透析离心后的蛋白超滤浓缩之后蛋白沉淀怎么解决

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2017-04-20

问题描述：

如题，透析之后离心得到了澄清的蛋白溶液，为什么浓缩超滤之后蛋白出现我蛋白颜色的沉淀，是因为蛋白浓度太浓了还是缓冲液等其他问题(本人养的蛋白pi值大于9，用的ph7.0的20mM磷酸盐缓冲液)

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Ksoul

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浓缩后蛋白浓度过大容易发生聚集，先适量降低浓缩倍数看看。

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海风朔语

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Ksoul浓缩后蛋白浓度过大容易发生聚集，先适量降低浓缩倍数看看。我是打算上纯化仪，打算超滤到10ml左右，浓度也不是特别大，但是就是会沉淀，不知道有啥办法

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Ksoul

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海风朔语我是打算上纯化仪，打算超滤到10ml左右，浓度也不是特别大，但是就是会沉淀，不知道有啥办法看你过什么柱子，分子筛还是离子交换什么的，我这边经常用分子筛，理论2～20mg/ml，建议浓度5～15mg/ml。离子交换也用，这个载量要求比较宽泛灵活。如果聚集沉降太明显，一是降低蛋白浓度，二是可以在不影响蛋白性质的情况下提高助溶剂的浓度。

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海风朔语

用户

Ksoul看你过什么柱子，分子筛还是离子交换什么的，我这边经常用分子筛，理论2～20mg/ml，建议浓度5～15mg/ml。离子交换也用，这个载量要求比较宽泛灵活。如果聚集沉降太明显，一是降低蛋白浓度，二是可以在不影响蛋白性质的情况下提高助溶剂的浓度。打算过离子柱，如果说把20mM磷酸盐缓冲液适当提高浓度可以减少蛋白聚集沉淀是吧

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