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yesbiotech/mAb anti-Human IL-8, I8-60, Detector/0.1 mg/MO-C40017D
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Details

Description:Mouse monoclonal antibody to human interleukin 8 (IL-8)

Purification: Protein G affinity purified

Product Type:Primary antibody, detection antibody in matched antibody pair

Target Protein:Human IL-8

Immunogen:Purified recombinant human IL-8

Fusion Myeloma:P3X63Ag8.653

Specificity:This antibody recognizes both recombinant and native human IL-8.

Species Reactivity: Human, others not tested.

Cross-reactivity:This antibody does not cross react with human Monocyte Chemotactic Activating Factor (MCAF) or RANTES (Regulated on Activation, Normal T-cell Expressed, and Secreted).

Host / Isotype: Mouse, IgG1 Kappa

Formulation: Lyophilized in 0.01M PBS, pH 7.0.

Reconstitution:Double distilled water is recommended and to adjust the final concentration to 1.00 mg/mL.

Storage: Store at -20oC

Research Area:Cytokine, interleukin and chemotaxis

Background:

Interleukin 8 (IL-8), like IL-6, is secreted by macrophages and a variety of cells that express Toll-like receptors in response to the stimulation of pathogens. IL-8"s primary function is to recruit neutrophils and other target cells through chemotaxis to the infected site to eliminate pathogens. IL-8 causes increased intracellular Ca2+, release of reactive oxygen species, and other physiological changes required for migration and phagocytosis. IL-8 is also known to promote angiogenesis.

Applications:

1. ELISA: This antibody can be used as detection antibody in sandwich ELISA applications for human IL-8 detection in combination with a monoclonal capture antibody (Cat No: MO-C40017A).

2. Neutralizing: In chemotaxis assay, the antibody inhibited 98.4% of the chemotactic activity of IL-8 on RB/293 cell using 5mg/mL of antibody and 10ng/mL of human IL-8 in assay. This antibody inhibited the chemotactic effect of human IL-8, had no inhibitory effect to MIP 1-bata and RANTES in neutrophil chemotaxis assay, indicating that the antibody’s neutralization activity is specific. The antibody also neutralized IL-8 induced calcium influx in human granulocytes.

3. Western Blot:The antibody used at 0.02-0.1μg/mL concentrations will allow visualization of 100ng/lane of recombinant human IL-8.

Figure: Western blot analysis of recombinant human IL-8 using clone I8-60.

4.IHC: The antibody was used to detect IL-8 expression in the stratum corneum of psoriatic skin tissue. The image below shows the result of detecting with anti-IL-8 clone 60, biotinylated 2rd antibody and avidin-HRP. The specimen was stained with DAB substrate for 5~10 min, and counter-stained with hematoxylin.

References:

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Product SpecificitymAb anti-Human IL-8, I8-60, Detector
ApplicationELISA, NT, WB, IHC
Size0.1 mg
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不能,它有Neomycin基因,可以用新霉素进行稳定株筛选,获得稳定株。
G418是常用的一种,还有很多药物可以用来筛选稳定株,比如puro等,就看你的细胞或质粒带什么抗性了。
之前转染了带GFP的质粒,冻存估计有半年了拿来复苏,想做后续实验,结果稳转的细胞荧光少还很弱,请问怎么办?急急急!
6kb并不大,作为质粒转染是没有问题的。
至于到底好不好转就跟你的细胞有关了,和细胞是否是稳转株关系不大。
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,但是成功率很低,费时,假阳性高,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒包装可能相对比质粒构建难度大,如果经费充足可以直接找公司包毒的。
siRNA干扰常见问题123
有恃无恐03502021-07-31
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
稳转细胞系常用的方法有脂质体转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,脂质体法筛单克隆时间耗时长,假阳性高,且效率低,大概只有1%。病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐。
如果经费充足的话可以找公司包装病毒,如武汉的普健可以提供各种载体的构建及细胞株构建的技术服务。
1、请教各位老师,转染质粒DNA的HepG2及HUH7细胞,如何筛选稳转细胞株
2、有限稀释法有没有protocol?
首先你得明确这个h9c2细胞的培养是否好做,操作是否稳定。
然后你得确定,这个细胞株对于你得研究来说不可或缺,具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话,祝你顺利。
稳定细胞株筛选是一个长期的过程,稳定细胞株筛选优化,有许多条件需要摸索,而且是从源头开始①在构建载体时,目的基因直接整合到细胞染色体组上,最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法,因为转染效率没有保证②高表达载体的构建,哺乳动物表达量一直是它自身的缺点,最好根据高表达载体定向的驯化细胞,提高蛋白表达量③细胞的选择,筛选稳定细胞株我们常用的细胞是CHO,中国仓鼠细胞,由于CHO具有诸多的优点因此适合用于筛选稳定细胞株,而HEK293细胞则常用于瞬时转染④后期的筛选,双抗预防污染,筛选细胞的时候抗生素浓度一定要做预实验,而且转染的时候不能有抗生素,关于细胞转染稳定细胞系构建的相关理论