【求助】夹心法ELISA测样品浓度过高，使用ELISA CALC进行四参数拟合算不出来是怎么回事？
2021-08-25
问题描述：
请教各位大神：
我现在用商品化的试剂盒进行夹心法ELISA测定某抗体的浓度，盒子给定了4个标准品，标准品抗体浓度为70000~1000单位，测定步骤中要求对样品进行1:1000稀释后测定。
但是有的样本按照1:1000稀释后，最终OD值大于70000浓度的标准品的OD值，然后使用ELISACALC软件进行四参数拟合，超过了标准曲线的范围，就算不出来这个样品的浓度，但是如果在1000-70000之间的OD值就可以算出相应浓度。请教大神们，接下来我是否可以对样品进行1:2000,1:4000浓度稀释，算出结果后再×2、×4，算作此样品的浓度呢？还是直接给一个＞70000的定性结果？或者可以有能算出来的其他软件？
Ps试剂盒中提及Dilutionlinearity（稀释线性？）为141%，这个是什么意思呢？
多谢！！
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Justin001
用户
你最好加大样品稀释比例，商品化的Elisa试剂盒都有它的检测范围，超出范围检测的数据是不准确的，只能做参考。所以一般做Elisa实验都会先做预实验，确定样品的大概浓度再确定正实验样品的稀释比例（稀释后的大概浓度要在试剂盒的检测范围以内）。正预实验最好都带着标准品一起做，以排除实验操作的影响
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