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- The Protein MultiColor Marker consists of nine prestained proteins. Each of them are stained red, blue, purple, green or orange, ranging in apparent molecular weight from approximately 8 kDa to 230 kDa. Protein MultiColor Marker is suitable for visualizing proteins during electrophoresis without staining and for monitoring electrophoretic transfer onto membranes. The protein concentrations are optimized to give uniform band intensities.
- Form:
- Liquid
- Quality Control Testing:
- Electrophoresis profile of Protein MultiColor Marker (10 uL) on 6% polyacrylamide (5% C) gel / AllView SDS-PAGE Buffer (Cat # TM0011) as running buffer.
- Recommend Usage:
- Electrophoresis (5 -10 uL/lane).
- Storage Buffer:
- In Tris-HCl, EDTA, glycerol, SDS, pH 6.8.
- Storage Instruction:
- Store at 4°C. Do not freeze.
- Note:
- Protein MultiColor Marker is supplied in gel loading buffer for direct loading onto SDS-PAGE without heating or adding reducing agents.
- Protocol:
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- Electrophoresis
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2018-12-26
This specfic protocol is the latest incarnation of peptide mapping procedures that have been developed here in the TVL/MBVL of the Salk Institute over the last 查看更多
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2021-08-05
抗体作为生物学上的一个有用工具已经超过一个世纪。 1 9 世 纪 7 0 年 代 ， Emil vonBehring 和 Shibasaburo Kitasato⑴最先阐述了免疫球蛋白，从那时起，抗体在研究和商业应用方面的使用取得了前所未有的进展。抗体最初是作为治疗病毒性疾病的天然抗血清来使用的。现今，高度工程化的治疗性抗体已被用于治疗多种危及生命的疾病。这一章将介绍纯化抗体的几种方法，尤其是单克隆抗体的纯化，纯化后的单克隆抗体具有多种用途。本章还将介绍抗体纯化前后的鉴定学方法。本章中，我们实验室产生的数 查看更多
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2018-12-26
HP-RPC的选择首先要看蛋白质的分子量，20kDa左右的一般用C4或C8，再小一点的可以用C18，太大的蛋白并不适于反相分离。C18通用性最好，但是有时候保留过强可能会导致收率较低。如果目的蛋白不是很针对，可以考虑通用性最强的C18柱。一般来说，4.6mm的内径比较常见，250mm长的柱子比150mm的柱子分离度要 查看更多
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2021-09-22
虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选，然而有时这种纯化方式却非必需，或者无法实施进行。在大多数锖况下，运铁蛋白可发生共沉淀或共纯化，能用凝胶滤过层析去除之。 查看更多
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2021-09-03
从果蝇胚胎中纯化核心组蛋白实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。<link rel="stylesheet" type="text/css" href="/ueditor/themes/... 查看更多
