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Joseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid W. RussellUniversity of Texas Southwestern Medical Center, Dall 查看更多
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2018-12-26
大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍 查看更多
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2021-07-24
下述流程曾用于溶解凝乳酶原包涵体,是对Marston等(1984)所用方法的改进。关于溶解蛋白的再折叠参见本方案的附加方案。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔。 查看更多
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2021-08-01
抗体作为生物学上的一个有用工具已经超过一个世纪。 1 9 世 纪 7 0 年 代 , Emil vonBehring 和 Shibasaburo Kitasato⑴最先阐述了免疫球蛋白,从那时起,抗体在研究和商业应用方面的使用取得了前所未有的进展。抗体最初是作为治疗病毒性疾病的天然抗血清来使用的。现今,高度工程化的治疗性抗体已被用于治疗多种危及生命的疾病。这一章将介绍纯化抗体的几种方法,尤其是单克隆抗体的纯化,纯化后的单克隆抗体具有多种用途。本章还将介绍抗体纯化前后的鉴定学方法。本章中,我们实验室产生的数 查看更多
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2021-08-14
在大多数情况下,免疫血清、杂交瘤细胞培养上清以及腹水中的抗体需经纯化后再用于各种免疫学检测中去。免疫球蛋白常用的纯化方法有盐析法、凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析以及高效液相色谱等方法。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990) 查看更多
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2018-12-26
Preparation of Cell Lysate1. Wash adherent cells twice in the dish or flask with ice-cold PBS and drain off PBS. Wash non-adherent cells in PBS and centrifuge 查看更多
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2018-12-26
This specfic protocol is the latest incarnation of peptide mapping procedures that have been developed here in the TVL/MBVL of the Salk Institute over the last 查看更多
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2021-08-28
蛋白质组学和结构基因组学需要这种蛋白质提取方法, 它能够允许同时将几百个蛋白质在不同的载体和宿主的组合上进行筛选 (Stevensetal.,2001)。在这种多因素平行筛选 (multiparallelscreen) 中鉴定出来的能够正确折叠的表达水平高的最佳组合被放大到毫克级规模来生产,以便获得纯品进行功能和结构分析。这种高通量(high-throughout,HT) 的蛋白质表达和纯化策略加速了能够在微量和大量规模上高效裂解细胞和提取蛋白质的试剂及仪器的发展和优化。 查看更多
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2021-09-18
本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。 查看更多
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2021-09-21
虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选,然而有时这种纯化方式却非必需,或者无法实施进行。在大多数锖况下,运铁蛋白可发生共沉淀或共纯化,能用凝胶滤过层析去除之。 查看更多
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2018-12-26
酶的分离纯化方法简介生物细胞产生的酶有两类:一类由细胞内产生后分泌到细胞外进行作用的酶,称为细胞外酶。这类酶大都是水解酶,如酶法生产葡萄糖所用的两种淀粉酶,就是由枯草杆菌和根酶发酵过程中分泌的。这类酶一般含量较高,容易得到;另一类酶在细胞内产生后并不分泌到细胞外,而在 查看更多
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2018-12-26
Small scale His-Tag fusion protein purification under denaturative conditionsIntroduction High levels of expression of recombinant proteins in a bacterial syst 查看更多
