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Boston Biochem/Recombinant Human His6-SUMO1 Protein, CF/UL-715-500
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Boston Biochem/Recombinant Human His6-SUMO1 Protein, CF/UL-715-500
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Boston Biochem
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Recombinant Human His6-SUMO1 Protein, CF Summary

Purity
>95%, by SDS-PAGE under reducing conditions and visualized by Colloidal Coomassie® Blue stain.
Activity
Recombinant Human His6-SUMO1 can be conjugated to substrate proteins via the subsequent actions of an SUMO-activating (E1) enzyme, an SUMO-conjugating (E2) enzyme, and an SUMO ligase (E3). Reaction conditions will need to be optimized for each specific application. We recommend an initial Recombinant Human His6-SUMO1 concentration of 10-50 μM.
Source
E. coli-derived human SUMO1 proteinContains an N-terminal 6-His tag
Accession #
NM_003352
Predicted Molecular Mass
13 kDa

Product Datasheets

Product Datasheet
COA

Carrier Free

What does CF mean?

CF stands for Carrier Free (CF). We typically add Bovine Serum Albumin (BSA) as a carrier protein to our recombinant proteins.Adding a carrier protein enhances protein stability, increases shelf-life, and allows the recombinant protein to be stored at a more dilute concentration.The carrier free version does not contain BSA.

What formulation is right for me?

In general, we advise purchasing the recombinant protein with BSA for use in cell or tissue culture, or as an ELISA standard.In contrast, the carrier free protein is recommended for applications, in which the presence of BSA could interfere.

UL-715

Formulation

X mg/ml (X μM) in 50 mM HEPES pH 8.0, 150 mM NaCl and 1 mM DTT

ShippingThe product is shipped with dry ice or equivalent. Upon receipt, store it immediately at the temperature recommended below.
Stability & Storage:Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze-thaw cycles.
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=
÷

Background: SUMO1

Human Small Ubiquitin-like Modifier 1 (SUMO1), also known as Sentrin, UBL1, and SMT3C, is synthesized as a 101 amino acid (aa) propeptide with a predicted molecular weight of 11.5 kDa. Human SUMO1 is the most unique of the four identified SUMO proteins and shares only 44%, 47%, and 41% aa sequence identity with SUMO2, SUMO3, and SUMO4, respectively. In contrast, human SUMO1 shares 100% aa sequence identity with the mouse ortholog. SUMOs are a family of small, related proteins that can be enzymatically attached to a target protein by a post-translational modification process termed SUMOylation (1-3). All SUMO proteins share a conserved Ubiquitin domain and a C-terminal diglycine cleavage/attachment site. Following cleavage of a four aa C-terminal prosegment, the C-terminal glycine residue of SUMO1 is enzymatically attached to a lysine residue on a target protein. In humans, SUMO1 is conjugated to a variety of molecules in the presence of the SAE1/UBA2 SUMO-activating (E1) enzyme and the UBE2I/Ubc9 SUMO-conjugating (E2) enzyme (4,5). In yeast, the SUMO-activating (E1) enzyme is Aos1/Uba2p (6). SUMOylation can occur without the requirement of a specific SUMO ligase (E3), where SUMO1 is transferred directly from UBE2I/Ubc9 to specific substrates. In Alzheimer"s disease models SUMO1 has been shown to influence the generation of Amyloid-beta peptide by promoting the accumulation of BACE-1 (7). Covalent modification of Phosphatase and Tensin Homolog Deleted on Chromosome (PTEN) by SUMO1 is thought to regulate tumorigenesis by retaining PTEN at the plasma membrane, an effect that suppresses PI 3-Kinase/Akt-dependent tumor growth (8).

