【求助】用于RTPCR的引物和探针是否可以用来做FISH?

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2021-08-13

问题描述：

我手上有用于RT-PCR的引物和探针（上海合成的，20bp），做培养细胞成功得到结果。现在做体内实验，不知道是否可以用这个探针来作FISH。
有的老师告诉我用甲醛固定的石蜡切片标本，因为石蜡和甲醛本身会激发荧光，作FISH效果不好，而且不容易成功。
这样的话，
1.是否需要重新设计探针做ISH？
2.检测目的mRNA只需要确定位置和在实验条件下发生的量的改变。使用FISH是否大材小用（本来我是希望能节省费用，用以前的引物探针的）？

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walter77

用户

啊，抱歉，我发帖子的时候没有考虑到这个，以前都是回帖对于发帖。到这个版块也是新手。

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walter77

用户

这个问题有站友知道吗？自己顶一下，望回答。

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walter77

用户

汇报一下：我咨询了一位老师，他的回答是绝对不能用。他的理由是rt-pcr带了双标，所以不行。我还是不明白，如果核苷酸序列是一样的话，为什么不行？接的标记物会影响结合吗？再次请教《核酸基因技术讨论版》的站友。（发一点小小的牢骚，核酸基因技术讨论版的回帖好像要比请教的帖子少，不懂各位内行站友为何不出手相助？）

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