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膜蛋白在生物进程中具有关键性的作用。它们参与细胞与细胞之间、细胞与细胞基质 之 间 的 相 互 联 系 胞 器 及 细 胞 的 形 成 过 程 ，各种离子、代谢产物和蛋白质的跨质膜运辅 i，R N A 的跨核膜运输等。鉴于膜蛋白在多种细胞功能中的重要性，目前针对各种疾病的药物约有 5 0 % 都以其为靶点。作者： 伯吉斯等,主译：陈薇，本实验来自「蛋白质纯化指南」 查看更多
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2021-09-06
重组的果蝇 ACF 的表达和纯化实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。<link rel="stylesheet" type="text/css" href="/ueditor/them... 查看更多
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2018-12-26
Bacterial Protein Extraction (mini-scale) Using B-Per B-Per (Pierce, Cat number: 78248) Extraction of 1.5ml bact.culture OD600nm 1.5-3.5A useful procedure for 查看更多
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2021-08-08
抗体作为生物学上的一个有用工具已经超过一个世纪。 1 9 世 纪 7 0 年 代 ， Emil vonBehring 和 Shibasaburo Kitasato⑴最先阐述了免疫球蛋白，从那时起，抗体在研究和商业应用方面的使用取得了前所未有的进展。抗体最初是作为治疗病毒性疾病的天然抗血清来使用的。现今，高度工程化的治疗性抗体已被用于治疗多种危及生命的疾病。这一章将介绍纯化抗体的几种方法，尤其是单克隆抗体的纯化，纯化后的单克隆抗体具有多种用途。本章还将介绍抗体纯化前后的鉴定学方法。本章中，我们实验室产生的数 查看更多
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2021-07-24
下述流程曾用于溶解凝乳酶原包涵体，是对Marston等（1984)所用方法的改进。关于溶解蛋白的再折叠参见本方案的附加方案。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔。 查看更多
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2018-12-26
Materials: Overlay/Rehydration buffer:125 mM Tris-HCl, pH 6.8 1mM EDTA 0.1% SDS 1mM 2-b-mercaptoethanol30% glycerolsome Bromophenol blueFor 1 ml, you will need 查看更多
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2021-08-17
在大多数情况下，免疫血清、杂交瘤细胞培养上清以及腹水中的抗体需经纯化后再用于各种免疫学检测中去。免疫球蛋白常用的纯化方法有盐析法、凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析以及高效液相色谱等方法。（来源：医学基础免疫学实验指导，主编金伯泉李恩善，第1 版，北京：世界图书出版社，1990） 查看更多
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【求助】新手求教coIP抗体纯化的问题!谢谢! 蛋白质和糖学技术...123
clearor2021-07-31
抗体纯化方法介绍 实验方法123
echoloving3182021-07-26
想通过亲和层析来纯化抗血小板特异性抗体（抗GPIIb/IIIa抗体和抗GPIbα抗体），能否做到呢？谢谢！
Westernblot一抗和二抗的选择 123
言小郝2021-08-12
我的二抗加显影液在机器里曝光10s的结果，这是不是说明右边这个效价不高了啊
【二抗】二抗是什么_孵育时间_稀释液_标记_稀..._英文,elisa二抗西域123
『帀』2017-10-03
顺手采纳答案
一抗的英语是 resistance No.1，二抗resistance No.2.
一抗的英语是 resistance No.1，二抗resistance No.2.
免疫层析怎样提高包被抗体的稳定性123
血色蔷薇TA7822017-10-03
elisa抗原包被和抗体包被的区别
（一）包被用抗原
