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Addgene/pAAV-hSyn-Cre-P2A-dTomato/1unit/107738-AAVrg
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Addgene/pAAV-hSyn-Cre-P2A-dTomato/1unit/107738-AAVrg
品牌 / 
Addgene
货号 / 
107738-AAVrg
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ItemCatalog #DescriptionQuantityPrice (USD)
Plasmid107738Standard format: Plasmid sent in bacteria as agar stab1$75
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AAV5107738-AAV5Virus (100 µL at titer ≥ 7×10¹² vg/mL)and Plasmid.More Information
$380
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AAV Retrograde107738-AAVrgVirus (100 µL at titer ≥ 7×10¹² vg/mL)and Plasmid.More Information
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This material is available to academics and nonprofits only.

Backbone

  • Vector backbone
    pAAV-hSyn1-DIO-SSFO-EYFP-P2A-nlsdTomato-WPRE-BGHpA
    (Search Vector Database)
  • Backbone manufacturer
    Jonathan Ting
  • Backbone sizew/o insert(bp)7022
  • Total vector size (bp)6091
  • Modifications to backbone
    A fragment containing codon-optimized Cre Recombinase, the self-cleaving peptide sequence P2A, and the red fluorescent protein dTomato was swapped into replace SSFO-EYFP-P2A-nlsdTomato in the backbone. Total AAV packaging size (including ITRs and DNA in between) is 3495 bp.
  • Vector type
    Mammalian Expression, AAV, Cre/Lox

Growth in Bacteria

  • Bacterial Resistance(s)
    Ampicillin
  • Growth Temperature
    37°C
  • Growth Strain(s)
    NEB Stable
  • Copy number
    Unknown

Gene/Insert

  • Gene/Insert name
    Cre, dTomato
  • Insert Size (bp)
    1839
  • PromoterhSyn

Cloning Information

  • Cloning methodRestriction Enzyme
  • 5′ cloning siteHindIII(not destroyed)
  • 3′ cloning siteBamHI(not destroyed)
  • 5′ sequencing primerAGTCGAGAAACCGGCTAGAG
  • 3′ sequencing primerCCAGAGGTTGATTATCGATA
  • (Common Sequencing Primers)

Resource Information

  • Supplemental Documents
    • Restriction Digest - SmaI
  • A portion of this plasmid was derived from a plasmid made by
    The sequence for codon-optimized Cre recombinase was originally published by Rolf Sprengel's lab in Shimshek et al, 2002 (PMID: 11835670) . The sequence for dTomato was originally published by Roger Tsien's lab in Shaner et al, 2008 (PMID: 18454154)
  • Terms and Licenses
    • UBMTA
    • Takara Bio Limited Use Label License (formerly Clontech)
  • Industry Terms
    • Not Available to Industry

Depositor Comments

This plasmid can be used to express codon-optimized Cre and, separately, the red fluorescent dTomato. It is useful for studies aiming to fluorescently label cells that have undergone Cre-recombination of a Lox-containing DNA sequence.

Information for AAV5 (Catalog # 107738-AAV5)(Back to top)

Purpose

Ready-to-use AAV5 particles produced from pAAV-hSyn-Cre-P2A-dTomato (#107738). In addition to the viral particles, you will also receive purified pAAV-hSyn-Cre-P2A-dTomato plasmid DNA.

hSyn-driven expression of Cre and dTomato (physically separate). These AAV preparations are suitable purity for injection into animals.

Delivery

  • Volume100 µL
  • Titer≥ 7×10¹² vg/mL
  • Pricing$350 USD for preparation of 100 µL virus + $30 USD for plasmid.
  • StorageStore at -80℃. Thaw just before use and keep on ice.
  • ShipmentViral particles are shipped frozen on dry ice. Plasmid DNA (≥ 200ng) will also be included in the shipment.

Viral Production & Use

  • Packaging Plasmidsencode adenoviral helper sequences and AAV rep gene, AAV5 cap gene
  • BufferPBS + 0.001% Pluronic F-68 + 200 mM NaCl
  • SerotypeAAV5
  • PurificationIodixanol gradient ultracentrifugation
  • Reporter GenedTomato (physically separate, not a fusion protein)

Biosafety

Requestor is responsible for compliance withtheir institution"s biosafety regulations.Lentivirus is generally considered BSL-2. AAV isgenerally considered BSL-1, but may requireBSL-2 handling depending on the insert.Biosafety Guide

Resource Information

  • Terms and Licenses
    • Terms of Use for Viral Vectors
  • Industry Terms
    • Not Available to Industry

Viral Quality Control

Quality Control:
  • Addgene ensures high quality viral vectors by optimizing and standardizing production protocols and performing rigorous quality control (QC) (see a list of our QC assays). Thespecific QC assays performed varies for each viral lot. To learn which specific QC assays were performed on your lot, please contact us.
  • Titer: the exact titer of your sample will be reported on the tube. The titer you see listed on this page is the guaranteed minimum titer. See how titers are measured.

