An antipeptide antibody was generated in chickens against a sequence shared between the mouse (P60202) and human (NP_000524) gene products. Antibodies were affinity-purified and the concentration adjusted to 100 µg/mL. These antibodies have been validated with human, mouse and rat tissues.
Volume: 1000 µL
Concentration: 100 µg/mL
Clonality: Polyclonal
Host Species: Chicken
Species Reactivity:Human, Mouse, Rat
Applications: ICC, IHC
Protein Name / Synonyms: Myelin proteolipid protein (PLP) (Lipophilin)
Target Description: Human Proteolipid Protein (PLP, or lipophilin) is a 29,946 dalton protein (277 amino acids) found in myelin of the CNS and PNS. Expressed by oligodendrocytes and Schwann cells, PLP stabilizes myelin by preventing lipid bilayer fusion, and aids in its compaction. Different mutations of the human PLP gene product result in two neurological disorders: Pelizaeus-Merzbacher Disease and Spastic Paraplegia Type 2.
Gene ID: PLP1 PLP
Antibody Registry ID (RRID): AB_2313560
Physical State: Liquid
Production Notes: Chickens were immunized with a synthetic peptide / keyhole limpet hemocyanin (KLH) conjugate. The sequence of the synthetic peptide was shared between the human and mouse gene products. After repeated injections into the hens, immune eggs were collected, and the IgY fractions were purified from the yolks. These IgY fractions were then affinity-purified using a peptide column, the concentration of the eluate adjusted to 100 µg/mL, and the preparation was filter sterilized.
Validation and Application Notes
Molecular Weight: 30 kDa
Western Blot Dilution Range: 1:2000-1:5000
IHC Dilution Range: 1:2000-1:5000
Quality Control
Each of the three antibodies were analyzed by immunohistochemistry (at a dilution of 1:2000) using fluorescein-labeled goat anti-chicken IgY (1:500 dilution, Aves Labs Cat.# F-1005) as the secondary reagent.
Storage
Store at 4°C in the dark. Under these conditions, the antibodies should have a shelf life of at least 12 months (provided they remain sterile). Do not freeze these antibodies unless you want to store them for longer periods of time. Note, however, that each time an antibody preparation is frozen, about half of its binding activity is lost.
NOTE
Aves Labs products are intended for use as research laboratory reagents. They are not intended for use as diagnostic or therapeutic reagents in humans.
