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nanoandmore/PPP-QLC-MFMR/PPP-QLC-MFMR-10/Box of 10 AFM Probes
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4000-520-616

Cantilever:

F:75kHz
C:2.8N/m
L:225µm

Applications:

MagneticAFMProbes
HighQualityFactorAFMCantilevers

Description:

TheNANOSENSORS™PPP-QLC-MFMRAFMprobecombinesthelowdisturbanceofmagneticsamplesbyasoftmagneticcoatingwiththehighmechanicalqualityfactorunderultrahighvacuumconditionsoftheQ30K-Plus-Series.LowcoercivityandaQ-factorofmorethan35,000enablemagneticforcemicroscopyofsoftmagneticsamplesandhighoperationstABIlityunderUHVconditions.Duetothelowcoercivityofthetipcoatingthemagnetisationofthetipwilleasilygetreorientedbyhardmagneticsamples.
 
TheSPMprobeoffersuniquefeatures:

  • softmagneticcoatingonthetipside(coercivityofapp.0.75Oe,remanencemagnetizationofapp.225emu/cm3)
  • effectivemagneticmoment0.75xofstandardprobes
  • excellenttiprADIusofcurvature
  • magneticresolutionbetterthan35nm
  • Alcoatingondetectorsideofcantileverenhancingthereflectivityofthelaserbeambyafactorofabout2.5
  • excellentmechanicalQ-factorunderUHVconditionsforhighsensitivity
  • precisealignmentofthecantileverposition(within+/-2µm)whenusedwiththeAlignmentChip
  • compatIBLewithPointProbe®PlusXY-AlignmentSeries

Asbothcoatingsarealmoststress-freethebendingofthecantileverduetostressislessthan3.5%ofthecantileverlength.Forenhancedsignalstrengththemagnetizationofthetipbymeansofastrongpermanentmagnetpriortothemeasurementisrecommended.

Thesoftmagneticcoatingonthetiphasacoercivityofapp.0.75Oeandaremanencemagnetizationofapp.225emu/cm3(thesevaluesweredeterminedonaflatsurface).

AFMTip:

  • AFMCantilever:

  • Beam
  • 225µm(215-235µm)*
  • 28µm(20-35µm)*
  • 3µm(2-4µm)*
  • 2.8N/m(0.5-9.5N/m)*
  • 75kHz(45-115kHz)*
  • *guaranteedrangeThisproductfeaturesalignmentgroovesonthebacksideoftheholderchip.
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    prR的引物一般是RNA(单链),而探针是已知碱基序列的dna或rna
    如果你做的事荧光定量PCR,其引物和一般引物在构成上是没有什么区别的,只是要更加注意引物二聚体、PCR产物大小等问题。染料法不需要其他东西,探针法还需要taqman探针,这个探针的设计是比较有讲究的,并且上面有荧光集团和猝灭基团。具体设计,一般使用相关软件进行。

    上面较高的是样本曲线,下面较低的是未加样本(茎环引物和引物、探针都加入)

    prR的引物一般是RNA(单链),而探针是已知碱基序列的dna或rna
    核心探针发射器和延伸探针发射器的区别是什么?
    基因探针,即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:①应是单链,若为双链,必须先行变性处理。②应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基因,也可以仅仅是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。

    引物,又名引子。是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,之所以需要引物是因为在DNA合成中DNA聚合酶仅仅可以把新的核苷酸加到已有的DNA链上。
    实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能准确的计量模板量了
    PCR技术中扩增的是两引物之间的核苷酸序列,意思是采用该技术,可以大量扩增引物之间的序列,一般情况下,我们需要大量的某一基因的片段时,我们在基因的两端分别设计引物(一段一条),然后在体外,采用PCR的方法,用引物进行体外DNA复制,从而大量合成引物之间的基因。

    PCR即聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。

    其原理为:
    DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。

    但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。

    耐热DNA聚合酶--Taq酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。

    PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
    本人做荧光定量PCR,参照基因选择的GAPDH,望好心人能告知GAPDH基因的引物和探针序列,谢谢
    我手上有用于RT-PCR的引物和探针(上海合成的,20bp),做培养细胞成功得到结果。现在做体内实验,不知道是否可以用这个探针来作FISH。
    有的老师告诉我用甲醛固定的石蜡切片标本,因为石蜡和甲醛本身会激发荧光,作FISH效果不好,而且不容易成功。
    这样的话,
    1.是否需要重新设计探针做ISH?
    2.检测目的mRNA只需要确定位置和在实验条件下发生的量的改变。使用FISH是否大材小用(本来我是希望能节省费用,用以前的引物探针的)?
    是RNA探针.TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5’末端,而淬灭剂则在3’末端.PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.常用的荧光基团是FAM,TET,VIC,HEX. 而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台.
    引物是用来扩增片段用的,而探针,探针上面有荧光基团,完整时检测不到荧光,与两引物之间的目的基因结合,PCR扩增过程中,探针被切断,可以检测到荧光。扩增得到的目的基因越多,那么探针被切断的也越多,检测到的荧光也越多,所以常用来做定量PCR。
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