VAChTTransporterMonoclonalAntibody
CatalogNo.:56513(cloneS6-38)Size:100uginPBS(1mg/ml),pH7.4,50%glycerol,0.09%sodiumazide.
PurifiedbyProteinGaffinitychromatography.
VAChTisamemberofthevesicularaminetransporter(VMAT)family.Theencodedtransmembraneproteintransportsacetylcholineintosecretoryvesiclesforreleaseintotheextracellularspace.AcetylcholinetransportutilizesaprotongrADIentestablishedbyavacuolarATPase.Thisgeneislocatedwithinthefirstintronofthecholineacetyltransferasegene.
Antigen:Syntheticpeptidecorrespondingtoaa521-532(CEDDYNYYYTRS)ofhumanVAChT(accessionno.NP_003046)
HostSpecies:Mouse
AntibodyClass:IgG1
Thisantibodyrecognizeshuman,mouse,andratVAChT.
APPLICATIONSImmunoblotting:useat1-10ug/ml.Abandof55kDaisdetected.ThemolecularweightofglycosylatedVAChTis70kDa.
WesternblotanalysisofVAChTonratbrainmembranewith#56513at1ug/ml.
Immunohistochemistry:useat1-10ug/ml.Thesearerecommendedconcentrations.Endusershoulddetermineoptimalconcentrationsfortheirapplications.
Positivecontrol:ratbrain
DiluteinPBSormediumwhichisidenticaltothatusedintheassaysystem.
Thisproductisstableforatleast1yearat
-20oC.Freezeinmultiplealiquotstoavoidrepeatedfreeze-thawcycles.
Forinvitroinvestigationaluseonly.Notforuseintherapeuticordiagnosticprocedures.
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用液氮淬灭是怎么淬灭法?
具体应该怎么操作?
请不吝赐教!!谢谢各位大大!!
酶的作用是催化剂,促进或抑制反应的进行.加热主要是通过升高温度加快反应速率,无机催化剂和酶的原理相同,都是通过降低反应的活化能加快反应速率
现在急需使用这个机器,补试验,不知道哪位能够提供重庆的Seahorse机器信息。非常感谢!
Seahorse细胞代谢分析
美国海马细胞能量代谢实时测定仪/生物能量代谢测定仪XF(SeahorseXFExtracellularFluxAnalyzers)——2009年全球创新技术产品Top10!
美国海马生物科学利用细胞外流量(ExtracellularFlux,XF)检测专利技术,发明了业界第一款海马细胞能量代谢实时测定仪/生物能量代谢测定仪XF24/96,是进行细胞代谢分析、氧呼吸测定、药物代谢分析、线粒体有氧代谢和糖酵解等功能的最佳分析工具。
美国海马细胞能量代谢实时测定仪/生物能量代谢测定仪XF24通过特殊的细胞培养微孔板设计,在测量时临时形成的约5ul微环境中,利用无创的专利光学传感器同步地实时探测溶解氧(OCR)和pH值变化,从而快速了解细胞内两大能量转换途径(线粒体的有氧代谢和糖酵解)的能量代谢状态。在使用XF24的检测过程中,研究人员可以通过预设程序控制在特定时间向待测细胞的培养基中添加多达四种药物,以便研究不同药物对细胞新陈代谢的影响,理解细胞的生物能量变化,快速解析细胞或组织的基础代谢率、ATP转换、膜的完整性、极限呼吸率、线粒体功能,产生氧自由基及超氧化物等有毒物的情况,省时省力,实验数据更科学,更具有说服力。
A.衰老的细胞新陈代谢速率加快
B.在衰老的细胞内有些酶的活性降低
C.衰老的细胞呼吸速率减慢
D.细胞膜通透性改变,使物质运输功能降低
1.有些激素的受体在细胞膜上,这些激素作用于细胞膜后可以改变细胞膜的通透性。
2.有些激素的受体位于细胞核或者细胞质,通过影响基因的表达来影响靶细胞内酶的活性或酶的数量来调节细胞代谢。
比利时研究人员发现了一个在癌症转移中的关键步骤。他们的研究显示,可以通过调节巨噬细胞的代谢来阻止癌细胞扩散,而这种调节的关键在于诱导巨噬细胞从形成癌细胞血管的细胞中"偷取"糖分。造成癌细胞周围血管结构更加紧密,由此阻挡癌细胞向其他器官扩散。
这项研究结果发表在了国际顶尖学术期刊《细胞代谢》(CellMetabolism)上。
巨噬细胞属于白细胞的一种,负责清除入侵机体的微生物和有害物质,是免疫系统的重要组成结构。然而,巨噬细胞在癌症发展中却具有一定的推动作用。肿瘤组织具有一群特异性巨噬细胞,在肿瘤血管的形成中起到决定性的作用。通过这种特异性巨噬细胞的作用,导致肿瘤血管通常结构混乱,癌细胞更容易穿过血管间隙逃逸,进入血液,最终入侵其他器官。
研究人员阻断了巨噬细胞中REDD1基因的表达,刺激细胞的糖酵解作用,使得细胞内更多的糖被转化为能量。"肿瘤的葡萄糖供给对人体会形成危害。具体来说,形成血管的细胞由于葡萄糖供应过剩导致生长失控,最终形成一个混乱且不规则的典型肿瘤血管网络。"文章的作者之一MassimilianoMazzone教授说。
"通过改变巨噬细胞的代谢,我们建立起了巨噬细胞和肿瘤血管之间的葡萄糖竞争。最终,肿瘤血管因为失去了葡萄糖过剩的刺激,在肿瘤周围形成更加架构化的屏障,阻挡肿瘤细胞扩散。"
此外,研究人员还试图将这项研究拓展到其他抗癌药物的应用中。"在小鼠中,能抑制癌细胞生长的药物mTOR抑制剂有时会因为阻断了巨噬细胞的糖酵解作用而加速癌细胞扩散。我们希望能利用我们的研究结果来准确预测那些患者对mTOR抑制剂具有抗性。"MassimilianoMazzone教授说。
不破坏细胞结构,同步动态侦测细胞有氧呼吸,糖酵解OCR/ECA(总或乳酸ECA);
i.过氧敏感荧光素(或pH敏感荧光素),Ex340-380/535/Em630-680nm,实时测量线粒体/胞内/胞外重要代谢指标,荧光素为非结构性结合可逆转改变;
ii.可同时或单个测量OCR/ECA或其他参数,不会做成浪费,可采用时间分辨荧光技术可加强系统信噪比
iii.通过两个加药口,可对检测细胞加入适当抑制剂/刺激实时监测细胞对不同毒素作用