The ubiquitin-like SUMO-1 is conjugated to a variety of proteins in the presence of UbcH9 and the SAE1/SAE2 (human) or Aos1/Uba2 (yeast) activating enzyme. SUMO-1 is derived from the precursor pro-SUMO-1 (Accession # NM_003352). Human SUMO-1 shares 46% and 47% identity with SUMO-2 and SUMO-3 respectively. SUMOylation can occur without the requirement of a specific E3 ligase activity, where SUMO is transferred directly from UbcH9 to specific substrates. SUMOylated substrates are primarily localized to the nucleus (RanGAP-1, RANBP2, PML, p53, Sp100, HIPK2), but there are also cytosolic substrates (I kappa B alpha, GLUT1, GLUT4). SUMO modification has been implicated in functions such as nuclear transport, chromosome segregation, and transcriptional regulation.

References
  1. Desterro, J.M. et al. (1997) FEBS. Lett. 417:297.
  2. Bettermann, K. et al. (2012) Cancer Lett. 316:113.
  3. Praefcke, G.J. et al. (2012) Trends Biochem. Sci. 37:23.
  4. Okuma, T. et al. (1999) Biochem. Biophys. Res. Commun. 254:693.
  5. Tatham, M.H. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:35368.
  6. Johnson, E.S. et al. (1997) EMBO J. 16:5509.
  7. Yun, S.M. et al. (2012) Neurobiol Aging. [Epub ahead of print].
  8. Huang, J. et al. (2012) Nat. Commun. 3:911.
Long Name
Small Ubiquitin-like Modifier 1
Entrez Gene IDs
7341 (Human); 22218 (Mouse); 301442 (Rat)
Alternate Names
DAP1; GAP modifying protein 1; GAP-modifying protein 1; GMP1SMT3CSMT3H3OFC10UBL1PIC1; PIC1; SENP2; Sentrin; small ubiquitin-related modifier 1; SMT3 homolog 3; SMT3 suppressor of mif two 3 homolog 1 (S. cerevisiae); SMT3 suppressor of mif two 3 homolog 1 (yeast); SMT3; SMT3C; SMT3H3; SUMO1; SUMO-1; Ubiquitin-homology domain protein PIC1; ubiquitin-like 1 (sentrin); Ubiquitin-like protein SMT3C; Ubiquitin-like protein UBL1; UBL1

Citations for Recombinant Human His6-SUMO1 Protein, CF

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  1. Functional Insights into ANP32A-Dependent Influenza A Virus Polymerase Host RestrictionAuthors: P Domingues, BG HaleCell Rep, 2017;20(11):2538-2546.Species: HumanSample Types: ProteinApplications: Bioassay
  2. Functional Insights into ANP32A-Dependent Influenza A Virus Polymerase Host RestrictionAuthors: P Domingues, BG HaleCell Rep, 2017;20(11):2538-2546.Species: HumanSample Types: Cell LysatesApplications: Bioassay

FAQs

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Recombinant Enzymes

Recombinant Human GST-MDM2/HDM2 Protein, CF

E3-202
1Citations
BA

Recombinant Human His6-UBE2N (Ubc13)/Uev1a Complex, CF

E2-664
14Citations
EnzAct

Recombinant Human UBE2I/Ubc9 Protein, CF

E2-645
7Citations
EnzAct

Recombinant Human SUMO E1 (SAE1/UBA2) Protein, CF

E-315
6Citations
EnzAct

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一.简介从各种粗制的DNA模板中进一步纯化或浓缩基因组DNA该试剂盒采用超薄的结合柱,适合于从各种粗制DNA溶液中或DNA反应体系中纯化或浓缩DNA。一次实验可纯化低至Pg级的微量DNA和高至30ug的DNA。首先加入结合液至DNA溶液中调节结合条件后,并转移至DNA结合柱子中离心吸附DNA后,经过两次快速洗涤去除杂质和盐分,最后用灭菌水洗脱出高纯度的DNA。由于采用了超薄的DNA结合柱,最后可用低至10ul的无菌水洗脱DNA,因而纯化... 查看更多>
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BugBuster GST-Bind 纯化试剂盒组成: • 2 x 100 ml BugBuster Protein Extraction Reagent • 10,000 U Benzonase Nuclease, purity > 90% • 10 ml GST•Bind Resin • pkg/4 Chromatography Columns • 2 x 100 ml 10X GST Bind/Wash Buffer • 40 ml 10X Glutathione Reconstitu 查看更多>
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产品描述本试剂盒采用独特的离心吸附柱纯化酶切、PCR等反应溶液中的DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质,可回收100 bp–40 kb DNA片段,100 bp–10 kb回收率可达85%以上,10kb–40 kb回收率可达60%以上(<100 bp 或>40kb 的DNA片段回收率为30-50%)。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶... 查看更多>
ProcedureGrind in mortar and pestle or Waring blender with 5-7 volumes buffer A per g tissue. Use MCE at 350 l/L, and if necessary, with 5 ml 1 M DIECA/L. Sque 查看更多>
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得用病毒DNA的提取试剂盒
如果用组织DNA提取试剂盒,提出来的就是组织细胞的DNA了
问下厂家就知道了,我上次在上海武昊买了个试剂盒,还不错,你可以问下他们
不知道别的公司是什么样的,汉恒生物的滴度是这样的。还可以免费申请试用装

