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发布人 Plum_ZH 发布时间 2018-01-22

抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。一般而言，抗体按靶位点不同主要分为单克隆抗体和多克隆抗体，由多个B淋巴细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体，本篇主要讲述兔源性多克隆抗体制备的相关流程。抗原有两个基本特性，即抗原性和免疫原性。有抗原性的物质不一定有免疫原性，所以由此引出半抗原和完全全抗原，半抗原必须经过经过一定的改造（偶联蛋白载体BSA，OV...

【分享】我也来贴一个:糖类物质与生物功能_问答

发布人 wonny 发布时间 2018-01-22

众所周知，糖类化合物是一切生物体维持生命活动所需能量的主要来源，是生物体合成其它化合物的基本原料，或充当生物体的结构原料。糖类化学的研究较早，但在核酸、蛋白质的研究处于鼎盛时期，对糖类化合物的研究一度受到冷落。直到20世纪70年代后，随着分子生物学的发展，人们逐步认识到，糖类是涉及生命活动本质的生物大分子之一糖类具有多个羟基，糖苷键又有α、β构型之分，单糖的连接可能产生数目很大的异构体，因此，糖链结构蕴含十分丰富的生物语言信息，是高密度的信息载体。　　细胞是生物体的基本单位，种类繁多的细胞形成各...

纯化蛋白后去咪唑透析液如何配制？_问答详情_蚂蚁淘,【正品极速】...

发布人 Siliang0212 发布时间 2017-08-22

各位大神，本人小白一枚，最近做镍柱纯化His标签蛋白，做到透析一步，不知道透析液该怎么配，在此请教大家！我纯化蛋白时用的缓冲液是50mMNaH2PO4，300mMNaCl，pH8.0，洗脱缓冲液在这基础上加咪唑；现在纯化后想透析掉咪唑，透析液是直接用结合缓冲液，还是PBS缓冲液，或是Tris-Hcl缓冲液？我考虑用结合缓冲液和PBS缓冲液是因为离子成分相近（都有NaH2PO4和NaCl），盐离子环境的变化不大，但是结合缓冲液的盐离子浓度是不是高了？PBS缓冲液pH一般是7.4，pH从8.0到7....

蛋白在超滤管浓缩过程中出现沉淀怎么办蛋白质和糖学论坛

发布人海风朔语发布时间 2017-04-20

如题，透析之后离心得到了澄清的蛋白溶液，为什么浓缩超滤之后蛋白出现我蛋白颜色的沉淀，是因为蛋白浓度太浓了还是缓冲液等其他问题(本人养的蛋白pi值大于9，用的ph7.0的20mM磷酸盐缓冲液)

这个去垢剂的单体聚集数蛋白质和糖学技术讨论版论坛

发布人颜良发布时间 2017-01-05

同时具有疏水和亲水两种基团的化合物，去垢剂能够形成胶束(micelle)，所以非常易于在水中溶解。去垢剂（离子或非离子表面活性剂）的单体聚集数，这个参数可以从哪儿获取？我想知道sarksol的单体聚集数如果是蛋白纯化过程中，使用了去垢剂而形成了胶束，比如这个TritonX100单体分子量是628,胶束的单体聚集数是140,所以胶束的分子量有87KD了，透析或超滤皆不可用，该用什么方法除去呢？

【求助】蛋白里有些许去垢剂过分子筛时对柱子有何影响？ ÄKTA ...

发布人 1映日荷花别样红1 发布时间 2015-05-25

实验室纯化了一个蛋白，但是在包涵体复性时使用了变性剂，但透析时透析液里没有没有去垢剂，不知道过分子筛时对柱子有没有什么影响？请教各位大侠，**

【原创】taq酶表达的一些个人经验实验方法

发布人 huanglinjoe 发布时间 2008-02-02

最近做了taq酶的表达和纯化，将优化的实验流程和一点心得贴上来，希望对大家有帮助，更希望得到批评和指正TaqDNA聚合酶表达载体的构建与提取纯化1.背景重组TaqDNA聚合酶基因及表达载体插入重组TaqDNA聚合酶基因的pET-28a表达质粒，该质粒是由美国Novagen公司推出的能在大肠杆菌中高效表达的一种质粒载体。该质粒在克隆位点前有1个T7启动子，在T7启动子前有1个6×His-Tagcoding序列，是T7的增强子，多克隆位点上有NcoI—Xhol11个酶切位点，载体上还有1个卡那霉素(...