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常见问题
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商品咨询
请问免疫组化如何正确选择和使用二抗123
2021-08-02
ELISA试剂盒的准确度你是怎么判断的?123
ucnwxd2017-10-03
现在皮包公司很多,你没有一定采购经验你是摸不准的,最简单方法就是你多问问身边人,借鉴他人经验
纯化RNA一定要用试剂盒吗,不用试剂盒如何纯化RNA。 分子生物 ...123
wyh_xiaorao2021-08-16
请问如何选择幽门螺杆菌的血清抗体试剂盒_问答详情_蛋白纯化试剂盒...123
hys2021-07-20
一抗、二抗如何保存 123
vvuehon2021-08-06
工作液根据需要稀释在5%奶粉里,再加入少量叠氮化钠(大约0.01% w/v),4度保存。Alisa_lin(站内联系TA)分装,-20度保存。不要反复冻融,没有用过粉末的二抗,按说明书呗石头2011(站内联系TA)液体的一抗没加甘油的话尽量不要放在负二十,因为用的时候反复冻融不好。粉末状的二抗负二十就行了sayaya(站内联系TA)液体的一抗直接放-80度贮藏,可保存5年以上;
液体的一抗加50%甘油,-20度也不会冻结,可保存3-5年;
经常使用时取出一小份,4度可使用半年之久;
粉末状的二抗直接-20或-80度贮藏就行了。
液体的一抗加50%甘油,-20度也不会冻结,可保存3-5年;
经常使用时取出一小份,4度可使用半年之久;
粉末状的二抗直接-20或-80度贮藏就行了。
细胞免疫组化(SABC法)123
gopwfsycre2021-08-11
免疫组化检测小鼠组织抗原表达情况时,采用免疫组化用纯化抗体(小鼠)进行抗原抗体反应,纯化小鼠抗体通常有多个表位,除去和抗原反应的表位外,还可以有一个表位结合羊抗小鼠IgG,在羊抗小鼠IgG上面连上生物素,可以通过SABC法进行生物素显色,根据显色情况来判断抗原的表达水平,属于间接检测法.该方法比较灵敏,但是实验过程条件太多,容易出现假阳性……
双抗夹心法制备Elisa试剂盒时。怎么确定包被用抗体浓度?123
jeryren2017-10-03
抗体纯化 | 抗体纯化试剂盒及方法 | 赛默飞世尔官网 | Thermo...123
magicblue2021-07-23
【求助】新手求教coIP抗体纯化的问题!谢谢! 蛋白质和糖学技术...123
clearor2021-07-31
试剂盒的分类组词网123
阿韶flU66E82017-10-03
主要有: 1.磁珠法核酸提取试剂盒
2.磁珠法提取DNA试剂盒
3.DNA提取试剂盒(离心柱法)
4.磁珠法RNA提取试剂盒
5.RNA提取试剂盒(离心柱法)
6.磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒
7.反转录试剂盒
8.胶回收试剂盒
9.PCR纯化试剂盒
10.病毒核酸提取试剂盒(磁珠法)
11.土壤基因组DNA提取试剂盒
12.法医样本DNA提取试剂盒(磁珠法)等 1.elisa
常见elisa试剂盒有:
特种蛋白检测elisa试剂盒
如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等
肿瘤标志物检测elisa试剂盒:
如肿瘤标志物,组织多肽抗原,肿瘤相关因子,胰腺癌,直肠癌,细胞角蛋白片段,胃肠癌,铁蛋白,糖链抗原,神经特异性稀醇化酶,上皮膜抗原,乳腺癌,人抗小鼠抗体,前列腺,甲胎蛋白,肝癌,甲基苯丙胺,大肠癌,肺癌,大小便隐血检测,癌胚抗原,β-2微球蛋白等等。
食品安全检验elisa试剂盒:
食品中的激素、药物、霉菌毒素、过敏原残留、转基因产品的检测试剂盒,以及微生物、维生素等的检测产品。
植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒
动植物疾病诊断类如猪、牛、羊、马等家畜和禽类以及宠物类检测试剂盒
传染病检测elisa试剂盒
如幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族链球菌等等。
2.免疫共沉淀试剂盒
3.化学发光试剂盒
4.免疫组化试剂盒
5.放射免疫试剂盒
6.免疫荧光试剂盒 1.细胞凋亡试剂盒
2.葡萄糖检测试剂盒
3.支原体检测试剂盒
四、试剂盒使用示例
试剂盒的产生正是为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配制及优化过程,所以试剂盒中一般配备有相应的使用说明书,用户按照说明书不需或只需少量的优化即可得到满意的结果。
⑴试剂盒使用说明书
说明书一般包括公司标志及名称、试剂盒名称、试剂盒组成、保质期、使用领域、使用方法等项目
说明书格式如右图所示:
①一般在页眉页脚处为公司的名称及标志;
②接下来为试剂盒的名称;
③试剂盒组成中应为试剂盒中的所有内容,为了简洁明了,一般以表格的形式表现;
④操作步骤是试剂盒说明书中最重要的部分,内容应准确、简洁、易懂,不能包含带有歧义的句子,更不能含糊其辞,排版上操作步骤应将复杂的步骤拆解,使人一目了然。可以说操作步骤为试剂盒的灵魂。 试剂盒内容(以离心柱型为例):
一般包括:裂解液RL
去蛋白液RW1
漂洗液RW
RNase free ddH2O
吸附柱(RNase free)
过滤柱(RNase free)
缓冲液
离心管(RNase free)
收集管(RNase free)
此外,还配有一份试剂盒使用说明书,根据不同的生产商,可能还配有不同的试剂,如:DNA酶、溶菌酶等。
使用时一定要根据自己的实验需要购买专用提取试剂盒, 如果不是专用试剂盒,或许能提出RNA,但不能确保其质量以及完整性,会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析、分子克隆等后续实验的结果。
