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硝化棉热脱水装置控制系统研究与设计_图文_
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PreparationofAffinityColumn

SEK5/3/95
  1. Add222.2ul1MMOPS,pH7.5to2mLof10mgofCREBtide(0.1MMOPSpH7.5finalconcentration).

  2. ReadOD205,OD280(using0.1MMOPSbufferasblank)

  3. Affigel-10isstoredfrozenat<-70¼C.Thawat4¼Cfor~20min.

  4. Filter1-2mLonnylon(0.22uMporesize),usingBuchnerfunnelandvacuum.Donotallowbeadstodry.

  5. Washbedwith3x2mLdH2O.

  6. Scrape0.5-1mLinto15mLmicrofugetube.

  7. Add2.22mlCREBtideligandsolutiontotube.Rockat4¼Cfor4hrs.

  8. Transferslurrytocolumn.

  9. Wash2x500uLdH2O.

  10. Collecteluateandsaveat-20¼C.ReadOD.

  11. Washcolumn:
    • 2x5mLcoldPBS
    • 1x5mLPBS/0.02%NaN3(1uLNaN3in5mLPBS)

  12. Storeat4¼CuprightinbeakerinPBS/NaN3+Parafilm.

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发布于 ： 2018-12-26 阅读（109）
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