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Anoptimizedreversetranscriptasesystemfortheproductionoffull-lengthCDNA.
Producefull-lengthcDNAwithRNAseH-mutant- Achievehigherspecificityatelevatedtemperatures,upto55°C
EpiScript™RnaseH-ReverseTranscriptase(EpiScriptRT),analternativetoSuperScript®IIReverseTranscriptase,isarecombinantMMLVreversetranscriptasewithgreatlyreducedRNaseHactivity.Itishighlyefficientatproducingfull-lengthcDNAfromlongRNAtemplates.EpiScriptRTiscapableofproducingcDNAfromaslittleas50pgoftotalRNAforreal-timeRT-PCR(qRT-PCR)analysisandotherapplications.
Applications
- First-strandcDNAsynthesisforsubsequentPCRorreal-timePCR.
Benefits
- RecombinantMMLVreversetranscriptasewithgreatlyreducedRNaseHactivity
- Activeattemperaturesupto55°C
- Highlyefficientatproducingfull-lengthcDNAfromaslittleas50pgoftotalRNA
- BestvalueinanRNaseH-ReverseTranscriptase
Storage:Storeonlyat-20°Cinafreezerwithoutadefrostcycle.
StorageBuffer:EpiScriptRTissuppliedina50%glycerolsolutioncontaining50mMTris-HCl(pH7.5),100mMsodiumchloride,1mMDTT,0.1mMEDTA,and0.1%Triton®X-100.
UnitDefinition:OneunitofEpiScriptRTcatalyzestheincorporationof1nmolofdTTPintoacid-insolublematerialin10minutesat37°Cusingsaturatingamountsofoligo(dT)-primedpoly(rA)astemplate.
ContaminatingActivityAssays:EpiScriptRTisfreeofdetectableexonuclease,endonuclease,andRNaseactivities.
Figure1.EpiScript™ReverseTranscriptaseperformedequallyorbetterthancomparablereversetranscriptasesfromothervendors.First-strandsynthesisreactionswereassembledaccordingtomanufacturer´sspecifications.InputRNAwas1µgofJurkattotalRNA(Ambion®).Reactionswereprimedusing50ngofpoly-T(16-18)DNA.2ndstrandqPCRwasperformedusingBio-RadiQSYBRmastermixandgene-specificprimersthatyielded250-350bpamplicons.Reactionswererepeated4-fold.PGDF-R(PlateletDerivedGrowthFactorReceptor),TNF(TumorNecrosisFactor),IL-1b(Interleukin-1beta),IL-2(Interleukin2).ImagecourtesyofMatthewKellinger,Illumina®Inc.
 |  | Figure2(clicktoenlarge).EpiScript™ReverseTranscriptaseproducessimiliartranscriptcoverageindependentoftranscriptlength.EpiScriptwasusedtoprimefirststrandcDNAeitherfromtotalRNAusingoligo-dT(leftpanel)orpolyA+selectedRNAwithrandomhexamers(rightpanel).ThecDNAwasconvertedintoIllumina®-compatIBLelibrariesandsequenced.Thereadswerealignedtotranscriptsbaseduponvariouslengthclassesandreaddensityplottedrelativetothepercentdistancefromthe5´endofthetranscripts;0%referstothe5´endand100%isthe3´end.Asexpected,oligo-dTprimingresultsinamorepronounced3´biasthanrandompriming. |
 | Figure3.UseofEpiScript®ReverseTranscriptaseforfirststrandcDNAresultsindetectionofsimilartranscriptcategoriesindependentofinputamount.EpiScriptRTwasusedtorandomprime5ngor50pgofhumantotalRNAandthecDNAwasconvertedintolibrariesforIllumina®sequencing.ReadswerealignedusingTophatandannotatedwithCufflinksandthepercentageofeachmajorcategoryisvisualizedasapiechart.Equivalentresultsareobservedforboth5ngand50pgofinputRNA. |
ORDERINFORMATION
Contents:EpiScriptRNaseH-ReverseTranscriptase,10XReactionBuffer,100mMDTT.蚂蚁淘电商平台
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该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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北京百泰克生物技术有限公司在发布的Thermo M-MLV 反转录酶供应信息，浏览与Thermo M-MLV 反转录酶相关的产品或在搜索更多与Thermo M-MLV 反转录酶相关的内容。 查看更多
