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Innoprot/Primary Cells Detach Kit/P60305
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Innoprot/Primary Cells Detach Kit/P60305
品牌 / 
Innoprot
货号 / 
P60305
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Primary Cells Detach Kit – Components Description:

Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline is a commonly used buffer in biological research. DPBS helps maintain a constant pH. The solution does not conatin Ca2+ or Mg2+ and is sterile-filtered. Because it is not toxic to cells and is isotonic, it may be used to rinse cells without causing any damage to them.

Trysin / EDTA solution (T/E) is a sterile, phosphate and HEPES-buffered saline solution. It contains 0,25% trypsin, 0,5 mM EDTA, 1 mM sodium pyruvate and 10 mM HEPES. This product has a pH of 7.4 at room temperature. Trypsyn/EDTA Solution is used to detach adherent cells from a culture surface.

Trysin Neutralization Solution (TNS) is a sterile, phosphate and HEPES-buffered saline solution. It contains 10% fetal bovine serum as a trypsin inhibitor and cell protect agents. The product is calcium- and magnesium-free and has a pH of 7.4 at room temperature. Trypsyn Neutralization Solution is used to neutralize the effects of Trypsin/EDTA solution after the release of cells from a culture surface.

  • Reference: P60305
  • Size/Quantity: 500 ml DPBS, 100 ml TNS, 100 ml T/E Solution
  • Storage: Store DPBS at room temperature and TNS & T/E Solution at -20°C.
  • Shipping: Dry Ice
    • Data Sheet
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    细胞纯化可根据其大小、密度、表面荷电、吸附能力或表面抗原的差异而采用密度梯度沉降法、细胞电泳、贴附、亲和层析、花环形成、补体介导杀伤溶解以及流式细胞仪(FCM)等方法来进行纯化。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990) 查看更多>
    首先,它肯定不同于原代细胞系的,最大的区别,原代的心肌细胞基本不能分裂,而H9C2可以分裂,最大的区别了吧!原代心肌细胞会跳动,你的H9C2不会吧。虽然都是梭形的,但是H9C2来源于胚胎期心脏,而心肌细胞一般用新生大鼠分离获得。H9C2与原代心肌细胞有那么大区别,当然不能替代它,所以在研究 查看更多>
    本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。 查看更多>
    以兔软骨细胞为例:①一般根据实验要求,选取不同年龄组的兔子,实际上兔子的年龄越小越好,毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力,耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨,剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜,放入盛有PBS液的培养皿中。②将分离得到的软骨组织剁碎成 查看更多>
    The wound healing assay allows the researcher to study cell migration and cell interactions. In some cases also single cell migration can be analyzed. This ass 查看更多>
    Put cryovial straight from storage and float in the 37篊 water bath- caution should be taken as on rare occasions vials can explode when heated up due to trappe 查看更多>
    干细胞的分离纯化作者:裴雪涛,本实验来自「干细胞实验指南」 查看更多>
    The technique described here is a slight modification (March 1997) of methods presented in: Nagy A., J. Rossant. 1993. Production of completely ES cell-derived 查看更多>
    基因性状的其它检测方法1) 基因长度多态性(RFLP)检测在无DNA缺失,仅发生核苷酸改变性突变疾病时,往往出现酶切位点发生改变,通过RFLP分析可以显示出。设计一对适当引物,使被扩增的片段包含有某一个或数个多态性的限制性内切酶识别位点的序列。进行PCR后,用限制性内切酶酶切PCR产物;理论上 查看更多>
    Liposome Swelling AssayREFERENCES: Nikaido and Roseenberg (1983) J.Bact 153: 241-252; Yoshimura et al. (1983) J.Bact 258: 2308-2314.METHOD:6.2 µmoles of 查看更多>
    Applied StemCell Inc.(ASC)公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多>
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    经过无数次的大鼠肝脏插针灌注,忍受过实验结果不理想的打击和折磨,今天终于成功了,特分享些相关图片以鼓励还在奋战中的网友们。


    各位前辈,我现在要分离小鼠睾丸支持细胞进行培养,但是做了三次都没有贴壁,不知道问题出在哪,**指导!!!
    我的步骤:
    1、16-22天小鼠颈椎脱臼法处死后,75%酒精浸泡30秒消毒,睾丸取出后置预冷PBS,40分钟(路上所需时间)后开始处理。
    2、剔除白膜,剪碎睾丸。0.25%胰酶(含edta)1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟,等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化,1000r/MIN离心5分钟,弃上液。
    3、加0.1%胶原酶消化30分钟,过200目网筛,1000r/MIN离心5分钟,弃上液。
    4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶,入孵育箱37°C5%CO2培养。
    请教各位,我到底是哪里有问题,是胰酶消化的时间长了吗?