【求助】如何去除小分子蛋白里面含有的色素和糖类蛋白质和糖学...

发布人 w_hl 发布时间 2007-09-11

:(我提取的小分子蛋白里含有很多的色素和糖类，不知道用什么方法可以除去，想首先过透析，让小分子蛋白出来，然后浓缩外液，然后DEAE除色素（不知道是否可以除去色素，看过有人这样除，但不知道原理），然后不知道小分子的低聚糖怎么除去？不知道我的思路怎样？可否指点？

【求助】透析时可以选择纯水作透析液吗蛋白质和糖学论坛

发布人 jun1874 发布时间 2007-04-07

我有一蛋白,此蛋白共经过两次纯化,第一次凝胶层析,用的是20mmHCl作为洗脱液,第二次纯化用离子交换,初期洗脱液为20mmNaAc(pH6.0),后用含1.5MNaCl的20mmNaAc(pH6.0)梯度洗脱.现欲对其进行脱盐,想选择透析的方法,不知透析液该用哪个呢?考虑到HCl具挥发性,如用20mMHCl冻干后似可以完全脱盐,且第一次纯化时也用此缓冲液洗脱,应对蛋白活性没有太大影响,不知是否可以选择其作为透析的缓冲液呢?还是应选择pH为6.0的PBS作为缓冲液呢?望达人告知啊~~~3Q~~~

【求助】氯化铯纯化腺病毒出问题[已解决] 核酸基因技术讨论版...

发布人 zehui_2005 发布时间 2006-11-23

各位xdjm，我在做腺病毒的纯化，用的是氯化铯密度梯度离心法，遇到了一些问题，急盼指点！不胜感激！1、氯化铯的配制方法，如配制1.1g/ml、1.3g/ml和1.4g/ml的氯化铯应该是怎样配制呢？比例如何，是用tris－Hcl直接稀释呢，还是先配成饱和状态呢？2、氯化铯纯化腺病毒以后，是用什么样的透析袋呢？一般孔径的可不可以啊？腺病毒的直径大约90nm。再次谢过！！

HisTag 表达蛋白纯化原理、方法和问题分析

发布人 lilingrui 发布时间 2006-01-22

请问：我用pet-32表达了我的目标蛋白，想用做抗原制备多克隆抗体。目标蛋白是以包含体的形式表达的融合蛋白，我用8M的尿素进行溶解后上Ni柱进行纯化，但整个过程中遇到了很多的问题，以前没有做过，还是菜鸟。请大家帮帮忙，在此先谢过！我遇到的问题有：1、溶解效果不好：菌体加含8M的尿素的磷酸缓冲液后用超声波破菌，室温溶解1小时以上，甚至过夜溶解，溶解效果均很理想，虽然溶解了一部分，但是大多数还在沉淀里。我也做过含尿素梯度的缓冲液，我的目标蛋白在0.5M的尿素就有溶解，好像增加尿素的浓度对他的溶解影响...

对多糖类有效部位新药药学研究的建议【临床药学讨论版】

发布人 herbchina 发布时间 2005-08-12

对多糖类有效部位新药药学研究的建议正文审评二部李计萍多糖广泛存在于动物、植物、微生物等有机体中，来源很广。其中研究较早且最多的是从细菌中得到的各种荚膜多糖，它在医药上主要用于疫苗生产。多糖的研究起自20世纪60年代，从20世纪70年代开始逐渐发现多糖及其复合物(蛋白多糖和脂多糖)具有多方面的药理作用，主要包括：增强免疫、抗肿瘤、降血压、降血脂、降血糖、抗衰老、增强骨髓造血机能、抗辐射、对肝肾等主要脏器的保护作用等。由于多糖多种多样的生物活性以及在保健、疾病治疗领域的广泛使用，使多糖生物资源的开发...

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