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For untested applications or species please refer to the S.M.A.K. program.

Purity: Polyclonal immunoglobulins purified by protein A affinity chromatography.

Form: Liquid. Supplied in 100mM sodium citrate, 50mM Tris and 0.05% v/v glycerol. Neutral pH.

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2.步骤2.1 Transwell小室制备2.1.1 无基质胶Transwell小室制备① 包被基底膜:用50mg/LMatrigel 1:8稀释液包被Transwell小室底部膜的上室面,4℃风干。如果需要在下室面铺FN的话,可将200ul枪头的尖端剪掉,吸取FN均匀涂抹在小室的下面。用胶原(collagen)的话 查看更多>
干细胞治疗具有广泛的临床前景,让攻克诸多不治之症成为可能.但其有效性和安全性一直是亟待解决的问题.本文威正翔禹/缔一生物为您分析我国科学家获得"超级"人类干细胞. 查看更多>
物种:人 来源/应用:脑;眶上区神经上皮瘤转移灶 形态学:上皮细胞 生长方式:贴壁 培养条件:DMEM(high glucose) 血清:CS 查看更多>
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准备研究一抑癌基因在肿瘤细胞中的过表达的细胞学实验及动物实验,最近做稳转发现细胞不扩增,零星几个一直贴在皿里。对照的无抑癌基因的载体稳转效果就不错,药物筛选11天,发现有很多克隆出现了。试问:1)抑癌基因的研究一定要稳转的细胞吗?瞬转难道不也能说明一些问题吗?2)对于动物实验,稳转的细胞株是最好的,但是如果老是筛选不出稳转的细胞克隆有没有代替的方法?3)大家有什么好的经验来筛选抑癌基因的稳转细胞株克隆。
最近做这个实验感觉像是在和细胞较劲儿,呵呵。
应该是通过病毒载体质粒上的标记基因比如说荧光的eGFP或者带嘌呤霉素抗性基因的用嘌呤霉素筛选吧!
稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,但是成功率很低,费时,假阳性高,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒。
各位大神,我将培养后的间充质干先液氮冻存了,现在想提rna,可以直接离心做吗?我看有人说要在冰上融化,融化后立即四度离心,离心之后就可以按正常步骤提取了。可是我冻存细胞的时候里面加入了dmso血清培养基,不需要pbs洗一下再提吗?
稳定转染VS瞬时转染123
qydsmile2021-08-21
可以做了 又不用表达个几十天的
请问肺癌细胞HCC827怎样吹打才能完全吹打开?谢谢!
取自动物并置于体外培养中的细胞在其传代之前称其为原代细胞,原代细胞一经传代便称为细胞系,一般正常细胞的这种细胞系的寿命只能维持一定的时间期限,经过一定代数传代后衰退而死亡,称为有限细胞系.一些细胞自发地或经人工诱导等方法而转化,细胞获得持久性增殖能力,这样的细胞群体称无限细胞系,也称连续细胞系.细胞只具有持久增殖能力而无成瘤性的细胞系称为永生化细胞系.详见 李健食管上皮永生化细胞系研究进展

有没有哪位大侠再养肿瘤干细胞,我准备样hct116,但感觉完全无从下手,用无血清培养基在3mm皿里培养,大多都贴壁了,只有很少成球,这成球实验怎么做,小白一个,哪位大侠传授点经验

