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| Contents | BrdU Reagent,Fixing SolutionPrediluted Anti-BrdU DetectorPeroxidase Goat Anti-Mouse IgGConjugate DiluentSubstrate50X Plate Wash ConcwentrateStop Solution |
|---|---|
| Application | BrdU Cell Proliferation Assay |
BrdU Proliferation Assay involves incorporation of BrdU into cells cultured in microtiter plates using the cell layer as the solid phase. During the final 2 to 24 hours of culture BrdU is added to wells of the microtiter plate. BrdU will be incorporated into the DNA of dividing cells. To enable antibody binding to the incorporated BrdU cells must be fixed, permeabilized and the DNA denatured. This is all done in one step by treatment with Fixing Solution. Detector anti-BrdU monoclonal antibody is pipetted into the wells and allowed to incubate for one hour, during which time it binds to any incorporated BrdU. Unbound antibody is washed away and horseradish peroxidase-conjugated goat anti-mouse antibody is added, which binds to the Detector Antibody.
The horseradish peroxidase catalyzes the conversion of the chromogenic substrate tetra-methylbenzidine (TMB) from a colorless solution to a blue solution (or yellow after the addition of stopping reagent), the intensity of which is proportional to the amount of incorporated BrdU in the cells. The colored reaction product is quantified using a spectrophotometer.
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购： 在线下单 简单省事
蚂蚁淘的价格是真实透明的，并且具有很大的价格优势，不需要繁杂的询价比价； 报价单与合同可以直接在线生成或打印；就像在京东购物一样， 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购，订单详情会告诉您所有进程。
售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2021-09-08
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2021-09-17
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。 查看更多
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2021-09-11
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2021-09-09
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2021-09-13
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2021-09-15
ImmunoWay生物的使命是用更好的产品和服务来帮助世界各地的生命科学的研究者，简化并加速他们的研究。专注于开发出创新的和可靠的免疫学和细胞学产品。ImmunoWay生物是开发高品质的与癌症、细胞凋亡、细胞生长和信号转导相关的ELISA试剂盒，细胞凋亡检测试剂盒，细胞代谢检测试剂盒，抗体，抗体/蛋白芯片的先驱。公司目前有八千多种抗体，其中信号传导相关的抗体1200 查看更多
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2021-09-10
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2021-09-22
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2021-09-16
通过前期的早期初筛，经过生物信息学分析，会筛选到具有统计学意义的一部分具有表达差异的蛋白。这些蛋白需要经过进一步的优化，寻找到与疾病或某些通路有关的具有表达差异的蛋白，进一步缩小蛋白范围，这时就需要使用结果更为准确的蛋白定量或鉴定工具。经过优化后，需要对得到的更小范围生物标志物进行大样本量的验证，最终确定哪些生物标志物可以用于疾病 查看更多
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2021-09-21
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常见问题
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蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑；
