
Description Analyze and manipulate the intramolecular interaction between the N- and C-terminal domains of Androgen Receptor (AR) with ChromoTek Fluorescent-Two Hybrid (F2H®) AR. Wild-type (wt), as well as several mutant AR forms can be investigated.
Specificity AR is expressed as two separate domains Bait: AR ligand binding domain (AR-LBD) fused to GFP Prey: AR N-terminal domain (AR-NTD) fused to RFP Bait and prey interact.
Applications Detect early steps of Androgen Receptor activation Real-time agonists and antagonists screening Visualized in live mammalian cells
Available AR variants AR-LBD: wt, W741L, F876L, T877A, F876L-T877A
Click on the left picture for a live cell analysis example Live-cell F2H imaging of reversible interactions between AR-LBD-GFP (green) and AR-NTD-RFP (red) in F2H-BHK cells
德国chromotek公司成立于2008年,致力于细胞生物学和蛋白质组学的研发与研究,公司拥有强大的研发团队,有先进的生物制剂,主要主要使命是花费较少的时间和成本,使客户获得得高质量的实验数据。
ChromoTekGmbH开创了一类新的免疫学研究工具,该工具源自细胞生物学和蛋白质组学的单域骆驼抗体。ChromoTek成立于2008年,由UlrichRothbauer周边的一个研究团队从慕尼黑路德维希马克西米利安大学(LMU)分拆而来,现已迅速发展成为著名的创新试剂供应商和大型制药公司值得信赖的服务提供商。我们的管理团队结合了互补的技能和经验,形成了持续增长的基础。 ChromoTek的产品分类: 一、Nano-Trap系列;以产品结合物为标准,包含磁珠系列和琼脂糖珠子系列,还有96板系列;抗体结合物包括GFPTrap,RFPTrap,GSTTrap,Dnmt1-Trap;Mk2-Trap;P53-Trap;Mdm4/HdmX-Trap 二、Booster系列;含GFPboosterRFPbooster; 三、可用于HCA实验的Chromobodies(质粒或细胞系形式); 四、 高品质抗体(标签蛋白抗体和普通抗体); 德国ChromoTek公司成立于2008年,致力于细胞生物学和蛋白质组学的研发与研究。产品包括单克隆抗体、重组单域抗体、荧光抗体、GFP或RFP连接蛋白等。 ChromoTek有限公司先驱来自单个域骆驼抗体的免疫学研究工具,为细胞生物学和蛋白质组学研究开辟了新的一类。ChromoTek成立于2008年,作为一个分拆上市的路德维希 - 马克西米利安慕尼黑大学(LMU)的一个研究小组围绕乌尔里希Rothbauer,已迅速发展成为一个**的创新试剂供应商,以及作为一个值得信赖的服务提供商,为大型制药公司。我们的管理团队结合互补的技能和经验,形成持续增长的趋势。我们的使命是更好发展,并促进我们的客户在世界各地的研究开发和商业化。正在开发一系列的产品和服务,我们的目标是成为*被认可的在蛋白质组学和活细胞成像领域的***。ChromoTek
蚂蚁淘生物科技有限公司是德国ChromoTek公司的中国合作伙伴和签约总代理商
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在课题组例会上做汇报时,有老师对我用CCK-8做细胞增殖实验提出质疑,他说CCK-8是测细胞活力的
想听听大家的意见,不胜感激
郎格罕斯细胞组织细胞增生症(Langerhanscellhistiocytosis)或郎格罕斯细胞病(Langerhans#39;celldisease)又称组织细胞增生症X(HistiocytosisX),为一组少见的,以郎格罕斯细胞增生为主的疾病.本病的病因和发病机制尚不清楚,有人认为是反应性疾病,而非真性肿瘤.也有人认为本病是免疫系统异常所致,但通过PCNA免疫组化可见较多的阳性细胞,且病变中常见核分裂象故认为是增生性疾病,可能为肿瘤性增生。这种病要看医生。
B、癌胚抗原为肠癌组织产生的一种糖蛋白,故可用于癌细胞的检测,B错误;
下、癌细胞表面糖蛋白减少,故可用于检测细胞癌变的证据,下错误;
D、癌细胞的磷脂分子未发生变化,故不能用于检测细胞癌变的证据,D正确.
