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求快速破碎大量大肠杆菌的方法 微生物 学术 科研...
发布人 hxwyq   发布时间 2021-07-24
我想用大肠杆菌来表达一种磷脂酶，目前我用的方法是先加溶菌酶和保护剂，15－20min后，再用超声波1min，可是跑出的带很不清晰，看上去就是一片蓝而已，好像是有所降解吧。不知是哪里做的不好了
真菌细胞壁的破碎方法 免疫学讨论版论坛
发布人 zhangzaiguozyf   发布时间 2021-07-23
大家好，有谁知道真菌细胞壁的破碎方法，各种试剂的使用浓度，越详细越好，谢谢
如何快速鉴定转化子DNA 实验方法
发布人 root   发布时间 2021-07-22
首先说明，因为最近有人向我要，我以前也发过，好像是试剂配方不全，所以在此补发一个，望版主不要删了！多谢！快速细胞破碎法鉴定转化子DNA（分离效果一般，二者要相差比较大才行，我常用前者，一般T载体上的要五百bp以上，一千bp以上最好！）快速细胞破碎法鉴定转化子DNA1、转化子菌落接种于相应的抗性培养基2.0ml，过夜培养。（要求设立对照！）2、制备0.8%琼脂糖胶。3、取1.5ml过夜培养物离心，15kr/min，1min；弃上清。（剩余保种！）4、加水重悬，离心如上。留沉淀。5、每管加50—10...
冻融法破碎细胞的冻融时间与破碎程度有无关联 细胞技术讨论版...
发布人 sun21   发布时间 2021-07-20
想问一下，一般破碎细胞冻融时间要多久，几次。冻融时间与次数与细胞破碎程度有关吗？因为我们这一般都是十二小时一次，共三次。但因为我必须一天完成，所以我第一次三小时，化一小时，第二次二小时，化半小时，第三次冻只有一小时。我不知这样破碎是否完全。另外还想问一下，还有其他可行的破碎方法吗谢谢
如何除去破碎后的细胞中的生物大分子
发布人 油条c22   发布时间 2017-09-30
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳；如果是分析蛋白质，则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。以DNA凝胶电泳为例，电泳的操作步骤如下：1、安装电泳槽将有机玻璃的电泳凝胶床洗净，晾干，用胶带将两端的开口封好，放在水平的工作台上，插上样品梳。2、琼脂糖凝胶的制备称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中，（按0.3-1.5%的琼脂糖含量，1-25kb大小的DNA用1%的凝胶，20-100kb的DNA...
一种高效安全提取动物肌肉组织DNA的方法技术,动物组织dna提取专...
发布人 棉花糖之Z7   发布时间 2017-09-30
会不会导致DNA片段破碎？
处方分析全
发布人 选择性失忆1992   发布时间 2017-09-30
硼酸和石蜡研磨能充分混匀吗
样品的制备有什么要求?烘干,破碎过筛,混匀,缩分各工序的要点是什么
发布人 温柔攻DN   发布时间 2017-09-30
样品一般都要做到最好，你看成品的具体要求，水分、细度、合格率等。
请教天然橡胶的使用工艺及注意事项乳胶技术橡胶技术网
发布人 swlrsis8   发布时间 2017-09-30
一种碎胶机破碎系统，包括底座、转刀、固定刀、筛孔刀，所述底座前后面设有平板，平板上设置有旋转轴，转刀固定在旋转轴上，所述底座的内端面左右两侧设有固定刀，固定刀的刃部面向旋转轴，所述筛孔刀安装在底座下部，筛孔刀位于旋转轴的正下方。通过设置转刀、固定刀和筛孔刀，三刀同时工作，胶块受到三重切割，可有效快捷的将大胶块破碎并且得到预定规格胶粒的颗粒更加均匀，降低了功耗，提高了工作效率，同时设置有液压缸控制筛孔刀的抽出和复位，打开门时便于对检修刀具及对内部进行清洁，不仅结构简单、操作维护也更加方便，且经济实...
RKEF工艺技术
发布人    发布时间 2017-09-30
什么是RKEF工艺
货物学试题(2)
发布人 找不回的岁月   发布时间 2017-09-30
烘干机
【求助】关于用超声波破碎细胞的问题 经验共享 分析测试百科
发布人 血刺潇潇w椦   发布时间 2017-09-30
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳；如果是分析蛋白质，则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。以DNA凝胶电泳为例，电泳的操作步骤如下：1、安装电泳槽将有机玻璃的电泳凝胶床洗净，晾干，用胶带将两端的开口封好，放在水平的工作台上，插上样品梳。2、琼脂糖凝胶的制备称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中，（按0.3-1.5%的琼脂糖含量，1-25kb大小的DNA用1%的凝胶，20-100kb的DNA...
【求助】超声处理细胞/细菌样品破碎DNA是否合理? 蛋白质和糖学...
发布人 supermaltose   发布时间 2009-07-26
加loADIngbuffer裂解细胞/细菌以后，样品里面的DNA会和SDS形成一团东西，无法直接上样平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟，然后上样的但是一方面，常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏，因为发现加冰以后超声会变得非常弱，所以都么加冰。另一方面，因为水浴超声声强是不均匀的，如果样品多的话，会发现有些已经超碎DNA，但有些还是一团。不知道是否有其他更好的方法？
【求助】蛋白表达及菌体破碎问题 经验共享 分析测试百科
发布人 huolizwh   发布时间 2009-02-15
我做大肠杆菌原核表达，选用pGEX系列载体，收集菌体超生破碎后离心取菌体上清，上清内有大量核酸，用GST亲和层析柱纯化蛋白，谷胱甘肽洗脱峰特别小。问：1如才能提高柱子吸附蛋白量？2样品中的核酸对吸附有无太大影响？3我拟采用阴离子交换树脂，问pH8.0条件下除去核酸可否？4怎么提高样品的澄清度？
[求助] 溶菌酶破碎大肠杆菌 生物科学 学术科研互动社区
发布人 badigo   发布时间 2008-12-04
我打算做蛋白提取，以前单纯用超声效果不好，为了尽量保留活性，选择用溶菌酶见超声破碎的方法。我按照分子克隆上的步骤：1.菌体称重为0.4g，加PBSbuffer3ml（PH=8.05），充分混匀。2.加现配的50mg/ml溶菌酶溶液240微升，至终浓度4mg/ml。冰置3小时。3.超声400w，10s，10s，40次，结果目测还是乳白色，镜检很多菌体。为什么破不开，搞不懂，我前几天做预实验的时候，还能变澄清？？？注：预实验的步骤与现在的一样，只是菌体重量是0.1g加PBS3ml，再加溶菌酶至1mg...
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