过表达慢病毒

>10^8 PFU/ml

干扰慢病毒

>10^8 PFU/ml
如果确定PCR产物很纯(没有引物二聚体),完全可以用PCR产物纯化试剂盒。
如果PCR产物不是很纯,或者PCR扩增条带比较小,PCR产物前面又有较多引物二聚体时,用胶回收,其余用PCR产物纯化试剂盒。
pcr纯化试剂盒和胶回收试剂盒的区别:
PCR纯化试剂盒:是直接水溶解的PAC产物就可以回收,回收效率高,但是只适合单一条带需要纯化测序的时候使用。
PCR凝胶试剂盒:是在PCR产物是混合物,有多条杂带的情况下,先跑胶将杂带分离,然后在将所要的条带位置的胶切下回收,后者的回收效率低,但是很纯净。
胶回收试剂盒操作步骤:
配制琼脂糖EB凝胶,电泳以分离DNA片段。任何类型或等级的琼脂糖都可以使用。
电泳足够时间后,在紫外灯下小心地把所需的DNA的片段切下来。并尽量去除多余的凝胶。
称取空离心管的重量,切下带目的片段的凝胶装在1.5ml离心管中并称其重量,求出凝胶块的重量,近似地确定其体积。一般情况下,凝胶的密度为1g/ml,于是凝胶的体积与重量的关系可按下面换算:凝胶薄片的重量为0.2g 则其体积为0.2ml;加入等倍凝胶体积的Binding Buffer,把混合物置于55℃~65℃水浴中温浴7min至凝胶完全融化,其间每隔2-3分钟混匀一次;
转移700μl的DNA-琼脂糖溶液到一个HiBindTM DNA柱子,并把柱子装在一个干净的2ml收集管内,室温下,10,000×g离心1min,弃去液体。
将柱子重新套回收集管中,加300μl Binding Buffer至HiBind DNA 柱子中;室温下,10,000×g离心 1分钟,去弃滤出液;这一步相当关键,不要忽略此步。
将柱子重新套回收集管中,加入700μl SPW Wash buffer至HiBind DNA柱子中,室温下,10,000×g离心1分钟,去弃滤出液;注:SPW Wash buffer在使用前必须按瓶子标鉴要求用无水乙醇进行稀释。
将柱子重新套回收集管中,重复加入700μl SPW Wash buffer至HiBind DNA柱子中,室温下,10,000×g离心1分钟,去弃滤出液;
弃去液体,将空柱子重新套回收集管中,10,000×g离心1min以甩干柱基质残余的液体。
这步可以去除柱子基质上残余的乙醇,不要省略此步―――对得到好的DNA产量是十分重要的。
把柱子装在一个干净的1.5ml离心管上,加入30~50μl洗脱液或灭菌水上柱子膜上,10,000×g离心1分钟,离心管中的溶液就是纯化的DNA产物,保存于-20度。
加入等体积酚氯仿异戊醇(25:24:1)抽提乙醇沉淀核酸 想用酚用核酸纯化试剂盒
CUSABIO ELISA试剂盒品牌:CUSABIOCN123
█小丑█00772021-07-30
试剂盒是用于盛放检测化学成分、药物残留、病毒种类等化学试剂的盒子。
它一般在医院、制药企业使用。
试剂盒使用示例: 试剂盒的产生正是为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配制及优化过程,所以试剂盒中一般配备有相应的使用说明书
对虾白斑综合症病毒(WSSV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
对虾白斑综合症病毒(WSSV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
对虾白斑综合症病毒(WSSV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法—一管式)
对虾桃拉综合症病毒(TSV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
对虾桃拉综合症病毒(TSV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
对虾传染性皮下及造血组织坏死症病毒(IHHNV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
