永久性损伤。长期接触甲苯二异氰酸酯可引起慢性支气管炎。对甲苯二异氰酸酯过敏者,可能引起气喘、伴气喘、呼吸困难和咳嗽。
与乙醚、二甘醇、丙酮、四氯化碳、苯、氯苯、煤油、橄榄油混溶。能与含羟基的化合物、水、胺和具有活泼氢原子的化合物反应生成氨基甲酸酯、脲、氨基脲等。甲苯用混酸硝化得到2,4-和2,6-二硝基甲苯,然后在镍催化剂存在下加氢还原得到2,4-和2,6-二氨基甲苯,再在氯苯溶液中与光气反应制得。主要作为聚氨酯树脂的生产原料,用于生产聚氯酯泡抹塑料、涂料、橡胶、粘合剂、密封剂等。也可用作橡胶硫化剂、蛋白质交联剂等。包括泡沫塑料;聚氨酯涂料;聚氨酯橡胶;聚酰亚胺纤维和胶粘剂等也有一些应用。
本人实验中将白蛋白微气泡与抗体进行交联,用了戊二醛、SPDP交联剂,效果不是很好,请问有没有更好的方法呢?
食品中蛋白质的功能性质123
黎约将夜の30302018-02-09
1.乳化性质
  许多食品属于乳胶体(冰淇淋、豆奶),蛋白质成分在稳定这些胶态体系中通常起着重要的作用。天然乳胶体靠脂肪球“这种“膜”由三酰甘油、磷脂、不溶性脂蛋白和可溶性蛋白的连续吸附层所构成。蛋白质一般对水/油(W/O)型乳胶液的稳定性较差。这可能是因为大多数蛋白质的强亲水性使大量被吸附的蛋白质分子位于界面的水相一侧。蛋白质的表面活性不仅与蛋白质中氨基酸的组成、结构、立体构象、分子中极性和非极性残基的分布与比例,二硫键的数目与交联,以及分子的大小、形状和柔顺性等内在因素有关,而且与外界因素,甚至加工操作有关。凡是能影响蛋白质构象和亲水性与疏水性的环境因素,诸如pH、温度、离子强度和盐的种类、界面的组成、蛋白质浓度、糖类和低分子量表面活性剂,能量的输入,甚至形成界面加工的容器和操作顺序等,都将影响蛋白质的表面活性。
  2.起泡性
  食品泡沫通常是气泡在连续的液相或含可溶性表面活性剂的半固相中形成的分散体系。种类繁多的泡沫其质地大小不同,例如蛋白质酥皮、蛋糕、棉花糖和某些其他糖果产品、点心顶端配料、冰淇淋、蛋奶酥、啤酒泡沫、奶油冻和面包等。大多数情况下,气体是空气或CO2,连续相是含蛋白质的水溶液或悬浊液。某些食品泡沫是很复杂的胶态体系,例如冰淇淋中存在分散的和群集的脂肪球(多数是固体)、乳胶体(或悬浊液)、分散的冰晶悬浮体,多糖凝胶、糖和蛋白质的浓缩溶液以及空气气泡。各种泡沫的气泡大小不相同,直径从1微米到几cm不等,气泡的大小取决于多种因素,例如,液相的表面张力和粘度、输入的能量,分布均匀的细微气泡可以使食品产生稠性、细腻和松软性,提高分散性和风味感。
  3.凝胶性
  变性的蛋白质分子聚集并形成有序的蛋白质网络结构过程称为胶凝作用。胶凝是蛋白 质的重要功能性质,在许多食品的制备中起着主要作用,包括各种乳品、果冻、凝结蛋白、明胶凝胶、各种加热的碎肉或鱼制品、大豆蛋白质凝胶、膨化或喷丝的组织化植物蛋白和面包面团的制作等,中国人喜爱的豆腐食品,就是大豆蛋白胶凝作用的产物。蛋白质胶凝作用不仅可用来形成固态粘弹性凝胶,而且还能增稠,提高吸水性和颗粒粘结、乳状液或泡沫的稳定性。
  4.溶解度
  大豆蛋白质在溶解状态下才能发挥其在食品体系中的功能特性。大豆蛋白质的溶解度是指大豆蛋白质以胶体的形式分散到水中的能力。蛋白质分子的极性表面和所带的净电荷有助于分散体系的稳定。大豆蛋白质的溶解度可以用可溶性氮指数(NSI)和蛋白质分散度指数(PDI)两种方法表示。影响大豆蛋白质溶解度的因素主要包括温度、pH和无机盐。
用在什么地方的?这个好专业!
能够使丙烯酰胺交联,属于交联剂