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2021-09-22
丝氨酸/苏氨酸激酶 Akt（又称作蛋白激酶 B 或 PKB）作为一种原癌基因，已经成为医学界主要的关注热点，这是因为它在调控各种不同细胞功能（包括代谢、生长、增殖、存活、转录以及蛋白质合成）方面发挥重要作用。能够激活 Akt 信号级联放大的因子，包括受体酪氨酸激酶、整合素、B 细胞和 T 细胞受体、细胞因子受体、G 蛋白偶联受体，以及其他能够通过磷脂酰肌醇三激酶 查看更多
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2021-09-04
用T4噬菌体DNA聚合酶标记双链DNA的3'端的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多
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2021-08-31
新乡智宝生物科技有限公司在发布的m-mlv反转录酶供应信息，浏览与m-mlv反转录酶相关的产品或在搜索更多与m-mlv反转录酶相关的内容。 查看更多
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2021-09-16
根据吉利德年度报表显示，吉利德有 7 种在售的艾滋病药物，品牌名分别为：Atripla、Truvada、Viread、Complera、Vitekta、Tybost、Stribild。预计在接下来的 5 年内，吉利德艾滋病药物将继续雄霸艾滋病医药市场，到 2020 年在年度报表中公布的在售艾滋病药物市场份额达逼近 100 亿美元。1. 四丸合一药物 Stribild 吉利德的 Stribild 在 2012 年 8 月 27 日获得美国 FDA 批准上市，由替诺福韦酯（T 查看更多
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2021-09-05
Biomatik 小鼠肉瘤病毒逆转录酶,200U/ul M-MuLV Reverse Transcriptase, 200U/ul(A1111) 品牌:Biomatik 货号:A1111 默瑞(上海)生物科技有限公司 上海 诚信值:... 查看更多
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2021-08-30
反转录酶M-MLV使用说明（Promega） 1、产品简介莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶（M-MLV RT）是一种RNA依赖的DNA聚合酶，能使mRNA（>5kb）转录为cD 查看更多
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2021-09-11
随着生物技术的发展，肿瘤临床的早期诊断、鉴别诊断、有效观察及预后监测越来越受益于肿瘤分子标志物的发现及其检测方法的完善。肿瘤患者外周血循环核酸分子的检测成为研究者关注的热点。已有研究证实肿瘤患者外周血循环 DNA 具有和恶性肿瘤相关的分子生物学特征，可作为敏感高效的肿瘤分子标志物。近期文献发现外周血循环 RNA 也存在同样的变化，检测这些来自 查看更多
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2021-09-23
在DNA重组中,催化形成重组DNA分子的酶是 A.拓扑异构酶 B.DNA连接酶 C.解链酶 D.DNA聚合酶 E.反转录酶 请帮忙给出正确答案和分析,谢谢!... 查看更多
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2021-08-25
北京索宝生物科技有限公司在发布的 反转录酶AMV 供应信息，浏览与 反转录酶AMV 相关的产品或在搜索更多与 反转录酶AMV 相关的内容。 查看更多
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2021-09-20
北京佳兰生物科技有限公司在发布的M-MLV逆转录酶（RNaseH-)/MMLV反转录酶 供应信息，浏览与M-MLV逆转录酶（RNaseH-)/MMLV反转录酶 相关的产品或在搜索更多与M-MLV逆转录酶（RNaseH-)/MMLV反转录酶 相关的内容。 查看更多
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2021-09-06
AMV反转录酶是由北京索莱宝科技有限公司代理或销售的solarbio品牌的试剂，产品来源于solarbio。北京索莱宝科技有限公司是中国最权威的AMV反转录酶试剂销售服务商之一，在北京等地方销售AMV反转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业AMV反转录酶仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的AMV反转录酶产品 查看更多
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商品咨询
【求助】如何保证得到的cDNA片段中没有反转录酶引起的突变存在?...123
kingoldfive2021-07-27
反转录酶AMV使用说明（Promega）123
luoyu202021-08-02
如题，我现在有AMV反转录酶，但是我发现DDRTPCR都是用MMLV反转录酶来做的，不知道用AMV可以吗，哪位师兄师姐知道给小弟指点指点，小弟先谢过了。
基因工程试题A123
fxj6082021-07-25
扩增病毒基因组中2kb的片段，选用哪种反转录酶比较合适？AMV？MLV？
而且保真性要高一点的，因为今后要用来做表达
而且保真性要高一点的，因为今后要用来做表达
TAKARA aran 反转录酶的保质期123
2021-07-26
一般情况下不同产品都谢了EXP有效期的。不同品牌不一样的。
不过。。。。我时常用那种过期一两年的。。。。也能反转出来。只要你保存得当就可以了。一般是-20以下保存。
不过。。。。我时常用那种过期一两年的。。。。也能反转出来。只要你保存得当就可以了。一般是-20以下保存。
基因工程复习资料123
外婆桥66L齦2018-03-11
为什么说端粒酶是反转录酶只要是细胞，就得走向衰老，现代研究表明，细胞的衰老和端粒的变短有关系。端粒就是DNA，随着细胞分裂次数的增多，端粒在不断变短，端粒酶就是组织端粒变短的。然而正常细胞中，端粒酶的活性受抑制，端粒酶是怎么染端粒变长的呢？实际上端粒酶是由RNA组成的，可以根据碱基互补配对逆转形成DNA，使得变短的端粒变长。所以说端粒酶可以逆转录形成端粒，使端粒不减短！
RTPCR中为何在逆转录结束后要让逆转录酶失活?123
tyc31492021-08-06
反转录酶在进行pcr反应前须进行高温失活，不然就会影响pcr扩增。