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AvesLabs是一家成立于上世纪九十年代,专注于高亲和性鸡源抗体的研发和准备,生物医药和生命科学行业全球*的鸡多克隆抗体(IgY)及定制抗体/多肽/免疫试剂的专业公司。AvesLabs在鸡源神经系统标志蛋白/抗体研究领域拥有独特优势,不仅品种多样,质量优良,而且适用于人/大小鼠等多个物种的神经系统研究,包括神经元/胶质细胞/雪旺细胞的各亚细胞结构免疫双标/免疫共沉淀研究。公司独有的技术及优质抗体产品有助于全球科研人员更为便捷的解决学术研究及应用研发课题。除了丰富的产品线外,AvesLabs还为客户提供优质的抗体定制服务,您只需要提供需要研究的重组蛋白或合成多肽,我们即可为您生产优质的鸡源多克隆抗体。
神经元标志蛋白抗体该系列产品主要用于神经元细胞的各亚细胞结构研究,可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标,反应性包括人、小鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下,部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗APP3/APP345/APP4/APP5/ABN/TUJ/CAT/DCX/ER1/ER2/ER3/ER5/GAD/GAP43/MAP/NET/NUN/NSE/NFH/NFL/NFM/PER/PRN/PAP/STG/TAU/TYH的抗体。除单独的抗体提供,我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒,以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
胶质细胞及雪旺细胞标志蛋白抗体该系列产品主要用于胶质细胞及雪旺细胞的各亚细胞结构的研究,可与可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标,反应性包括人、大鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下,部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗COR/GFAP/MAC/MBP/NES/PZO/PLP/VIM抗体。同样,除单独的抗体提供,我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒,以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
二抗该系列产品特点在于鸡IgY分子与哺乳动物IgG分子截然不同,因此由之制备的二抗不与来源于兔、小鼠或其他哺乳动物的一抗产生交叉反应,特别适用于组织学的免疫双标检测。该系列源于羊的二抗可交联荧光基团/HRP/生物素/琼脂糖,可广泛用于WB,免疫组化/免疫细胞化学及免疫共沉淀研究。
mmunoprecipitationReagents(IP)该系列产品中 HA-PrecipHen® 由鸡anti-HAepitopetag抗体共价结合到琼脂糖粒而成,适用于利用HAepitope-tagged蛋白的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。而IgY-PrecipHen®由羊抗鸡的IgY抗体共价结合到琼脂糖粒上而成,适用于鸡源抗体与目标蛋白之间的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。
对高度保守的哺乳动物基因产物有更高的描述由于鸡与哺乳动物的距离至少有1亿年之久,它们倾向于将哺乳动物的任何基因产物视为外来物,并产生强烈的免疫反应。简单双疣状鸡IgYs可以与小鼠和兔抗体一起使用,没有交叉反应的危险。针对鸡igy的二级抗体不会与哺乳动物igg发生交叉反应。友好型我们从鸡蛋中纯化抗体,而不是血清。与此相反,在兔实验中,通过抑制动物,进行耳出血或心脏穿刺来获得血清。这只是一种更人道的产生抗体的方法。成本效益和更持久的我们的鸡用抗体是>90%IgY,在4度完美呈现5年以上保质期。相比之下,多数公司提供的rabbitserum(兔乳)在4˚C (完美呈现)(以周至月为单位)的货架期非常有限,而且一旦冷冻,一些生物活性会丧失。将兔抗体纯化至相应纯度的成本。蛋白质a纯化)是非常昂贵的。几乎无限量我们从每只母鸡那里收集了大约18个“免疫鸡蛋”,但是只使用了6个“免疫鸡蛋”来准备你的IgY准备。然后我们把剩下的12个“免疫鸡蛋”储存在冰箱里,以备将来你需要更多的抗体。此外,我们可以继续为母鸡提供住宿(另收费),以备您需要我们进行额外的注射。鸡IgY的茎部没有“Fc结构域”这提供了几个优势比兔igg:它减少了在诊断应用中出现假阳性的可能性,因为是哺乳动物的Fc域结合“类风湿因子”或其他自然产生的抗Fc抗体。不激活哺乳动物补体系统,允许鸡IgYs在体内应用。不与哺乳动物Fc受体结合,避免与表达此类受体的细胞(如巨噬细胞和树突状细胞)发生非特异性结合。
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(一)包被用抗原
用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等,须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取,一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取,蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中提取等(例如AFP从脐带血或胎肝中提取)。重组抗原是抗原基因在质粒体中表达的蛋白质抗原,多以大肠杆菌或酵母菌为质粒体。重组抗原的优点是除工程菌成份外,其他杂质少,而且无传染性,但纯化技术难度较大。以大肠杆菌为质粒体的重组抗原如不能充分除大肠杆菌成份,用于ELISA试剂盒,在反应中可出现假阳性,因不少受检者受大肠杆菌感染而在血清中存在抗大肠杆菌抗体。