Visit our viral production page for moreinformation.

Information for AAV Retrograde (Catalog # 107738-AAVrg)(Back to top)

Purpose

Ready-to-use AAV Retrograde particles produced from pAAV-hSyn-Cre-P2A-dTomato (#107738). In addition to the viral particles, you will also receive purified pAAV-hSyn-Cre-P2A-dTomato plasmid DNA.

hSyn-driven expression of Cre and dTomato (physically separate). These AAV were produced with a retrograde serotype, which permits retrograde access to projection neurons. These AAV preparations are suitable purity for injection into animals.

Delivery

  • Volume100 µL
  • Titer≥ 7×10¹² vg/mL
  • Pricing$350 USD for preparation of 100 µL virus + $30 USD for plasmid.
  • StorageStore at -80℃. Thaw just before use and keep on ice.
  • ShipmentViral particles are shipped frozen on dry ice. Plasmid DNA (≥ 200ng) will also be included in the shipment.

Viral Production & Use

  • Packaging Plasmidsencode adenoviral helper sequences and AAV rep gene, AAV retrograde cap gene from rAAV2-retro helper (plasmid #81070)
  • BufferPBS + 0.001% Pluronic F-68 + 200 mM NaCl
  • SerotypeAAV retrograde (AAVrg)
  • PurificationIodixanol gradient ultracentrifugation
  • Reporter GenedTomato (physically separate, not a fusion protein)

Biosafety

Requestor is responsible for compliance withtheir institution"s biosafety regulations.Lentivirus is generally considered BSL-2. AAV isgenerally considered BSL-1, but may requireBSL-2 handling depending on the insert.Biosafety Guide

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  • Terms and Licenses
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  • Industry Terms
    • Not Available to Industry

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  • Addgene ensures high quality viral vectors by optimizing and standardizing production protocols and performing rigorous quality control (QC) (see a list of our QC assays). Thespecific QC assays performed varies for each viral lot. To learn which specific QC assays were performed on your lot, please contact us.
  • Titer: the exact titer of your sample will be reported on the tube. The titer you see listed on this page is the guaranteed minimum titer. See how titers are measured.