当前提取效果好的是QIANGEN公司生产的RNA提取试剂盒,但其售价较高,单次实验费用花费太大,对精度要求不高的实验没有必要购买,当然还有其它的进口试剂盒,但是均存在价格高、订货周期长的问题(如果碰上国内无货的时候,要从国外发货,会等很长一段时间)。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以,价格不高,基本上各地均有现货,如天根(目前国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种)等,其价格比进口试剂盒要便宜许多,且效果还不错,性价比还可以。
当然,就RNA的提取而言,不一定试剂盒的提取效果就非常好,其实采用一些经典的RNA提取方法,效果也很不错,如:TRIZOL、EDTA等,只是试剂盒使用方便,经典的方法操作复杂一些。向左转|向右转
2.磁珠法提取DNA试剂盒
3.DNA提取试剂盒(离心柱法)
4.磁珠法RNA提取试剂盒
5.RNA提取试剂盒(离心柱法)
6.磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒
7.反转录试剂盒
8.胶回收试剂盒
9.PCR纯化试剂盒
10.病毒核酸提取试剂盒(磁珠法)
11.土壤基因组DNA提取试剂盒
12.法医样本DNA提取试剂盒(磁珠法)等 1.elisa
常见elisa试剂盒有:
特种蛋白检测elisa试剂盒
如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等
肿瘤标志物检测elisa试剂盒:
如肿瘤标志物,组织多肽抗原,肿瘤相关因子,胰腺癌,直肠癌,细胞角蛋白片段,胃肠癌,铁蛋白,糖链抗原,神经特异性稀醇化酶,上皮膜抗原,乳腺癌,人抗小鼠抗体,前列腺,甲胎蛋白,肝癌,甲基苯丙胺,大肠癌,肺癌,大小便隐血检测,癌胚抗原,β-2微球蛋白等等。
食品安全检验elisa试剂盒:
食品中的激素、药物、霉菌毒素、过敏原残留、转基因产品的检测试剂盒,以及微生物、维生素等的检测产品。
植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒
动植物疾病诊断类如猪、牛、羊、马等家畜和禽类以及宠物类检测试剂盒
传染病检测elisa试剂盒
如幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族链球菌等等。
2.免疫共沉淀试剂盒
3.化学发光试剂盒
4.免疫组化试剂盒
5.放射免疫试剂盒
6.免疫荧光试剂盒 1.细胞凋亡试剂盒
2.葡萄糖检测试剂盒
3.支原体检测试剂盒
四、试剂盒使用示例
试剂盒的产生正是为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配制及优化过程,所以试剂盒中一般配备有相应的使用说明书,用户按照说明书不需或只需少量的优化即可得到满意的结果。
⑴试剂盒使用说明书
说明书一般包括公司标志及名称、试剂盒名称、试剂盒组成、保质期、使用领域、使用方法等项目
说明书格式如右图所示:
①一般在页眉页脚处为公司的名称及标志;
②接下来为试剂盒的名称;
③试剂盒组成中应为试剂盒中的所有内容,为了简洁明了,一般以表格的形式表现;
④操作步骤是试剂盒说明书中最重要的部分,内容应准确、简洁、易懂,不能包含带有歧义的句子,更不能含糊其辞,排版上操作步骤应将复杂的步骤拆解,使人一目了然。可以说操作步骤为试剂盒的灵魂。 试剂盒内容(以离心柱型为例):
一般包括:裂解液RL
去蛋白液RW1
漂洗液RW
RNase free ddH2O
吸附柱(RNase free)
过滤柱(RNase free)
缓冲液
离心管(RNase free)
收集管(RNase free)
此外,还配有一份试剂盒使用说明书,根据不同的生产商,可能还配有不同的试剂,如:DNA酶、溶菌酶等。
使用时一定要根据自己的实验需要购买专用提取试剂盒, 如果不是专用试剂盒,或许能提出RNA,但不能确保其质量以及完整性,会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析、分子克隆等后续实验的结果。
当前提取效果好的是QIANGEN公司生产的RNA提取试剂盒,但其售价较高,单次实验费用花费太大,对精度要求不高的实验没有必要购买,当然还有其它的进口试剂盒,但是均存在价格高、订货周期长的问题(如果碰上国内无货的时候,要从国外发货,会等很长一段时间)。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以,价格不高,基本上各地均有现货,如天根(目前国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种)等,其价格比进口试剂盒要便宜许多,且效果还不错,性价比还可以。
当然,就RNA的提取而言,不一定试剂盒的提取效果就非常好,其实采用一些经典的RNA提取方法,效果也很不错,如:TRIZOL、EDTA等,只是试剂盒使用方便,经典的方法操作复杂一些。向左转|向右转
...双抗体夹心法的一抗和二抗可以来源于同一种属么? 免疫学讨论版...123
2017-10-03
不是。二抗是指抗一抗的抗体,也就是抗体的抗体,一般因放大信号和特异性范围大易获得和制备应用广泛。
双抗无论是在免疫学还是细胞操作,细胞培养中都不与二抗等同。双抗可以是抗一种抗原的两个抗体,去双抗夹心法。也可以是抗不同类型反应的作用物,如抗凝剂素。一般指两种抗生素。
双抗无论是在免疫学还是细胞操作,细胞培养中都不与二抗等同。双抗可以是抗一种抗原的两个抗体,去双抗夹心法。也可以是抗不同类型反应的作用物,如抗凝剂素。一般指两种抗生素。
哪个公司企业的ELISA试剂盒好,性价比高,服务好?如何选择elisa试剂盒...123
2021-07-25


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