【求助】夹心法ELISA定量凝集素，稀释度提高OD值变化不大，请高手指正
2021-08-14
问题描述：
买的夹心法ELISA试剂盒，样品处理参照国外文献报道，豆类匀浆过夜浸提9000转离心取上清，按照试剂盒操作方式，结果发现10的5、6、7、8次方稀释度所测OD值结果基本一致，都在0.2-0.3之间，样品之间变化不大，如果按照文献理论报道含量应该是7次方的时候在检测限范围内，但7次方各个样品的OD值差异不显著，标曲相关性在0.99以上，OD值范围在0.07到0.85之间；
后采用豆粉浸提12000g离心取上清的方式，发现10的5、6、7、8次方稀释度所测OD值随着稀释度的升高而增大，比如一个样品的OD值5次方为0.2558次方为0.349；
刚接触相关知识，试验任务较重，心中疑问较大，恳请各位高手及时指正，诚谢！
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用户
求助。。
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如若似兰
用户我也遇到相同的问题，检测小鼠血清甲肝IgG,用的上海科兴的ELISA试剂盒，说是R&D进口分装的。将血清稀释525125倍，OD值变化均在0.8-1.0之间，有几个样品稀释度高反而OD值略高，但符合标准曲线OD值范围，所做标准曲线由于第一次做R方0.934，不是很好，请大牛们出来帮忙呀
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yangguuang
用户有可能10的5次方就到其检测灵敏度了，所以你在稀释的话，OD值也不会再降低了，另外ELISA方法中OD值0.2与0.3之间本身就有可能是操作过程中，误差造成的，还有可能是你的样品的溶剂可能会对检测产生影响。
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