
Description Alpaca anti-Spot VHH, purified recombinant binding protein
Synonyms Spot Nanobody, and Spot-Label (unconjugated protein)
More information about the Spot capture and detection tag can be found here.
Specificity Spot- Binding Protein recognizes the Spot-tag sequence motif PDRVRAVSHWSS.
Applications Coupling of dyes, biotin, etc. via NHS Ester reaction Western blottingand IF
德国chromotek公司成立于2008年,致力于细胞生物学和蛋白质组学的研发与研究,公司拥有强大的研发团队,有先进的生物制剂,主要主要使命是花费较少的时间和成本,使客户获得得高质量的实验数据。
ChromoTekGmbH开创了一类新的免疫学研究工具,该工具源自细胞生物学和蛋白质组学的单域骆驼抗体。ChromoTek成立于2008年,由UlrichRothbauer周边的一个研究团队从慕尼黑路德维希马克西米利安大学(LMU)分拆而来,现已迅速发展成为著名的创新试剂供应商和大型制药公司值得信赖的服务提供商。我们的管理团队结合了互补的技能和经验,形成了持续增长的基础。 ChromoTek的产品分类: 一、Nano-Trap系列;以产品结合物为标准,包含磁珠系列和琼脂糖珠子系列,还有96板系列;抗体结合物包括GFPTrap,RFPTrap,GSTTrap,Dnmt1-Trap;Mk2-Trap;P53-Trap;Mdm4/HdmX-Trap 二、Booster系列;含GFPboosterRFPbooster; 三、可用于HCA实验的Chromobodies(质粒或细胞系形式); 四、 高品质抗体(标签蛋白抗体和普通抗体); 德国ChromoTek公司成立于2008年,致力于细胞生物学和蛋白质组学的研发与研究。产品包括单克隆抗体、重组单域抗体、荧光抗体、GFP或RFP连接蛋白等。 ChromoTek有限公司先驱来自单个域骆驼抗体的免疫学研究工具,为细胞生物学和蛋白质组学研究开辟了新的一类。ChromoTek成立于2008年,作为一个分拆上市的路德维希 - 马克西米利安慕尼黑大学(LMU)的一个研究小组围绕乌尔里希Rothbauer,已迅速发展成为一个**的创新试剂供应商,以及作为一个值得信赖的服务提供商,为大型制药公司。我们的管理团队结合互补的技能和经验,形成持续增长的趋势。我们的使命是更好发展,并促进我们的客户在世界各地的研究开发和商业化。正在开发一系列的产品和服务,我们的目标是成为*被认可的在蛋白质组学和活细胞成像领域的***。ChromoTek
蚂蚁淘生物科技有限公司是德国ChromoTek公司的中国合作伙伴和签约总代理商
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生物偶联即将两种分子结合在一起而形成一个杂合的偶联物(hybridconjugate),这些偶联结合物(如标记抗体)在世界各大医院和科研机构被广泛使用。一抗标记试剂系列产品极大程度的简化了结合标记流程,是目前世界上操作最简便的抗体标记试剂盒。
·快速:手工操作时间仅30秒·目前世界上操作最简便的抗体标记试剂盒·无需脱盐、透析等步骤·抗体回收率达100%·可提供数十种标记物·可用于WB,IHC,ELISA,免疫荧光、流式细胞术以及荧光共振能量转移检测等·经济实惠,规格多样·可标记ug-mg级抗体量试剂盒组成:
1)1或3(以规格而定)玻管Lightening-Link?Mix混合物。
2)1管LL-X(X为标记物,如PE或HRP等)修饰试剂。
3)1管LL-X萃灭试剂。
操作步骤:
1)在每10ul抗体样品中加入1ul的LL-Modifier修饰试剂,轻轻混匀。
2)打开Ligtening-Link混合物管盖,吸取步骤1已混好的抗体样品至管内冻干混合物中,用吸液器轻轻吸打1-2次,使粉末完全溶解。
3)盖上玻璃瓶盖,室温(20-25°C)避光孵育3小时,或过夜。*
4)孵育3小时后,按每10ul抗体的量加入1ulLL-淬灭试剂,静置30分钟后即可使用。
*不同的标记物,操作步骤略有不同。(操作步骤供参考,以英文原版说明书为准。)
标记结合物的保存:
对于任何新结合物,推荐保持于4°C条件下。如需长期保存,可添加保护剂。
缓冲液及添加剂兼容性:
A.与无胺基缓冲液兼容,包括MES,MOPS,HEPES(浓度10-50mM,pH范围6.5-8.5),LL-Modifier修饰剂提供结合反应的最佳条件。
B.常见的盐(如氯化钠)、螯合剂(EDTA)、糖对偶联反应无影响。
C.叠氮钠(0.02%-0.1%)对结合反应有轻微影响,叠氮钠不可用于HRP标记,其为后者的抑制剂。
D.甘油(upto50%)对结合效率无影响。
E.若无胺基的缓冲液浓度相对较高,pH值在6.6-8.5范围外,则需要加入更多的LL-midifier修饰剂(/10ul抗体),以此来调整pH值。最佳的pH范围为7.3-7.6左右。
F.避免使用含亲核剂的缓冲液,避免还原剂如DTT和2-巯基乙醇,乙醇胺等。
G.浓度达到或稍低于20mM的Tris对结合效率有轻微的影响。
Westernblottingdatacomparingconjugatedandunconjugatedantibodies
货号中文品名英文品名规格AZK0001AColorlockALS磷检测试剂盒PiColorlockALS625/1560assaysAZK0001BColorlockALS磷检测试剂盒PiColorlockALS2500/6250assaysAZK0002AColorlockGold磷检测试剂盒PiColorlockGold625/1560assaysAZK0002BColorlockGold磷检测试剂盒PiColorlockGold2500/6250assaysAZK0003APi结合树脂PiBind5gAZK0004AATP琼脂糖Low(1-2umol/ml)ATPagaroseLow(1-2umol/ml)2mlAZK0004BATP琼脂糖Low(1-2umol/ml)ATPagaroseLow(1-2umol/ml)5mlAZK0005AATP琼脂糖High(>6umol/ml)GTPagaroseHigh(>6umol/ml)2mlAZK0006AATP琼脂糖High(1-2umol/ml)GTPagaroseHigh(>6umol/ml)5mlAZK0007AATP琼脂糖High(8-12umol/ml)ATPagaroseHigh(8-12umol/ml)2mlAZK0008AATP琼脂糖High(8-12umol/ml)ATPagaroseHigh(8-12umol/ml)5mlAZK0009A控制树脂ControlResin2mlAZK0009B控制树脂ControlResin5mlAZK0010AATPase酶检测试剂盒ATPaseassaysystem192assaysAZK