重组抗原的另一特点是能用基因工程制备某些无法从天然材料中分离的抗原物质。例如丙型肝炎病毒(HCV)尚不能培养成功,而且丙肝病人血清中HCV抗原含量极微。目前检测抗HCVELISA中所用包被抗原大多为根据HCV的基因克隆表达而制备的重组抗原。在传染病诊断中,不少重组抗原如HBsAg、HBeAg和HIV抗原等均在ELISA中取得应用。合成多肽抗原是根据蛋白质抗原分子的某一抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。多肽抗原一般只含有一个抗原决定簇,纯度高,特异性也高,但由于分子量太小,往往难于直接吸附于固相上。多肽抗原的包被一般需先使其与无关蛋白质如牛血清白蛋白质(BSA)等偶联,借助于偶联物与固相载体的吸附,间接地结合到固相载体表面。应用多肽抗原的另一注意点为他仅能检测与其相应的抗体。一种蛋白质抗原往往含有多个不同的能引起抗体产生的决定簇,因此在受检血清中的其他抗体就不能与该多肽抗原发生反应。另外,某些微生物发生变异时往往发生抗原结构变化,在这种情况下,用个别多肽抗原进行包被可引起其他抗体的漏检。
(二)ELISA试剂盒包被用抗体
包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性,可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液。如免疫用抗原中含有杂质(即便是极微量的),在抗血清中将出现杂抗体,必须除去(可用吸收法)后才能用于ELISA,以保证试验的特异性。抗血清不能直接用于包被,应先提取IgG,通常采用硫酸铵盐析和Sephadex凝胶过滤法。一般经硫酸铵盐析粗提的IgG已可用于包被,高度纯化的IgG性质不稳定。如需用高亲和力的抗体包被以提高试验的敏感性,则可采用亲和层析法以除去抗血清中含量较多的非特异性IgG。腹水中单抗的浓度较高,特异性亦较强,因此不需要作吸收和亲和层析处理,一般可将腹水作适当稀释后直接包被,必要时也可用纯化的IgG。应用单抗包被时应注意,一种单抗仅针对一种抗原决定簇,在某些情况下,用多种单抗混合包被,可取得更好的效果。展开
用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等,须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取,一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取,蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中提取等(例如AFP从脐带血或胎肝中提取)。重组抗原是抗原基因在质粒体中表达的蛋白质抗原,多以大肠杆菌或酵母菌为质粒体。重组抗原的优点是除工程菌成份外,其他杂质少,而且无传染性,但纯化技术难度较大。以大肠杆菌为质粒体的重组抗原如不能充分除大肠杆菌成份,用于ELISA试剂盒,在反应中可出现假阳性,因不少受检者受大肠杆菌感染而在血清中存在抗大肠杆菌抗体。重组抗原的另一特点是能用基因工程制备某些无法从天然材料中分离的抗原物质。例如丙型肝炎病毒(HCV)尚不能培养成功,而且丙肝病人血清中HCV抗原含量极微。目前检测抗HCVELISA中所用包被抗原大多为根据HCV的基因克隆表达而制备的重组抗原。在传染病诊断中,不少重组抗原如HBsAg、HBeAg和HIV抗原等均在ELISA中取得应用。合成多肽抗原是根据蛋白质抗原分子的某一抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。多肽抗原一般只含有一个抗原决定簇,纯度高,特异性也高,但由于分子量太小,往往难于直接吸附于固相上。多肽抗原的包被一般需先使其与无关蛋白质如牛血清白蛋白质(BSA)等偶联,借助于偶联物与固相载体的吸附,间接地结合到固相载体表面。应用多肽抗原的另一注意点为他仅能检测与其相应的抗体。一种蛋白质抗原往往含有多个不同的能引起抗体产生的决定簇,因此在受检血清中的其他抗体就不能与该多肽抗原发生反应。另外,某些微生物发生变异时往往发生抗原结构变化,在这种情况下,用个别多肽抗原进行包被可引起其他抗体的漏检。 (二)ELISA试剂盒包被用抗体 包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性,可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液。如免疫用抗原中含有杂质(即便是极微量的),在抗血清中将出现杂抗体,必须除去(可用吸收法)后才能用于ELISA,以保证试验的特异性。抗血清不能直接用于包被,应先提取IgG,通常采用硫酸铵盐析和Sephadex凝胶过滤法。一般经硫酸铵盐析粗提的IgG已可用于包被,高度纯化的IgG性质不稳定。如需用高亲和力的抗体包被以提高试验的敏感性,则可采用亲和层析法以除去抗血清中含量较多的非特异性IgG。腹水中单抗的浓度较高,特异性亦较强,因此不需要作吸收和亲和层析处理,一般可将腹水作适当稀释后直接包被,必要时也可用纯化的IgG。应用单抗包被时应注意,一种单抗仅针对一种抗原决定簇,在某些情况下,用多种单抗混合包被,可取得更好的效果。
液体的一抗加50%甘油,-20度也不会冻结,可保存3-5年;
经常使用时取出一小份,4度可使用半年之久;
粉末状的二抗直接-20或-80度贮藏就行了。
我的实验是这样的,先纯化质粒,然后做酶切,再纯化DNA。
最后一步其实也可以用切胶回收试剂盒,我怕做不好,所以想选用DNA纯化试剂盒,但不知跟质粒DNA提取试剂盒是否有区别,因为说明书上说可以用Invitrogen的K210001.我搜索看了一席啊,觉得那个是提取质粒的小提啊。所以产生这个疑问,请大侠告知DNA纯化试剂盒与质粒DNA提取试剂盒这两者之间有区别吗?
