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YPD Liquid Medium and Plates with Drugs

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YPDFILLEDMICROTITERPLATES

Uses:

1.GrowindividualstrainstouseforPCR2.Shippingstrains

1.MakeYPDregularagar(1.5-2%)forsendingstrains.

2.Make200mlbatches=enoughfor6microtiterplates.

3.AddG418at200mg/L.

4.Keepthemediumat65°orhotter.Placethemultichannelpipettorbasinonablockthatissetat65°.Pourthehotmediumnearlytothetop.

5.Dispenseagarmediaintowells.Donotblowoutthefinaldropofmediumintothewells(makesbubbles).

ColonyPCR:200µlperwell

Priortoinoculatingcells,add10µlwatertoeachwell.Theninoculatethewellswithsteriletoothpicks.Afterallthewellsareinoculated,givetheplateagentleswirltospreadthecellsonthesurfaceofthemediumineachwell.Thismakessemi-liquidculturesforuseastemplateforcolonyPCR,afterwhichtheplatescanbeParafilmedandstored.

Sendingstrains:150µlperwell

Letplatessitonbenchtodryforseveraldaysbeforeinoculatingwells.DoNOTaddwatertothewells.

fromLindaRiles,November1997

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发布于： 2021-09-12 阅读（191）

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