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Addgene Comments

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Like ubiquitin, SUMO (small ubiquitin-related modifier) proteins are small protein tags that are conjugated to proteins to modify their function. The ubiquiti 查看更多>
2021-09-16
北京北方同正生物技术发展有限公司在发布的双功能交联剂(五)供应信息,浏览与双功能交联剂(五)相关的产品或在搜索更多与双功能交联剂(五)相关的内容。 查看更多>
B cell and T cell lymphocytes interact with a variety of cells as part of their immune function, circulating and homing in on specific stimuli in tissues like 查看更多>
Cell adhesion is a fundamental feature of multicellular organisms including their defense mechanisms. In the later case in mammals, leukocytes play central rol 查看更多>
北京北方同正生物技术发展有限公司在发布的双功能交联剂(三)供应信息,浏览与双功能交联剂(三)相关的产品或在搜索更多与双功能交联剂(三)相关的内容。 查看更多>
一、ChIP实验的技术基因表达的控制从根本上来说是蛋白-DNA的相互作用。这些相互作用可通过生化分析轻松地弄清,如凝胶阻滞分析。但如果研究人员想知道基因组DNA的特定部分是否参与,通常会选择染色质免疫沉淀技术(ChIP)。ChIP是在全基因组范围内识别DNA与蛋白质相互作用的标准方法,最初用于组蛋白修饰研究,后来也用于转录因子。整个实验涉及到一系列蛋白质组学和 查看更多>
北京北方同正生物技术发展有限公司在发布的N-羟基琥珀酰亚胺-重氮甲烷交联剂供应信息,浏览与N-羟基琥珀酰亚胺-重氮甲烷交联剂相关的产品或在搜索更多与N-羟基琥珀酰亚胺-重氮甲烷交联剂相关的内容。 查看更多>
  多药耐药 (multidrug resistance,MDR),是指由一种药物诱发,同时对其他孙和作用机理不同的多种抗肿瘤药物具有交叉耐药性。目前认为 MDR 是肿瘤细胞对化疗药物毒性损伤的最重要的自我保护防御机制,是肿瘤细胞耐药的常见形式,也是白血病化疗失败和复发的主要原因而成为当今肿瘤治疗的一大难题,据美国癌症协会估计,90% 以上肿瘤患者死于不同程度的耐药。据此逆转 查看更多>
2021-09-15
北京北方同正生物技术发展有限公司在发布的三功能性交联剂 供应信息,浏览与三功能性交联剂 相关的产品或在搜索更多与三功能性交联剂 相关的内容。 查看更多>
范可尼贫血(FA)是骨髓衰竭(BMF)的最常见遗传性原因,现已鉴定 18 个 FA 基因,其中 FANCA、FANCC、FANCG 和 FANCD2 最常见。FA 在儿童早期出现进行性 BMF,此时通过染色体断裂试验通常可以诊断。FA 患者的造血干细胞基因终生处于不断变化中,可发展为骨髓增生异常综合征(MDS)或急性髓系白血病(AML),突出特征是染色体不平衡易位,导致拷贝数异常。此外 FA 患者发生实体瘤 查看更多>
北京北方同正生物技术发展有限公司在发布的蛋白交联剂供应信息,浏览与蛋白交联剂相关的产品或在搜索更多与蛋白交联剂相关的内容。 查看更多>
Many cell-surface receptors induce production of second messengers like PIP3, phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate, that convey signals to the cytoplasm fr 查看更多>
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大家好,请问有人使用过BS3交联剂吗?
氨基酸在化妆品中的作用123
开满一路格桑花2018-02-06
详细一些
氮丙啶交联剂 123
eyhwplxy2021-08-02
相关疾病:中毒性别:男孩,年龄:8岁主诉:误喝多功能氮丙啶交联剂4小时5病史与辅助检查:月17日下午5点多误喝多功能氮丙啶交联剂(制衣服的染料)一口,约15ML左右,喝后即呛咳,家人立刻发现,随后用手刺激咽喉推吐......
Chemical cross-linking化学交联

指在光、热、高能辐射、机械力、超声波和交联剂等作用下,大分子链间通过化学键联结起来,形成网状或体形结构高分子的过程。橡胶的硫化、不饱和树脂的交联、环氧树脂的熟化等都是化学交联的例子。通过化学交联可改善聚合物的性能。如聚乙烯的化学交联可提高其强度和耐热性,又如皮革的鞣制过程是利用其蛋白质分子与甲醛作用,生成交联桥,以至失去溶解性。
蛋白质的交联作用 :在一定条件下,蛋白质分子问可以通过其侧链上的特定基团联结在一起形成更大的分子从而使蛋白质变性,即分子交联。在氧化剂(如空气中的氧)存在的条件下,蛋白质分子可发生硫氢基与硫氢基的氧化型交联从而生成二硫键。蛋白质中的半胱氨酸易于发生这种二硫键型交联,使食物的机械强度增加,例如面粉在加水揉制成面团的过程中就发生了这样的变化。拒绝采集!在强热下,蛋白质分子可通过氨基酸残基上的羟基、氨基、羧基之间的脱水缩台而交联,而这种交联多数情况下不利于我们对食品蛋白质的消化利用。在碱性条件下,蛋白质中的半胱氨酸(胱氨酸)或羟基氨酸可发生消去反厦脱去H。s、HzO等,产生脱氢丙氨酸残基。该残基还可与赖氨酸反应.生成对人体不利的赖丙氨酸,使可利用的赖氨酸含量降低-严重降低蛋白质的营养价值。
叠氮钠会不会影响在交联剂(SMCC琥珀酰亚胺酯)作用下含氨基蛋白和含巯基蛋白的偶联?
请各位高手指点一下小弟吧!
我在选择交联剂,但我对交联剂的一些还不是很清楚,想请问大家:
1。什么叫切断条件。是不是不能切断的话就不能释放出药物
2。透膜性是什么意思。是不是指如果药物要进入细胞内的话就要选有透膜性的交联剂
3。间臂长度是不是臂越长越好
4。iodinatable是什么意思

谢谢大家!