所谓生物工程,一般认为是以生物学(特别是其中的微生物学、遗传学、生物化学和细胞学)的理论和技术为基础,结合化工、机械、电子计算机等现代工程技术,充分运用分子生物学的最新成就,自觉地操纵遗传物质,定向地改造生物或其功能,短期内创造出具有超 远缘性状的新物种,再通过合适的生物反应器对这类“工程菌”或“工程细胞株”进行大规模的培养,以生产大量有用代谢产物或发挥它们独特生理功能一门新兴技术。
生物工程包括五大工程,即遗传工程(基因工程)、细胞工程、微生物工程(发酵工程)、酶工程(生化工程)和生物反应器工程。在这五大领域中,前两者作用是将常规菌(或动植物细胞株)作为特定遗传物质受体,使它们获得外来基因,成为能表达超远缘性状的新物种——“工程菌”或“工程细胞株”。后三者的作用则是这一有巨大潜在价值的新物种创造良好的生长与繁殖条件,进行大规模的培养,以充分发挥其内在潜力,为人们提供巨大的经济效益 和社会效益。
生物工程的应用领域非常广泛,包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料等。它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响,为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。展开
原代细胞和传代细胞培养有什么区别
原代培养细胞会分裂.原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡.传代培养一般传到40-50代,这种传细胞叫细胞株.细胞株的遗传物质没有改变.其分裂能力与原代培养的一样.当细胞株传至50代以后又出现“危机”,不能再传下去,但有的细胞遗传物质发生改变,并带有癌变的特点称细胞系.这部分细胞的分裂能力比原代培养的强得多.它有无限增殖的特点.
企业如何进口细胞株
各位,最近几个月一直在帮着公司进口细胞株,我是新手,从来没有接触过这样的业务,摸着石头过河,遇到了很多问题,也得到了很多教训和经验,不敢独享,觉得还是分享一下吧,给有需要的指指道,希望能少走弯路。
先不多说,正文如下:
大家看好了,我写的是企业进口细胞株,不是针对高校或者别的什么科研机构,因为到目前为止国家还没有一个正式的文件去指导企业进口细胞株,只有一个过渡性文件,因此各地操作时也有些不同,除了北京、上海、广东等一些发达的地方有操作程序,其他地方由于企业进口细胞株的案例很少,因此很麻烦的(比如黑龙江,我们最后都找到省卫生厅厅长了)。
首先,你们公司如果选择购买一个国外的细胞株,最先考虑的是付款问题,你得找一家进出口代理公司,帮你操作,这个都是比较常规的,另外你最好再找一家在北京或者上海的公司帮助清关。这里有涉及到“进口代理协议”和“供货合同,我们当时是签了一个三方合同”,这里一定要注意和国外沟通好,需要进口的细胞株的名称、数量、价值等等,后期发货的时候千万不要不一致。
因为细胞株是特殊物品,需要从省卫生厅那里拿到一个“医用特殊物品准出入境证明”,这个东西很难搞的(高校或科研机构容易一些,基本上都有程序),尤其是一些没有先例的省份(领导不敢批,怕担事),我们公司就是黑龙江的先例,这个东西不知道怎么办的到时候可以找我私聊。搞这个东西的正常周期是2-3周,请注意,一定要把准出入境的有效时间尽量写长一点,还有就是主送单位一定要你所清关的口岸的检疫局,例如北京口岸入境,就写北京出入境检验检疫局。当时没人提醒我,这两个我都搞错过,结果多跑了几次,我们的国家服务人员态度一次比一次差,快气死了,不过后来还是搞到了。
拿到“医用特殊物品准出入境证明”以后,预付款也打了,国外准备要发货了,这之前还要一个“特殊物品入境审批单”,这个需要到你所清关的口岸的检疫局搞,下面以北京出入境检验检疫局为例,这个东西要是你是外地的(非清关所在口岸)是搞不到的,你得先去北京出入境检验检疫局备案(就是公司证照原件,情况说明,单位说明等等,比较好办),然后在你细胞株进口之前2-3周申请(1周能批,有效期3个月)。我当时是委托北京一家公司办的,因为你自己办是不方便的,到时候审批单还要亲自去取,外地的很麻烦。
箱单、发票就不说了
接下来是运输,细胞株一般都用干冰运输,当然也可以选择液氮,不过价钱不一样,液氮要比干冰贵40%左右。要计算好运输过程中干冰损失量,量要足够,最好放一个温度记录仪,如果你没有把握,在货物到港清关之前,也可以加干冰的,就比较贵,单次1000元左右。发货之前一定和发货方、运输公司沟通好,标签和数量一定要准入证明和审批单一致,要不然清关很麻烦的,我再次犯了一个错误。
最后就是清关了,这里一定要注意,你找的清关公司的清关能力一定强,一定是做过冷链清关的。
总结一下:
程序是:签合同,找进口代理和清关公司,办理相关证明文件,选择冷了运输公司,运输,清关。
文件:合同、代理协议、医用特殊物品准出入境证明、特殊物品入境审批单、发票、箱单等。
另外,这里面还有不少细节,我就不一一说了,如果真有这方面运输的,可以找我。
版主horizon801留言:
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