用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等，须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取，一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取，蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中提取等（例如AFP从脐带血或胎肝中提取）。重组抗原是抗原基因在质粒体中表达的蛋白质抗原，多以大肠杆菌或酵母菌为质粒体。重组抗原的优点是除工程菌成份外，其他杂质少，而且无传染性，但纯化技术难度较大。以大肠杆菌为质粒体的重组抗原如不能充分除大肠杆菌成份，用于ELISA试剂盒，在反应中可出现假阳性，因不少受检者受大肠杆菌感染而在血清中存在抗大肠杆菌抗体。重组抗原的另一特点是能用基因工程制备某些无法从天然材料中分离的抗原物质。例如丙型肝炎病毒（HCV）尚不能培养成功，而且丙肝病人血清中HCV抗原含量极微。目前检测抗HCVELISA中所用包被抗原大多为根据HCV的基因克隆表达而制备的重组抗原。在传染病诊断中，不少重组抗原如HBsAg、HBeAg和HIV抗原等均在ELISA中取得应用。合成多肽抗原是根据蛋白质抗原分子的某一抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。多肽抗原一般只含有一个抗原决定簇，纯度高，特异性也高，但由于分子量太小，往往难于直接吸附于固相上。多肽抗原的包被一般需先使其与无关蛋白质如牛血清白蛋白质（BSA）等偶联，借助于偶联物与固相载体的吸附，间接地结合到固相载体表面。应用多肽抗原的另一注意点为他仅能检测与其相应的抗体。一种蛋白质抗原往往含有多个不同的能引起抗体产生的决定簇，因此在受检血清中的其他抗体就不能与该多肽抗原发生反应。另外，某些微生物发生变异时往往发生抗原结构变化，在这种情况下，用个别多肽抗原进行包被可引起其他抗体的漏检。
（二）ELISA试剂盒包被用抗体
包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性，可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液。如免疫用抗原中含有杂质（即便是极微量的），在抗血清中将出现杂抗体，必须除去（可用吸收法）后才能用于ELISA，以保证试验的特异性。抗血清不能直接用于包被，应先提取IgG，通常采用硫酸铵盐析和Sephadex凝胶过滤法。一般经硫酸铵盐析粗提的IgG已可用于包被，高度纯化的IgG性质不稳定。如需用高亲和力的抗体包被以提高试验的敏感性，则可采用亲和层析法以除去抗血清中含量较多的非特异性IgG。腹水中单抗的浓度较高，特异性亦较强，因此不需要作吸收和亲和层析处理，一般可将腹水作适当稀释后直接包被，必要时也可用纯化的IgG。应用单抗包被时应注意，一种单抗仅针对一种抗原决定簇，在某些情况下，用多种单抗混合包被，可取得更好的效果。展开
（一）包被用抗原
用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等，须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取，一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取，蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中提取等（例如AFP从脐带血或胎肝中提取）。重组抗原是抗原基因在质粒体中表达的蛋白质抗原，多以大肠杆菌或酵母菌为质粒体。重组抗原的优点是除工程菌成份外，其他杂质少，而且无传染性，但纯化技术难度较大。以大肠杆菌为质粒体的重组抗原如不能充分除大肠杆菌成份，用于ELISA试剂盒，在反应中可出现假阳性，因不少受检者受大肠杆菌感染而在血清中存在抗大肠杆菌抗体。重组抗原的另一特点是能用基因工程制备某些无法从天然材料中分离的抗原物质。例如丙型肝炎病毒（HCV）尚不能培养成功，而且丙肝病人血清中HCV抗原含量极微。目前检测抗HCVELISA中所用包被抗原大多为根据HCV的基因克隆表达而制备的重组抗原。在传染病诊断中，不少重组抗原如HBsAg、HBeAg和HIV抗原等均在ELISA中取得应用。合成多肽抗原是根据蛋白质抗原分子的某一抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。多肽抗原一般只含有一个抗原决定簇，纯度高，特异性也高，但由于分子量太小，往往难于直接吸附于固相上。多肽抗原的包被一般需先使其与无关蛋白质如牛血清白蛋白质（BSA）等偶联，借助于偶联物与固相载体的吸附，间接地结合到固相载体表面。应用多肽抗原的另一注意点为他仅能检测与其相应的抗体。一种蛋白质抗原往往含有多个不同的能引起抗体产生的决定簇，因此在受检血清中的其他抗体就不能与该多肽抗原发生反应。另外，某些微生物发生变异时往往发生抗原结构变化，在这种情况下，用个别多肽抗原进行包被可引起其他抗体的漏检。
（二）ELISA试剂盒包被用抗体
