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(转载,仅供参考)1. 37℃水浴预热培养液(HUVEC-004)。2. 从液氮中取出HUVEC的细胞管,快速将其置入37℃水浴中解冻,直到管中只剩下最后一片结晶(注意:不要让水没过产品管)。 用75%的酒精擦拭产品管外壁。3. 将HUVEC的细胞管中的细胞移至15ml无菌离心管中,慢慢逐滴加入预温的37℃ 基础培养液(HUVEC-004B)培养液4-5ml混匀,边加边摇匀。4. 用1ml的培养液冲洗HUVEC的细胞管,向15ml离心管中加入冲洗的细胞悬液,边滴加边摇匀。5. 取10μl细胞悬液和10μl台盼蓝混匀后,取10μl计数。这一步骤非常重要,能确定您收到的产品是否合格(详见如何计数复苏的细胞)6. HUVEC的细胞悬液在1500rpm,室温条件下,离心10分钟,去除上清。7. 加HUVEC完全培养液4-5ml, 轻轻混匀细胞,备用。8. 接种前将 T25培养瓶中的包被液吸去,按2500-5000个细胞/cm2接种细胞。(1支冷冻的细胞可以种一瓶T25培养瓶)9. 每个HUVEC的细胞培养瓶中加完全培养液(HUVEC-004)3-5ml, 后置于37℃、5%CO2 培养箱内培养。
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