用哪个公司的DNA纯化试剂盒比较好。谢谢啦!
2.磁珠法提取DNA试剂盒
3.DNA提取试剂盒(离心柱法)
4.磁珠法RNA提取试剂盒
5.RNA提取试剂盒(离心柱法)
6.磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒
7.反转录试剂盒
8.胶回收试剂盒
9.PCR纯化试剂盒
10.病毒核酸提取试剂盒(磁珠法)
11.土壤基因组DNA提取试剂盒
12.法医样本DNA提取试剂盒(磁珠法)等 1.elisa
常见elisa试剂盒有:
特种蛋白检测elisa试剂盒
如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等
肿瘤标志物检测elisa试剂盒:
如肿瘤标志物,组织多肽抗原,肿瘤相关因子,胰腺癌,直肠癌,细胞角蛋白片段,胃肠癌,铁蛋白,糖链抗原,神经特异性稀醇化酶,上皮膜抗原,乳腺癌,人抗小鼠抗体,前列腺,甲胎蛋白,肝癌,甲基苯丙胺,大肠癌,肺癌,大小便隐血检测,癌胚抗原,β-2微球蛋白等等。
食品安全检验elisa试剂盒:
食品中的激素、药物、霉菌毒素、过敏原残留、转基因产品的检测试剂盒,以及微生物、维生素等的检测产品。
植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒
动植物疾病诊断类如猪、牛、羊、马等家畜和禽类以及宠物类检测试剂盒
传染病检测elisa试剂盒
如幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族链球菌等等。
2.免疫共沉淀试剂盒
3.化学发光试剂盒
4.免疫组化试剂盒
5.放射免疫试剂盒
6.免疫荧光试剂盒 1.细胞凋亡试剂盒
2.葡萄糖检测试剂盒
3.支原体检测试剂盒
四、试剂盒使用示例
试剂盒的产生正是为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配制及优化过程,所以试剂盒中一般配备有相应的使用说明书,用户按照说明书不需或只需少量的优化即可得到满意的结果。
⑴试剂盒使用说明书
说明书一般包括公司标志及名称、试剂盒名称、试剂盒组成、保质期、使用领域、使用方法等项目
说明书格式如右图所示:
①一般在页眉页脚处为公司的名称及标志;
②接下来为试剂盒的名称;
③试剂盒组成中应为试剂盒中的所有内容,为了简洁明了,一般以表格的形式表现;
④操作步骤是试剂盒说明书中最重要的部分,内容应准确、简洁、易懂,不能包含带有歧义的句子,更不能含糊其辞,排版上操作步骤应将复杂的步骤拆解,使人一目了然。可以说操作步骤为试剂盒的灵魂。 试剂盒内容(以离心柱型为例):
一般包括:裂解液RL
去蛋白液RW1
漂洗液RW
RNase free ddH2O
吸附柱(RNase free)
过滤柱(RNase free)
缓冲液
离心管(RNase free)
收集管(RNase free)
此外,还配有一份试剂盒使用说明书,根据不同的生产商,可能还配有不同的试剂,如:DNA酶、溶菌酶等。
使用时一定要根据自己的实验需要购买专用提取试剂盒, 如果不是专用试剂盒,或许能提出RNA,但不能确保其质量以及完整性,会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析、分子克隆等后续实验的结果。
当前提取效果好的是QIANGEN公司生产的RNA提取试剂盒,但其售价较高,单次实验费用花费太大,对精度要求不高的实验没有必要购买,当然还有其它的进口试剂盒,但是均存在价格高、订货周期长的问题(如果碰上国内无货的时候,要从国外发货,会等很长一段时间)。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以,价格不高,基本上各地均有现货,如天根(目前国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种)等,其价格比进口试剂盒要便宜许多,且效果还不错,性价比还可以。
当然,就RNA的提取而言,不一定试剂盒的提取效果就非常好,其实采用一些经典的RNA提取方法,效果也很不错,如:TRIZOL、EDTA等,只是试剂盒使用方便,经典的方法操作复杂一些。向左转|向右转
双抗无论是在免疫学还是细胞操作,细胞培养中都不与二抗等同。双抗可以是抗一种抗原的两个抗体,去双抗夹心法。也可以是抗不同类型反应的作用物,如抗凝剂素。一般指两种抗生素。