反转录时所需的酶是反转录酶,那不需要DNA聚合酶吗？作业慧海网123
离开以后4642018-03-11
问题刁钻啊...... 原则说毕竟酶起催化作用所酶促反应都能自反应（能量要给）反面讲若没酶反应变慢（些酶加速5000倍）所些反应都变极慢相于没反应 DNA复制连接没酶能半才连根磷酸二酯键能断掉细胞高度序集合根本没间让DNA悠闲自我复制说没酶现细胞序集合 所我给结论：
端粒酶(TERC)和端粒逆转录酶(TERT)有什么区别?123
为杰沉沦_楚2018-04-03
TERC是端粒酶RNA基因，编码端粒酶RNA
TERT是端粒酶逆转录酶
人的端粒酶是由端粒酶逆转录酶、端粒酶RNA和一种假尿嘧啶合成酶组成
TERT是端粒酶逆转录酶
人的端粒酶是由端粒酶逆转录酶、端粒酶RNA和一种假尿嘧啶合成酶组成
反转录酶的注意事项123
灰太狼咳卫2352021-08-01
反转录酶
在进行RT反应之前，应考虑以下几个方面：
1、RNA
成功的cDNA合成来自高质量的RNA，高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中，要特别防止RNase的污染，同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链cDNA合成反应中，在缓冲液和还原剂（如DTT）存在的条件下加入，因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性，从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNaseA，B，C对RNA的降解，并不能防止皮肤上的RNase，因此尽管使用了这些抑制剂，也要小心不要从手指上引入RNase，实验过程中经常更换新手套。
2、引物的选择
OligodT
选择OligodT时，要求RNA必须有PolyA，所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT，所以对RNA样品的质量要求较高，最好不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应，建议推荐使用OligodT引物。使用OligodT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
随机引物
适合各种RNA的RT，尤其适合模板丰度很低的情况（比如某个gene表达量很低）。选择随机引物时，第一链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板，然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系，一般建议每5μg总RNA的随机引物的用量为50ng，如果每5μg总RNA的随机引物的用量超过250ng，可能会导致小片段产物（<500bp）的增加和长片断、全长产物产物的降低。
特异性引物
特异性引物只能用你设计引物时的下游引物做RT，引物设计质量影响RT的结果，而且不同引物退火温度本来就不相同，所以按照说明书按照一个温度做不是最佳选择，一般不推荐。向左转|向右转
在进行RT反应之前，应考虑以下几个方面：
1、RNA
成功的cDNA合成来自高质量的RNA，高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中，要特别防止RNase的污染，同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链cDNA合成反应中，在缓冲液和还原剂（如DTT）存在的条件下加入，因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性，从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNaseA，B，C对RNA的降解，并不能防止皮肤上的RNase，因此尽管使用了这些抑制剂，也要小心不要从手指上引入RNase，实验过程中经常更换新手套。
2、引物的选择
OligodT
选择OligodT时，要求RNA必须有PolyA，所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT，所以对RNA样品的质量要求较高，最好不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应，建议推荐使用OligodT引物。使用OligodT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
随机引物
适合各种RNA的RT，尤其适合模板丰度很低的情况（比如某个gene表达量很低）。选择随机引物时，第一链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板，然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系，一般建议每5μg总RNA的随机引物的用量为50ng，如果每5μg总RNA的随机引物的用量超过250ng，可能会导致小片段产物（<500bp）的增加和长片断、全长产物产物的降低。
特异性引物
特异性引物只能用你设计引物时的下游引物做RT，引物设计质量影响RT的结果，而且不同引物退火温度本来就不相同，所以按照说明书按照一个温度做不是最佳选择，一般不推荐。向左转|向右转
为什么说反转录酶是一种多功能酶 雨露学习互助123
关肖媚2021-07-31
反转录酶一方面能够把具有引物的RNA逆转录成DNA，同时还具有RNaseH的活性，能够把DNA-RNA杂合链中的RNA水解。因为具备两种功能，所以称之为多功能酶。
反转录时所需的酶是反转录酶,那不需要DNA聚合酶吗123
东林加油0363352018-04-05
RT-nPCR实际叫做反转录-巢式PCR，反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA，并以其为模板进行的PCR反应，通常用于检测某种RNA是否被表达，或者比较其相对表达水平巢式PCR（nested PCR），是指利用两套PCR引物（巢式引物）对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中，外引物用以产生扩增产物，此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。由于巢式PCR反应有两次PCR扩增，从而降低了扩增多个靶位点的可能性（因为与两套引物都互补的引物很少）增加了检测的敏感性；又有两对PCR引物与检测模板的配对，增加了检测的可靠性。所以反转录-巢式PCR就是以cDNA为模板进行的巢式PCR，它和简单的反转录PCR一样是用于检测某种RNA是否被表达，或者比较其相对表达水平，但是特异性更高，可靠性更强。
反转录酶的活性有哪些呢? 123
羻龢靛2018-03-26
如RNA解旋酶（RNA helicases）.个人认为应该不存在具有催化活性的DNA,因为根据酶的作用过程,其是要发生构象变化或者能够与底物想结合的,而DNA的双螺旋结构相对较稳定
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