0010BATPase酶检测试剂盒ATPaseassaysystem480assaysAZK0010CATPase酶检测试剂盒ATPaseassaysystem5x480assaysAZK0011AGTPase酶检测试剂盒GTPaseassaysystem192assaysAZK0011BGTPase酶检测试剂盒GTPaseassaysystem480assaysAZK0011CGTPase酶检测试剂盒GTPaseassaysystem5x480assaysAZK0013AAP碱性磷酸酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkAPconjugationkit3x10μgAPAZK0013BAP碱性磷酸酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkAPconjugationkit1x100μgAPAZK0013CAP碱性磷酸酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkAPconjugationkit3x100μgAPAZK0013DAP碱性磷酸酶抗体标记试剂盒Lightning-LinkAPconjugationkit1mgAPAZK0014AGOx葡糖氧化酶标记试剂盒Lightning-LinkGOxconjugationkit3x10μgAZK0014BGOx葡糖氧化酶标记试剂盒Lightning-LinkGOxconjugationkit3x100μgAZK0014CGOx葡糖氧化酶标记试剂盒Lightning-LinkGOxconjugationkit1x1mgAZK0015AR-PE(PE)R-藻红蛋白标记试剂盒Lightning-LinkR-Phycoerythrin(R-PE)3x10μgPEAZK0015BR-PE(PE)R-藻红蛋白标记试剂盒Lightning-LinkR-Phycoerythrin(R-PE)1x100μgPEAZK0015CR-PE(PE)R-藻红蛋白标记试剂盒Lightning-LinkR-Phycoerythrin(R-PE)3x100μgPEAZK0015DR-PE(PE)R-藻红蛋白标记试剂盒Lightning-LinkR-Phycoerythrin(R-PE)1mgPEAZK0016AB-PEB-藻红蛋白标记试剂盒Lightning-LinkB-Phycoerythrin(B-PE)1x100μgBPEAZK0016BB-PEB-藻红蛋白标记试剂盒Lightning-LinkB-Phycoerythrin(B-PE)3x100μgBPEAZK0016CB-PEB-藻红蛋白标记试剂盒Lightning-LinkB-Phycoerythrin(B-PE)1mgBPEAZK0017AAPC别藻蓝蛋白标记试剂盒Lightning-LinkAllophycocyanin(APC)3x10μgAPCAZK0017BAPC别藻蓝蛋白标记试剂盒Lightning-LinkAllophycocyanin(APC)1x100μgAPCAZK0017CAPC别藻蓝蛋白标记试剂盒Lightning-LinkAllophycocyanin(APC)3x100μgAPCAZK0017DAPC别藻蓝蛋白标记试剂盒Lightning-LinkAllophycocyanin(APC)1mgAPCAZK0018APerCP标记试剂盒Lightning-LinkPerCP3x10ugAZK0018BPerCP标记试剂盒Lightning-LinkPerCP1x100ugAZK0018CPerCP标记试剂盒Lightning-LinkPerCP3x100ugAZK0018DPerCP标记试剂盒Lightning-LinkPerCP1x1mgAZK0019A荧光素标记试剂盒Lightning-LinkFluorescein3reactions(eachupto20ug)AZK0019B荧光素标记试剂盒Lightning-LinkFluorescein3reactions(eachupto200ug)AZK0019C荧光素标记试剂盒Lightning-LinkFluorescein1reaction(upto2mg)AZK0020A罗丹明标记试剂盒Lightning-LinkRhodamine3reactions(eachupto20ug)AZK0020B罗丹明标记试剂盒Lightning-LinkRhodamine3reactions(eachupto200ug)AZK0020C罗丹明标记试剂盒Lightning-LinkRhodamine1reaction(upto2mg)AZK0021AAMCA标记试剂盒Lightning-LinkAMCA3reactions(eachupto20ug)AZK0021BAMCA标记试剂盒Lightning-LinkAMCA3reactions(eachupto200ug)AZK0021CAMCA标记试剂盒Lightning-LinkAMCA1reaction(upto2mg)AZK0022ATexasRed标记试剂盒Lightning-LinkTexasRed3reactions(eachupto20ug)AZK0022BTexasRed标记试剂盒Lightning-LinkTexasRed3reactions(eachupto200ug)AZK0022CTexasRed标记试剂盒Lightning-LinkTexasRed1reaction(upto1mgscale)AZK0023ACy3染料标记试剂盒Lightning-LinkCy33reactions(eachupto20ug)AZK0023BCy3染料标记试剂盒Lightning-LinkCy33reactions(eachupto200ug)AZK0023CCy3染料标记试剂盒Lightning-LinkCy31reaction(upto2mg)AZK0024ACy5染料标记试剂盒Lightning-LinkCy53reactions(eachupto20ug)AZK0024BCy5染料标记试剂盒Lightning-LinkCy53reactions(eachupto200ug)AZK0024CCy5染料标记试剂盒Lightning-LinkCy51reaction(upto2mg)AZK0025ACy5.5染料标记试剂盒Lightning-LinkCy5.53reactions(eachupto200ug)AZK0025BCy5.5染料标记试剂盒Lightning-LinkCy5.51reaction(upto2mg)AZK0026ACy7染料标记试剂盒Lightning-LinkCy73reactions(eachupto20ug)AZK0026BCy7染料标记试剂盒Lightning-LinkCy73reactions(eachupto200ug)AZK0026CCy7染料标记试剂盒Lightning-LinkCy71reaction(upto2mg)AZK0027ACy3.5染料标记试剂盒Lightning-LinkCy3.53reactions(eachupto200ug)AZK0027BCy3.5染料标记试剂盒Lightning-LinkCy3.51reaction(upto2mg)AZK0028AAtto390荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto3903reactions(eachupto20ug)AZK0028BAtto390荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto3903reactions(eachupto200ug)AZK0028CAtto390荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto3901reaction(upto2mg)AZK0029AAtto425荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto4253reactions(eachupto20ug)AZK0029BAtto425荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto4253reactions(eachupto200ug)AZK0029CAtto425荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto4251reaction(upto2mg)AZK0030AAtto465荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto4653reactions(eachupto20ug)AZK0030BAtto465荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto4653reactions(eachupto200ug)AZK0030CAtto465荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto4651reaction(upto2mg)AZK0031AAtto488荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto4883reactions(eachupto20ug)AZK0031BAtto488荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto4883reactions(eachupto200ug)AZK0031CAtto488荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto4881reaction(upto2mg)AZK0032AAtto532荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5323reactions(eachupto20ug)AZK0032BAtto532荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5323reactions(eachupto200ug)AZK0032CAtto532荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5321reaction(upto2mg)AZK0033AAtto565荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5653reactions(eachupto20ug)AZK0033BAtto565荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5653reactions(eachupto200ug)AZK0033CAtto565荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5651reaction(upto2mg)AZK0034AAtto590荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5903reactions(eachupto20ug)AZK0034BAtto590荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5903reactions(eachupto200ug)AZK0034CAtto590荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5901reaction(upto2mg)AZK0035AAtto594荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5943reactions(eachupto20ug)AZK0035BAtto594荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5943reactions(eachupto200ug)AZK0035CAtto594荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto5941reaction(upto2mg)AZK0036AAtto633荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6333reactions(eachupto20ug)AZK0036BAtto633荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6333reactions(eachupto200ug)AZK0036CAtto633荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6331reaction(upto2mg)AZK0037AAtto637荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6373reactions(eachupto200ug)AZK0037BAtto637荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6371reaction(upto2)mgAZK0038AAtto655荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6553reactions(eachupto20ug)AZK0038BAtto655荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6553reactions(eachupto200ug)AZK0038CAtto655荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6551reaction(upto2mg)AZK0039AAtto680荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