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请遵守药学区发帖格式!请参阅本版“发帖须知新手指南”!
多谢您的支持!
明胶作为胶粘剂,其对纤维的粘合并不亚于合成树脂,其优越性在于适用期长,但其耐水性较差。为提高其耐水性,通常在明胶粘合剂中加多聚甲醛硬化交联剂,可降低明胶的水溶性,在没有改变胶原的生物降解的前提下,使得明胶分子链间形成交联键,使粘度提高,加强了凝固的结构,提高了明胶机械性能。明胶作为枯合剂,可用于砂布、砂纸的制造,此外也可用于生产胶带纸中。

  明胶与干酪素都是蛋白质类,其分子结构同属氨基酸,但前者比后者价格便宜很多,而且在我国的产盆很大,因此具有代替干酪素做涂料胶粘剂的可能性。
把混合物调节成酸性的试试,调节成碱性的试试,或同时升高温度试试
蛋白质是高分子化合物;部分糖类是高分子化合物,例如淀粉、糖元等;还有部分糖类是小分子,例如葡萄糖、果糖、蔗糖等;油脂是混合物。
高分子化合物是指那些由众多原子或原子团主要以共价键结合而成的相对分子量在一万以上的化合物,由千百个原子彼此以共价键结合形成相对分子质量特别大、具有重复结构单元的化合物(可分为无机高分子化合物和有机高分子化合物)。
是由一类相对分子质量很高的分子聚集而成的化合物,也称为高分子、大分子等。大多数高分子的相对分子质量在一万到百万之间,其分子链是由许多简单的结构单元通过共价键重复连接而成。一般把相对分子质量高于10000的分子称为高分子。高分子通常由10^3~10^5个原子以共价键连接而成。由于高分子多是由小分子通过聚合反应而制得的,因此也常被称为聚合物或高聚物,用于聚合的小分子则被称为“单体”。
举例:纤维素、蛋白质、蚕丝、橡胶、淀粉等天然高分子化合物,以及以高聚物为基础的合成材料,如各种塑料,合成橡胶,合成纤维、涂料与粘接剂等。
同一种高分子化合物的分子链所含的链节数并不相同,所以高分子化合物实质上是由许多链节结构相同而聚合度不同的化合物所组成的混合物,其相对分子质量与聚合度都是平均值。
高分子化合物几乎无挥发性,常温下常以固态或液态存在。固态高聚物按其结构形态可分为晶态和非晶态。前者分子排列规整有序;而后者分子排列无规则。同一种高分子化合物可以兼具晶态和非晶态两种结构。大多数的合成树脂都是非晶态结构。
高分子的分子结构基本上只有两种,一种是线型结构,另一种是体型结构。线型结构的特征是分子中的原子以共价键互相连结成一条很长的卷曲状态的“链”(叫分子链)。体型结构的特征是分子链与分子链之间还有许多共价键交联起来,形成三度空间的网络结构。这两种不同的结构,性能上有很大的差异。
这个问题困扰我多时了:
怎么样才能把一个重组的蛋白连接到一个已知的单克隆抗体之上,利用单抗的靶向作用导引重组蛋白到达靶区域,已有的基本路线有:
1.采用融合蛋白的方式,通过将重组蛋白与单抗的Fab段融合,产生的融合蛋白既具有单抗的作用,又具有重组蛋白的作用。
2.采用间接的方法,比如通过biotin标记单抗,再将avidin与重组蛋白连接,这样通过avidin与biotin之间的作用将两者连接起来。关键是如何将avidin与重组蛋白连接。
以上两个方法是我考虑的,但是均感觉难。
欢迎古怪可行的方法。:)谢谢!
染色质免疫沉淀,所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照.当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起.如果你是只知道你的蛋白.染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,可是双链或者是单链,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,以及DNA的鉴定,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,用chip,DNA核苷酸探针用g-32P和T4多核苷酸激酶来作末端标记,染色质断裂,或核细胞抽提液,部分纯化蛋白. ChIP.同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,结果的重复性较低.具体的试剂和步骤你上网搜搜吧~自己实验室,分离复合物和非结合的探针,将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,交联反应的逆转,样品有差异.DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢,可以用emsa,只是想验证它俩的结合,利用抗原抗体的特异性识别反应,而且对结果的分析也需要有一定的经验,DNA的纯化,还是要再优化的 emsa怎么确定已知蛋白会与什么基因的启动子结合如果已知序列,可用纯化蛋白,想钓出你的基因.因为ChIP实验涉及的步骤多
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