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商品咨询
【求助】请问有Western blot 做的比较好的公司么 实验方法 丁 ...123
3453456022018-02-13
不是的看你实验如何做了，试剂盒这块有技术支持的，你可以咨询下厂家，wb的实验需要的东西还是很多的，还是要参考详细的配方再做
【求助】如何选择转染试剂盒 实验方法123
fengtingting20102021-08-02
要检测Foxp3如何选择WB的试剂盒，什么叫稀释倍数呢。这个试剂盒里一般都有什么。国内与国外应该质量差不多吧，我中山的怎么样
【求助】新手 请问westernblot测NFKB、FLT3是用总蛋白提取试剂...123
inter12072010-11-08
请问哪个公司的WB试剂盒好用？小弟刚接触，做WB的要的材料好多，不知有无合适的试剂盒可以减少工作量，请了解的大侠指教下！！
实验设计中的问题 ：提取膜蛋白（受体蛋白）后做western好出结果么 ...123
estellalee2021-08-07
这个蛋白做了一个多月了，一直没有结果，我是用碧云天RIPA+PMSF提取的，请问这种膜蛋白需要用专门的膜蛋白提取试剂盒提蛋白吗？求指教求指教
氙气对脑白质损伤新生大鼠脑组织Bax、Bcl2蛋白及EphrinB2、...123
′妆雪雪ㄟ5bWz2018-02-09
α-平滑肌肌动蛋白是23kD。
1、如果是提取的总蛋白，然后做WB，用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的，这是公认的东西。
2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白，再用β-actin作为内参似乎不妥，因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的。WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而，如果我们试验目的是用药物处理细胞，比较处理前后某种膜蛋白的表达情况，此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了，因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有胞质蛋白混进去的话，β-actin就是检测不到的。
1、如果是提取的总蛋白，然后做WB，用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的，这是公认的东西。
2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白，再用β-actin作为内参似乎不妥，因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的。WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而，如果我们试验目的是用药物处理细胞，比较处理前后某种膜蛋白的表达情况，此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了，因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有胞质蛋白混进去的话，β-actin就是检测不到的。
BIOVALUE的TGFβ1 ELISA试剂盒中清洗液用什么稀释?样本用什么稀释?123
天天长知识2021-07-28
清洗液用高纯水稀释就行样本用标准品稀释液
请问一下,用试剂盒提取膜蛋白后还需要RIPA裂解,煮沸,然后再进行...123
iamtangwei19922021-07-26
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP419) ——植物 实验方法...123
deadbird12021-07-25
天根RNA试剂盒DP419提取的蛋白可以做WB吗：分三层后，上层是RNA，那个中间层的蛋白怎么提出来纯化一下做WB？请高手解答，非常感谢！
博凌科为 高纯质粒小量制备试剂盒试用注意事项?及工作原理是怎样...123
wling1592021-08-04
博凌科为 高纯质粒小量制备试剂盒
原理简介：
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐，低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐，高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
注意事项：
◆ 第一次使用时，将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后（终浓度100ug/ml）置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有混杂有微量RNA残留， 这时可在溶液P1中补加RNase A即可。
◆ 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入45ml无水乙醇，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
◆ 温度低时溶液P2中SDS可能会出现浑浊或者析出沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
◆ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
试剂盒特点：
◆ 产量高---一次提取高达30ug以上的质粒。
◆ 纯度高---OD260/OD280一般为1.80~1.85本试剂盒提取的质粒纯度好，能充分保证测序所需要的读长(用于ABI3730测序一般可达1000bp有效读长)。
◆ 快速，方便，不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
提示
BIOTEKE的质粒提取试剂盒既适用于革兰氏阴性菌中质粒的提取，同时也可从革兰氏阳性菌中提取质粒。由于革兰氏阳性菌外被一层较厚的细胞壁，会严重阻碍细菌细胞的裂解，因此必须在裂解细胞前破除，方法如下：