6803reactions(eachupto20ug)AZK0039BAtto680荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6803reactions(eachupto200ug)AZK0039CAtto680荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto6801reaction(upto2mg)AZK0040AAtto700荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto7003reactions(eachupto20ug)AZK0040BAtto700荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto7003reactions(eachupto200ug)AZK0040CAtto700荧光染料标记试剂盒Lightning-Linkatto7001reaction(upto2mg)AZK0041AFluoProbesDyes547H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes547H3reactions(eachupto20ug)AZK0041BFluoProbesDyes547H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes547H3reactions(eachupto200ug)AZK0041CFluoProbesDyes547H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes547H1reaction(upto2mg)AZK0042AFluoProbesDyes594荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes5943reactions(eachupto20ug)AZK0042BFluoProbesDyes594荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes5943reactions(eachupto200ug)AZK0042CFluoProbesDyes594荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes5941reaction(upto2mg)AZK0043AFluoProbesDyes647H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes647H3reactions(eachupto20ug)AZK0043BFluoProbesDyes647H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes647H3reactions(eachupto200ug)AZK0043CFluoProbesDyes647H荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes647H1reaction(upto2mg)AZK0044AFluoProbesDyes682荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes6823reactions(eachupto20ug)AZK0044BFluoProbesDyes682荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes6823reactions(eachupto200ug)AZK0044CFluoProbesDyes682荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes6821reaction(upto2mg)AZK0045AFluoProbesDyes752荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes7523reactions(eachupto20ug)AZK0045BFluoProbesDyes752荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes7523reactions(eachupto200ug)AZK0045CFluoProbesDyes752荧光探针染料标记试剂盒Lightning-LinkFluoProbes7521reaction(upto2mg)AZK0046APE/Cy5串联染料Lightning-LinkPE/Cy53x10ugAZK0046BPE/Cy5串联染料Lightning-LinkPE/Cy51x100ugAZK0046CPE/Cy5串联染料Lightning-LinkPE/Cy53x100ugAZK0046DPE/Cy5串联染料Lightning-LinkPE/Cy51x1mgAZK0047APE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPE/Cy5.53x10ugAZK0047BPE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPE/Cy5.51x100ugAZK0047CPE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPE/Cy5.53x100ugAZK0047DPE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPE/Cy5.51x1mgAZK0048APE/Cy7串联染料Lightning-LinkPE/Cy73x10ugAZK0048BPE/Cy7串联染料Lightning-LinkPE/Cy71x100ugAZK0048CPE/Cy7串联染料Lightning-LinkPE/Cy73x100ugAZK0048DPE/Cy7串联染料Lightning-LinkPE/Cy71x1mgAZK0049APE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPerCP/Cy5.53x10ugAZK0049BPE/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPerCP/Cy5.51x100ugAZK0050APE/TexasRed串联染料Lightning-LinkPE/TexasRed3x10ugAZK0050BPE/TexasRed串联染料Lightning-LinkPE/TexasRed1x100ugAZK0050CPE/TexasRed串联染料Lightning-LinkPE/TexasRed3x100ugAZK0050DPE/TexasRed串联染料Lightning-LinkPE/TexasRed1x1mgAZK0051APE/Atto594串联染料Lightning-Link?PE/Atto5943x10ugAZK0051BPE/Atto594串联染料Lightning-Link?PE/Atto5941x100ugAZK0051CPE/Atto594串联染料Lightning-Link?PE/Atto5943x100ugAZK0051DPE/Atto594串联染料Lightning-Link?PE/Atto5941x1mgAZK0052APerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPerCP/Cy5.53x100ugAZK0052BPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkPerCP/Cy5.51x1mgAZK0052CPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkAPC/Cy5.53x10ugAZK0052DPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkAPC/Cy5.51x100ugAZK0052EPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkAPC/Cy5.53x100ugAZK0052FPerCP/Cy5.5串联染料Lightning-LinkAPC/Cy5.51x1mgAZK0053ALightning-LinkAPC/Cy7串联染料Lightning-LinkAPC/Cy73x10ugAZK0053BLightning-LinkAPC/Cy7串联染料Lightning-LinkAPC/Cy71x100ugAZK0053CLightning-LinkAPC/Cy7串联染料Lightning-LinkAPC/Cy73x100ugAZK0053DLightning-LinkAPC/Cy7串联染料Lightning-LinkAPC/Cy71x1mgAZK0054A生物素化结合试剂盒typeALightning-LinkBiotinconjugationkittypeA3reactions(upto20μgAb)AZK0054B生物素化结合试剂盒typeALightning-LinkBiotinconjugationkittypeA3reactions(upto200μgAb)AZK0054C生物素化结合试剂盒typeALightning-LinkBiotinconjugationkittypeA1reaction(upto2mgAb)AZK0055A生物素化结合试剂盒typeBLightning-LinkBiotinconjugationkittypeB3reactions(upto20μgAb)AZK0055B生物素化结合试剂盒typeBLightning-LinkBiotinconjugationkittypeB3reactions(upto200μgAb)AZK0055C生物素化结合试剂盒typeBLightning-LinkBiotinconjugationkittypeB1reaction(upto2mgAb)AZK0056A链亲和素标记试剂盒Lightning-LinkStreptavidinconjugationkit3x10ugStreptavidinAZK0056B链亲和素标记试剂盒Lightning-LinkStreptavidinconjugationkit3x100ugStreptavidinAZK0056C链亲和素标记试剂盒Lightning-LinkStreptavidinconjugationkit1x1mgStreptavidinAZK0057A亲和素标记试剂盒Lightning-LinkAvidinconjugationkit3x10ugAvidinAZK0057B亲和素标记试剂盒Lightning-LinkAvidinconjugationkit3x100ugAvidinAZK0057C亲和素标记试剂盒Lightning-LinkAvidinconjugationkit1x1mgAvidinAZK0058A快速荧光素标记Lightning-Link?RapidFluorescein3xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0058B快速荧光素标记Lightning-Link?RapidFluorescein3xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0058C快速荧光素标记Lightning-Link?RapidFluorescein1xAblabeling(1scale)AZK0059A快速Cy3标记Lightning-Link?RapidCy33xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0059B快速Cy3标记Lightning-Link?RapidCy33xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0059C快速Cy3标记Lightning-Link?RapidCy31xAblabeling(1scale)AZK0060A快速Cy5标记Lightning-Link?RapidCy53xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0060B快速Cy5标记Lightning-Link?RapidCy53xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0060C快速Cy5标记Lightning-Link?RapidCy51xAblabeling(1scale)AZK0061A快速Atto488标记Lightning-Link?RapidAtto4883xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0061B快速Atto488标记Lightning-Link?RapidAtto4883xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0061C快速Atto488标记Lightning-Link?RapidAtto4881xAblabeling(1scale)AZK0062A快速Atto633标记Lightning-Link?RapidAtto6333xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0062B快速Atto633标记Lightning-Link?RapidAtto6333xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0062C快速Atto633标记Lightning-Link?RapidAtto6331xAblabeling(1scale)AZK0063A快速Atto565标记Lightning-Link?RapidAtto5653xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0063B快速Atto565标记Lightning-Link?RapidAtto5653xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0063C快速Atto565标记Lightning-Link?RapidAtto5651xAblabeling(1scale)AZK0064A快速Atto594标记Lightning-Link?RapidAtto5943xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0064B快速Atto594标记Lightning-Link?RapidAtto5943xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0064C快速Atto594标记Lightning-Link?RapidAtto5941xAblabeling(1scale)AZK0065A快速罗丹明标记Lightning-Link?RapidRhodamine3xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0065B快速罗丹明标记Lightning-Link?RapidRhodamine3xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0065C快速罗丹明标记Lightning-Link?RapidRhodamine1xAblabeling(1scale)AZK0066A快速Atto390标记Lightning-Link?RapidAtto3903xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0066B快速Atto390标记Lightning-Link?RapidAtto3903xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0066C快速Atto390标记Lightning-Link?RapidAtto3901xAblabeling(1scale)AZK0067A快速DyLight350标记Lightning-Link?RapidDyLight3503xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0068A快速DyLight350素标记Lightning-Link?RapidDyLight3503xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0069A快速DyLight350标记Lightning-Link?RapidDyLight3501xAblabeling(1scale)AZK0070A快速DyLight405标记Lightning-Link?RapidDyLight4053xAblabelings(each10-20ugscale)AZK0070B快速DyLight405标记Lightning-Link?RapidDyLight4053xAblabelings(each100-200ugscale)AZK0070C快速DyLight405标记Lightning-Link?RapidDyLight405
探针
ddH2O36.25ul
buffer(瓶3)5ul
核苷酸混合液(含DIG-dUTP)(瓶2)2.5ul
dNTPStockSolution(瓶4)2.5ul
引物F1ul(10pmol/ul)
R1ul(10pmol/ul)
酶(瓶1)0.75ul
DNA1ul(100pg)
程序:35个循环,退火温度55度。
第一次通过探针标记得到了相应的PCR标记产物,亮度和对照相当,片段大小比标记的探针模板大,证明整个过程应该没有问题。
但一个月后重新用相同的体系,相同的程序,只是探针模板的量不同却什么都扩不出来。不知道问题出在哪了!
TUNEL的缺点是:1),操作要求高,组织样本需要固定(即使是培养细胞,也需要固定),不恰当的固定方法对实验结果影响很大,导致背景过高或者信号过弱,因此实验结果重复性不好;有的人花上半年做一个体内的TUNEL是一点都不奇怪的。2),大部分诱导凋亡的药物也引起DNA损伤,从而产生DNA断裂,易引入假阳性;3)凋亡晚期细胞基因组大量降解,导致TUNEL标记反而减少,因此此法反应的是早期凋亡比例,不能严格反应凋亡比例,属于半定量研究。
尽管有如此多缺点,但由于其是目前为数不多的能原位标记凋亡细胞的方法,因此用于组织体内凋亡研究仍然是首选。但体外细胞实验研究,很少用此法。
凋亡检测中,TUNEL并不是过时的方法,现在研究凋亡的文献仍然常见。而且相反,还比以前多一点,因为现在体内实验越来越多了,甚至线虫的凋亡研究,都用TUNEL。
凋亡研究中,的确有几种方法过时了,当然是因为有替代方案了,比如DNAladder,电镜。至于AnnexinV是不能用来和TUNEL一起评论的,前者用于细胞,而且主要是悬浮细胞,后者主要用于组织。虽然有人也做镜下的AnnexinV观察,TUNEL的细胞staining,但这都不是主流。
回到lz的原帖,的确如大家所言,做贴壁细胞,不推荐用TUNEL。如果是经典凋亡途径,只是确定比例,用最经典,最常用的subG1法即可,如果是不确定是否是凋亡,用AnnexinV,不过贴壁细胞用此法,要注意消化时间。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
此IBL试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测 试剂盒成分 1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T 2 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1 3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1 5 标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1 6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1 7 终止液: 1N硫酸 12mL x 1 8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)向左转|向右转
百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,推出基于iTRAQ的定量蛋白组分析服务技术包裹,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的蛋白寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括蛋白酶切、肽段标价、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。