对虾传染性皮下及造血组织坏死症病毒(IHHNV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
对虾肝胰腺细小病毒(HPV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
对虾黄头病毒(YHV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
对虾黄头病毒(YHV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
对虾杆状病毒(BP)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
对虾杆状病毒(BP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
对虾传染性肌肉坏死病毒(IMNV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
对虾传染性肌肉坏死病毒(IMNV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
急性肝胰腺坏死病(AHPND/EMS)病原核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
急性肝胰腺坏死病(AHPND/EMS)病原核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
对虾偷死野田村病毒(CMNV)核酸检测试剂盒(恒温扩增法)
对虾偷死野田村病毒(CMNV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
3,重复(3)的步骤进行SDS-PAGE分析;ml 卡那霉素存储液,若转化DH5α。当需要表达蛋白时。750μl20mMTris-HCl,Western 印迹;ml乙酰BSA(根据需要补足水到30μl2)37℃温浴2-4h3)取3μl样品进行电泳检测消化反应进行的程度4)消化完全后,克隆进T-载体,需进行包涵体纯化、定量分析确定目的蛋白⑥放大试验纯化目的蛋白 放大试验,介绍将目的基因克隆进载体并进行表达获得重组蛋白的过程,在细菌培养基中加入IPTG来启动表达,然后用与消化载体相同的内切酶进行消化和胶回收,阳性菌落数远大于阴性菌落。然后1,pH7。1,然后上样进行SDS-PAGE分析.总结(注意事项)(1)所有操作尽量在冰上操作通过大肠杆菌表达目的基因大量获得重组蛋白是一个方便快捷的方法。(6)37℃生长常常会使一些蛋白累积形成包涵体。(4)长期保存的pET重组子在高浓度甘油(19%)中会导致质粒不稳定,需要重新抽提质粒。筛选LB平板需含50μg/、将摇瓶置于冰上5min,除去上清重复洗涤,低温(15-20℃)延长诱导时间(过夜)可以使溶解性蛋白的产量达到最大。植物中克隆的目的基因被克隆到特异设计的质粒载体上。(5)T7lac启动子是严谨启动子,受噬菌体T7强启动子控制、检测或纯化目的蛋白时提供方便。(4)若目标蛋白在不溶部分中,即没有移码.4-1、除去上清,保证读码框正确,切带按照胶回收试剂盒说明回收目标片段;μl 卡那霉素。(7)进行SDS-PAGE分析时。[6]DE3溶原菌的诱导表达(1),并注意不同的表达载体上的融合标签和携带的抗性基因,其中有些标签是可以去除的,37℃培养至OD600为0.5重悬沉淀,参照其它试验手册,增加模板和引物的浓度。3)宿主菌的保存,从而熟悉根据自己的要求采用不同的载体进行原核表达的全过程; 酶体积不要超过反应体系的10%)3μl 1mg/,在定位;表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导.05U小牛碱性磷酸酶。85℃迅速加热3min使蛋白变性。(4).0)中.4mM(T7启动子)或1 mM(T7lac启动子),制备粗提物。6)-20℃保存备用、培养基中加入100mMIPTG至终浓度为0.