    最近在做黄体化颗粒细胞分离培养,但是注射器吸取大卵泡液或者从下颗粒细胞离心时就会凝固成果冻状,大家有碰到过这样的事情么?已经好几次了,一直是这样,大家给支个招吧

    近期根据经验总结了原代肿瘤细胞分离培养的2个关键因素

    1、组织的活性:如果我们取的都是坏死的组织或者结缔组织,我相信任何方法都不可能分离出来活的细胞的。另外,取完的组织要冷藏存放,并且越早分离越好,最好在24h内,最久不要超过48h。

    2、组织的消化:在组织消化前,组织剪的越碎越好(1mm3左右为宜),组织的大小决定了组织的消化时间,不同组织消化时间差别较大:例如肺癌在2h-2.5h;食管癌在1个多小时。

    希望可以帮到各位研友,另外如果大家有更好的经验可以一起来讨论!

    刚买的分离液标本是人的为什么会有絮状物

    各位师兄师姐:

    我近期负责的课题,需要进行人类血液淋巴细胞和DC细胞的分离和培养,但我在方面懂的不多,想求助这方面的大神们。后续我需要做RT-qPCR,western-blot、免疫荧光等实验,我应该去多少ml全血比较好?全血怎么保存?怎么进行分离?后续怎么培养和保存?

    谢谢!

    请大神前辈指点指点,已经研三了,实验很不顺利,再这样都要延期的节奏了。请问最近急性分离出来的大鼠心肌细胞很不耐钙,做膜片钳封接不上可能是什么原因造成的?谢谢了!

    这两天实验需要分离乳鼠心肌细胞,操作了两次,但是效果都不好。细胞不贴壁,大量漂浮死亡。我是新手,也没有人指导,只能自己查文献摸索条件,想跟各位老师请教一下,争取早点培养成功。
    大概步骤如下:c57小鼠大概六七只,酒精浸泡后不处死取出,迅速打开胸腔取出心脏放入冰PBS冲洗。待心脏取出完毕,冲洗移入有PBS青霉素小瓶中用眼科剪剪成较小组织块。
    之后加入0.1%胰酶消化(之前浓度为0.25%,活细胞数量更少。)吹打1min.放入孵箱中3min.弃去上清,加入∥型胶原酶(0.1%)吹打10Min,放入孵箱15Min。取出后加入1ml胰酶。吹打1Min后加入含血清F12培养液终止消化,800转离心5Min。之后取沉淀重悬种板。90Min差速贴壁法纯化心肌细胞。
    48h后只有少量(个位数)细胞贴壁,呈三角形。

    第一次用0.25%胰酶时离心后有大量鼻涕样物质。
    第二次胰酶浓度减小后没有,但细胞沉淀少,且为半透明微白。是不是离心时间不够。
    感觉细胞整体状态都不好,几次都没有大量心肌细胞,更不用说观察到心肌细胞搏动。
    老师们能不能帮忙分析一下是哪里的原因呢。
    有没有比较稳定的小鼠乳鼠心肌细胞分离步骤呢。
    希望大神快点出现。

    各位大神,刚开始学习细胞培养,实验室也没有人做这方面的,希望有前辈做过毛囊干细胞的多多赐教!
    肝细胞的分离123
    blue66612017-08-17

    最近分离肝脏原代细胞,发现分出来的都是细胞碎片,请问最可能的问题出在哪里呢?求指教

    前辈们好,近期老板布置任务需要分离小鼠肝脏细胞,查了好多文献,都没有写胶原酶的cat#,只写sigma订购,想请教下,是否有人做过,可以提供下货号和使用方法吗?十分感谢。另外,文中还提到digitonin,如果有一起用到的话麻烦帮我查看下,谢谢。

    我做的临床试验,就想简单检测PBMC细胞的凋亡,上流式检测,有啥检测效果好的步骤推荐一下,谢谢