包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性，可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液。如免疫用抗原中含有杂质（即便是极微量的），在抗血清中将出现杂抗体，必须除去（可用吸收法）后才能用于ELISA，以保证试验的特异性。抗血清不能直接用于包被，应先提取IgG，通常采用硫酸铵盐析和Sephadex凝胶过滤法。一般经硫酸铵盐析粗提的IgG已可用于包被，高度纯化的IgG性质不稳定。如需用高亲和力的抗体包被以提高试验的敏感性，则可采用亲和层析法以除去抗血清中含量较多的非特异性IgG。腹水中单抗的浓度较高，特异性亦较强，因此不需要作吸收和亲和层析处理，一般可将腹水作适当稀释后直接包被，必要时也可用纯化的IgG。应用单抗包被时应注意，一种单抗仅针对一种抗原决定簇，在某些情况下，用多种单抗混合包被，可取得更好的效果。展开
国内ELISA试剂盒哪个品牌好?123
★鲁鲁修★H9d2017-10-03
ELISA试剂盒很多牌子都不错，关键看灵敏度、实验效果、技术支持以及实验经费来决定
请问如何选择幽门螺杆菌的血清抗体试剂盒_问答详情_蛋白纯化试剂盒...123
hys2021-07-20
求助:IgM纯化问题 蛋白质和糖学技术讨论版论坛123
你大爷FaKv2021-07-21
IgM代表的是近期感染病毒或者病原体的一个指标，表明在两周左右的时间内感染了病原体，所以检测IgM可以准确判断是否是新发感染病原体。2、开发何种形式的诊断用试剂盒，你说的方法都是ELISA方法，该方法中包括了检测抗体或者检测抗原等技术方法。具体如何来决定，还看你想从哪方面是想检测抗原还是想检测抗体，还有就是技术路线是否可行，包括单抗制备，抗原表达及纯化等等，可能也应该考虑成本等因素，只有综合考虑上述因素，才能确定用那种方法来研制诊断用试剂盒。
补充一点的是有些病毒在人群中的感染是很普遍的,比如HCMV.对于这些病毒IgM的检测结果可以推测是否为近期感染.但这一类病毒其检测的临床意义经常是当其再激活感染时.比如:HCMV感染后就在末梢单个核细胞中潜伏起来,对于正常人而言是不致病的,但当出现HIV感染或应用免疫抑制剂时会出现激活感染而且经常导致严重疾患.对于这种再激活感染虽然也有IgM的升高,但是却在现在ELISA技术的检测限以下,因此是检测不到的,这时就必须进行针对其抗原的检测。
补充一点的是有些病毒在人群中的感染是很普遍的,比如HCMV.对于这些病毒IgM的检测结果可以推测是否为近期感染.但这一类病毒其检测的临床意义经常是当其再激活感染时.比如:HCMV感染后就在末梢单个核细胞中潜伏起来,对于正常人而言是不致病的,但当出现HIV感染或应用免疫抑制剂时会出现激活感染而且经常导致严重疾患.对于这种再激活感染虽然也有IgM的升高,但是却在现在ELISA技术的检测限以下,因此是检测不到的,这时就必须进行针对其抗原的检测。
请问免疫组化如何正确选择和使用二抗123
2021-08-02
...双抗体夹心法的一抗和二抗可以来源于同一种属么? 免疫学讨论版...123
2017-10-03
不是。二抗是指抗一抗的抗体，也就是抗体的抗体，一般因放大信号和特异性范围大易获得和制备应用广泛。
双抗无论是在免疫学还是细胞操作，细胞培养中都不与二抗等同。双抗可以是抗一种抗原的两个抗体，去双抗夹心法。也可以是抗不同类型反应的作用物，如抗凝剂素。一般指两种抗生素。
双抗无论是在免疫学还是细胞操作，细胞培养中都不与二抗等同。双抗可以是抗一种抗原的两个抗体，去双抗夹心法。也可以是抗不同类型反应的作用物，如抗凝剂素。一般指两种抗生素。
质粒DNA提取和纯化试剂盒/质粒DNA提取和纯化试剂盒/质粒DNA...123
炎汐30082021-08-03
DNA纯化试剂盒与质粒DNA提取试剂盒这2者之间有区别吗？
我的实验是这样的，先纯化质粒，然后做酶切，再纯化DNA。
最后一步其实也可以用切胶回收试剂盒，我怕做不好，所以想选用DNA纯化试剂盒，但不知跟质粒DNA提取试剂盒是否有区别，因为说明书上说可以用Invitrogen的K210001.我搜索看了一席啊，觉得那个是提取质粒的小提啊。所以产生这个疑问，请大侠告知DNA纯化试剂盒与质粒DNA提取试剂盒这两者之间有区别吗？
用哪个公司的DNA纯化试剂盒比较好。谢谢啦！
我的实验是这样的，先纯化质粒，然后做酶切，再纯化DNA。
最后一步其实也可以用切胶回收试剂盒，我怕做不好，所以想选用DNA纯化试剂盒，但不知跟质粒DNA提取试剂盒是否有区别，因为说明书上说可以用Invitrogen的K210001.我搜索看了一席啊，觉得那个是提取质粒的小提啊。所以产生这个疑问，请大侠告知DNA纯化试剂盒与质粒DNA提取试剂盒这两者之间有区别吗？
用哪个公司的DNA纯化试剂盒比较好。谢谢啦！
AChE试剂盒 | 每日生物评论123
2021-08-14
应用双抗体夹心法测定标本中小鼠乙酰胆碱酯酶（AchE）水平。用纯化的小鼠乙酰胆碱酯酶（AchE）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入乙酰胆碱酯酶（AchE），再与HRP标记的乙酰胆碱酯酶（AchE）结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙酰胆碱酯酶（AchE）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠乙酰胆碱酯酶（AchE）含量。
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