①持续分裂细胞,又称周期性细胞, 即在细胞周期中连续运转的细胞。机体内某些组织需要不断的更新,组成这些组织的细胞就必须通过不断分裂产生新细胞。此类细胞的分裂周期非常正常, 有丝分裂的活性很高。如性细胞(包括卵母细胞和精原细胞),它们要不断地产生配子; 造血干细胞需要不断地产生红细胞和白细胞;上皮基底层细胞需要通过分裂不断补充表面老化死亡的细胞; 植物的根茎尖端细胞需要通过分裂进行生长等都是具有正常周期的持续分裂细胞。
②终端分化细胞, 即永久性失去了分裂能力的细胞,它们不可逆地脱离了细胞周期, 但保持了生理活性机能。这些细胞都是高度特化的细胞, 如哺乳动物的红细胞、神经细胞、多形性白细胞、肌细胞等, 这些细胞一旦分化,就永远保持这种不分裂状态直到死亡。
③G0细胞,又称休眠细胞,暂时脱离细胞周期,不进行DNA复制和分裂, 也称静止细胞群。但这些细胞可在某些条件的诱导下重新开始DNA合成, 进行细胞分裂。如肝细胞, 外科手术切除部分肝组成后可以诱导进入细胞分裂。淋巴细胞可通过与抗原的相互作用诱导增殖。在胚胎发育早期(卵裂期),所有的细胞均为周期性细胞, 以后随着发育成熟, 某些细胞进入了GO期, 某些细胞分化后丧失分裂能力。到成体时,只有少数细胞处于增殖状态, 它们的增殖仅作为补充丢失的细胞, 或对外界刺激的反应。
原核生物比如大肠杆菌促进增殖药物还不如提供更好的营养条件、足够的环境;抑制类药物如上。
根据细胞种类不同,可能需要不同成分的培养液,来达到促进/抑制的作用
1,如果加入的药物中含有金属,是否会有影响?
金属对CCK-8显色有影响。当终浓度为1Mm的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色反应,使灵敏度降级。如果终浓度是10Mm的话,将会100%抑制。
2,CCK-8试剂的保存条件?
在避光条件下CCK-8试剂在4℃可保存一年。如果需要保存较长时间的话,推荐在-20℃下保存。但是CCK-8若反复解冻和冰冻将会增加空白吸收,从而影响检测结果,若经常使用可将试剂存放在4℃冰箱内保存。
3,预培养后,更换培养基需要细胞计数吗?
一般情况下用胰蛋白酶处理对数增长期的细胞,用血球计数盘计数,制备成一定浓度的细胞悬液即可。如果想要精密计数细胞的话,可以预培养后取培养基用血球计数盘进行计数。
4,CCK-8对于不同的细胞,灵敏度是否一样?
不一样,悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于贴壁细胞,一般加入CCK-8培养1-4小时吸光度已经很高,但对于悬浮细胞则可能吸光度较低,可以通过延长CCK-8的加入时间或增加细胞数量来解决。
5,悬浮细胞和贴壁细胞在数量上有何区别?
悬浮细胞由于染色比较困那,一般需要增加细胞数量和延长培养时间。贴壁细胞染色比较容易,若细胞数量过大,有时吸光度会超过酶标仪的读数。
6,应该每次做标准曲线吗?
建议每次做。虽然细胞是一样的,但是细胞的状态不一定一样,对于状态不一样的细胞,建议每次做标准曲线。如果试剂的批号不一样,灵敏度可能会有轻微的差异,对于不同的批号建议分别做标准曲线。
7,有时在药物作用情况下,细胞已经死亡,但是脱氢酶的活性还在,是否能计算细胞数量?
不能。由于CCK-8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量,如果细胞已经死亡,但脱氢酶的活性还在,则试剂测定的细胞数量将会比真实值高,不能真实反映活细胞数量,建议采用别的方法测定。
8,实验之前,是否需要先检测一下培养基和CCK-8是否会反应?
需要,可用一个孔检测一下,因为有培养基中可能含有氧化还原反应的物质,在正式实验之前有必要先确认培养基和CCK-8是否反应。一般正常在的OD值应该在0.4以下。
9,如果OD值太低,可以采取什么办法?
可以采取2个办法:①适当增加细胞数量。②延长加入CCK-8试剂后的染色时间。
以上内容来自英格恩生物CCK8试剂盒
比如用CD3、CD28刺激,除了这个还有什么方法吗?增殖!
and还想问问用CD3、CD28刺激是不是所有T细胞都能增殖?
EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象。