收集适量的菌体，加入250ul溶液P2，充分悬浮菌液，加入溶菌酶使其终浓度在10-20mg/ml左右在37℃处理30分钟左右。加入溶菌酶的浓度和处理的时间可根据不同的菌主和具体实验条件进行调整。
原理简介：
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐，低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐，高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
注意事项：
◆ 第一次使用时，将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后（终浓度100ug/ml）置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有混杂有微量RNA残留， 这时可在溶液P1中补加RNase A即可。
◆ 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入45ml无水乙醇，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
◆ 温度低时溶液P2中SDS可能会出现浑浊或者析出沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
◆ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
试剂盒特点：
◆ 产量高---一次提取高达30ug以上的质粒。
◆ 纯度高---OD260/OD280一般为1.80~1.85本试剂盒提取的质粒纯度好，能充分保证测序所需要的读长(用于ABI3730测序一般可达1000bp有效读长)。
◆ 快速，方便，不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
提示
BIOTEKE的质粒提取试剂盒既适用于革兰氏阴性菌中质粒的提取，同时也可从革兰氏阳性菌中提取质粒。由于革兰氏阳性菌外被一层较厚的细胞壁，会严重阻碍细菌细胞的裂解，因此必须在裂解细胞前破除，方法如下：
收集适量的菌体，加入250ul溶液P2，充分悬浮菌液，加入溶菌酶使其终浓度在10-20mg/ml左右在37℃处理30分钟左右。加入溶菌酶的浓度和处理的时间可根据不同的菌主和具体实验条件进行调整。
做WB的时候,用的PVDF膜究竟有没有正反_问答详情_WB试剂盒_...123
守望相依ぃ2212021-07-22
这个膜的两面是不一样的。一面粗糙，一面光滑吧。如果这个算正反面的话，那么就是有正反面的。但是对于WB来说在转膜前是没有正反面之分的。你用粗糙的面贴着胶转膜和光滑的面贴着胶转膜，蛋白都能转到膜上去的。不会因为你膜贴反了而蛋白转膜不成功啥的。
转膜后就要区分与胶接触的一面与另一面了。话说楼主好奇的话可以跑蛋白的试试看哈。比如目的蛋白的胶用光滑面贴着胶，内参蛋白用粗糙面贴着胶一起转膜试试转膜结果看看呢。
转膜后就要区分与胶接触的一面与另一面了。话说楼主好奇的话可以跑蛋白的试试看哈。比如目的蛋白的胶用光滑面贴着胶，内参蛋白用粗糙面贴着胶一起转膜试试转膜结果看看呢。
【求助】有人用过凯基膜蛋白提取试剂盒么~跑wb着急啊~ 蛋白质和...123
cooloe2021-08-01
买了南京凯基的膜蛋白和浆蛋白提取试剂盒，浆蛋白有条带，可是膜蛋白跑了很久没跑出过条带。。。
之前是担心所需组织量不够（要求是200-300mg，我的组织只有20mg左右）才跑不出来，后来换用大鼠心脏测试，组织量绝对够。。。而且在跑western之前进行了说明书上的蛋白浓缩步骤，可是在加loADIngbuffer之后，蛋白沉淀怎么都溶解不掉~说明书也注明了如果有沉淀可以取上清继续上样，可是每次上样感觉样品往上浮，只有部分样品往孔里沉，而且跑出来什么都没有，连内参都没有。用的是β-actin的内参。。
western之前浓缩步骤如下:
1、取所得提取物，每100ul膜蛋白加入约300ul的溶解buffer和约100ul三氯乙酸（TCA）试剂，混匀后置冰上20-30min后，13000rpm，离心15min，尽可能去除上清。
2、沉淀加入1ml丙酮，室温静置10min后，13000rpm离心15min。
3、弃上清，沉淀真空旋干或置冰上干燥10min（敞开离心管盖），按适当体积比加入loadingbuffer（使用前没100ulloadingbuffer加入2-5ulβ-巯基乙醇）溶解，彻底分散（枪头反复吹吸或剧烈涡旋），煮沸5min。【注：加入loadingbuffer后如有部分难容物，可取上清继续上样。】
之前是担心所需组织量不够（要求是200-300mg，我的组织只有20mg左右）才跑不出来，后来换用大鼠心脏测试，组织量绝对够。。。而且在跑western之前进行了说明书上的蛋白浓缩步骤，可是在加loADIngbuffer之后，蛋白沉淀怎么都溶解不掉~说明书也注明了如果有沉淀可以取上清继续上样，可是每次上样感觉样品往上浮，只有部分样品往孔里沉，而且跑出来什么都没有，连内参都没有。用的是β-actin的内参。。
western之前浓缩步骤如下:
1、取所得提取物，每100ul膜蛋白加入约300ul的溶解buffer和约100ul三氯乙酸（TCA）试剂，混匀后置冰上20-30min后，13000rpm，离心15min，尽可能去除上清。
2、沉淀加入1ml丙酮，室温静置10min后，13000rpm离心15min。
3、弃上清，沉淀真空旋干或置冰上干燥10min（敞开离心管盖），按适当体积比加入loadingbuffer（使用前没100ulloadingbuffer加入2-5ulβ-巯基乙醇）溶解，彻底分散（枪头反复吹吸或剧烈涡旋），煮沸5min。【注：加入loadingbuffer后如有部分难容物，可取上清继续上样。】
【求助】APP蛋白WB应该选用什么样的蛋白提取试剂盒？_问答详情_...123
feiqi2021-08-09
我现在在用WB检测APP蛋白，但是总是不成功，不知道是否是蛋白提取有问题，因为APP蛋白是膜蛋白，我用的是总蛋白提取试剂盒，希望有经验的同志指点一下。谢谢！
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