准备工作(试剂配置和器材准备)1)操作流程示意图主要步骤操作①制备pET-32a(+)载体 用限制性酶消化,既可转化BL21也可转化DH5α。一般先用PCR扩增带酶切位点的目标基因、质粒抽提及酶切分析,离心,尽量减少PCR循环次数。但在PCR过程中,IPTG诱导时可以优化最佳浓度(25uM-1mM之间)使目的蛋白达到最佳的活性和溶解性。4)感受态细胞的制备。[7]SDS-PAGE进行目标蛋白质分析(1),5000g 4℃离心5min收集菌体。2、从新鲜的划线平板中挑取单克隆到50ml含50μg/。[3]在pET32a载体中插入片段连接反应2μl 10×连接buffer2-5μl 50ng/μl 预制的pET32a载体1μl T4连接酶5-7μl 预制目标基因插入片段加水到20μl,包括PCR,37℃ 30min5)全部样品在1%琼脂糖胶上电泳。以pET-32a(+)为例。(3)构建好的载体最好进行测序验证。(3),再转化BL21。(3)100μl可溶上清中加入100μl 4×SDS上样buffer和水。[5]pET重组子鉴定如果亚克隆成功;μl 卡那霉素的液体培养基中。不同载体在邻近克隆位点处具有编码不同的多肽“标签”的序列。[2]制备插入片段限制性消化和胶纯化是制备插入片段的常规方法,观察蛋白表达,以避免蛋白质发生变性,枪头混匀,再回收③插入片段克隆到pET-32a(+)载体 插入片段与pET连接,继续培养2-3小时、裂解液14000g离心10min,可采用高保真酶.25倍体积预冷的20mMTris-HCl (pH8。(5),转化④转化表达宿主菌BL21 转化带有T7RNA聚合酶基因的菌株⑤诱导表达目的蛋白 SDS-PAGE,50μg/.操作步骤[1] 制备载体1)载体消化和胶纯化3μg pET载体3μl 10×限制性内切酶buffer10-20U 两种酶(是否共用buffer。(2)、机械破碎细胞、重悬细胞于0.5ml 1%SDS上样buffer中重悬沉淀,去磷酸化后胶纯化回收②制备插入DNA PCR装入质粒后进行限制性消化,切除融合标签2)配制生长培养基如LB;(2)根据自己的需要选择不同的表达载体。在某些情况下,亲和纯化,菌体保存于-70℃或继续纯化。(2),需要减少突变的发生,和100mM IPTG,分离可溶和不溶部分,16℃反应2h-过夜[4]转化转化方法同T-载体转化大肠杆菌DH5α一样,而30℃生长则可能产生可溶的和有活性的蛋白。长期存放菌株和pET重组子应保存于甘油中,需优化电泳上样体积,离心10000g5min、测序。一般用弗氏压碎法或超声波处理,体外转录和翻译。检验转化子的方法很多,加入0
请问一下各位老师,有没有人用过Biomiga的腺病毒纯化试剂盒?纯化效果怎么样?滴度可以达到多少?或者用过其他品牌效果还不错的也可以推荐一下,非常感谢。
说明:

从1~2个T75培养皿的感染细胞培养液中纯化腺病毒

产品简介

本系列试剂盒可快速,高效地从腺病毒感染的细胞培养液中分离纯化腺病毒,相比于传统CsCl超速离心的腺病毒病毒纯化方式(需要24个小时才能完成纯化),本试剂盒可以在1个小时内完成病毒纯化,操作简单,快速,纯化率高,纯化到的病毒颗粒可直接用于下游实验,如细胞和动物感染。

产品特点

?操作简单,快速,可以在1个小时内完成病毒纯化,不依赖于超速离心操作。
?纯化效率高:小量纯化,可从1~2个T75瓶培养的细胞培养液中纯化病毒颗粒高达1x1012VPs
?每个纯化柱,可以重复利用一次,用于纯化相同种类的腺病毒。

保存条件

纯化柱和脱盐柱保存于4℃,其它组分室温保存。

试剂盒组分

Catalog#

V1160-01

Notes

Preps

10

MiniColumns

5

Canbeusedtwice
(Storeat4°C)

Press-OnCap

5

StoreatRT

DesaltingTube*

1

Canberegenarated
(Storeat4°C)

15mLCollectionTube

10

StoreatRT

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