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SBA Macrobeads

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特性 Okayama 和 Berg 用于 cDNA 克隆 概述催化双链 DNA 粘性末端的 5´-磷酸和 3´-羟基形成磷酸二酯键。 来源纯化自重组 E.coli 594(su-)菌株,该菌株携带有噬菌体 λgt4 lop11 lig + Sam 7。 反应条件1 XE. coliDNA连接酶缓冲液 [30 mM Tris-HCl(pH 8.0),4 mM MgCl2,1 mM DTT,26 μM NAD+,50 μg/ml BSA]。最适反应温度为16 ℃。 质保声明E. coli 查看更多>
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qiagen的大量抽提试剂盒是公认效率最高,得率最高的产品。我做的研究工作主要是基因治疗,抽提质粒是一件非常痛苦的事情。因为要做动物的体内实验,每只动物每次需要将静脉注射50微克的质粒,重复注射三次,每只就是150微克,如果有60只就需要9mg。如果需要大量抽提质粒的实验人员就清楚这9mg是需 查看更多>
人体内真正发挥作用的是蛋白质,蛋白质扮演着构筑生命大厦的“砖块”角色,随着破译生命密码的人类基因组计划进入尾声,一个以蛋白质和药物基因学为研究重点的后基因组时代已经拉开序幕,蛋白质将是今后的重点研究方向之一。然而,蛋白质的分离和鉴定非常费时,目前测定蛋白质的技术远远落 查看更多>
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农药敌敌畏可抑制A.羧基酶B.磷酸酶C.胆碱脂酶D.羟基酶E.巯基酶请帮忙给出正确答案和分析,谢谢! 查看更多>
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Asymmetric sequences are indicated by *.Single letter code:R = G or A;Y = C or T;W = A or T;M = A or C;K = G or T;S = C or G;H = A, C or T;V = A, C or G;B = C, 查看更多>
酶的酶活性为了进一步验证检测方法的可行性,选择两种商品化T4DNA聚合酶进行检测,商品化T4DNA聚合酶1为NEB-T4DNAPolymerase,商品化T4DNA聚合酶2为Enzymatics-T4DNA... 查看更多>
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相关疾病:肿瘤DNA拓扑异构酶Ⅱ与肿瘤药物靶点的研究进展,写得不好,请广大战友包涵

DNA拓扑异构酶Ⅱ与抗肿瘤药物靶点的研究进展.doc(59.5k)
TERC是端粒酶RNA基因,编码端粒酶RNA
TERT是端粒酶逆转录酶
人的端粒酶是由端粒酶逆转录酶、端粒酶RNA和一种假尿嘧啶合成酶组成
目前已知有三种方法可以用来在体外连接DNA片段:
第一种方法是,用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;
第二种方法是,用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly(dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;
第三种方法是,先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头,使之形成粘性末端之后,再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异,但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。
粘性末端DNA片段的连接
DNA连接酶最突出的特点是,它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用,形成重组的DNA分子。
平末端DNA片段的连接
常用的平末端DNA片段连接法,主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。
同聚物加尾法
这种方法的核心部分是,利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶,它能够将核苷酸(通过脱氧核苷三磷酸前体)加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA,以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中,DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段,称之为poly(dA)尾巴(图2-7)。反过来,如果在反应混合物中加入的是dTTP,那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly(dT)尾巴。因此任何两条DNA分子,只要分别获得poly(dA)和poly(dT)尾巴,就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法(homopolymertail-joining),简称同聚物加尾法。
衔接物连接法
所谓衔接物(linker),是指用化学方法合成的一段由10~12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端,用多核苷酸激酶处理使之磷酸化,然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子,这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法,将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。
DNA接头连接法
DNA接头,是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后,便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子,而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造,可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。
PromegaM-MLV逆转录酶怎么样啊,有哪位用过的分享一下经验咯,我看了一下他们的价格比较便宜点,但我BOSS以前都用的TakanaM-MLV,但Promega最近有促销,
10000U才246,很诱惑,谢谢咯
我师兄买的MBI产的RevertAidFirstStrandCDNASynthesisKit中MuLV逆转录酶的反应温度为42OC,但我看书上介绍说,MuLV逆转录酶在42oC时迅速失活.不知道我们在用的时候应采用哪个温度?
我以质粒为模板进行定点突变,质粒加目的片段一共6.5kb,不知道选用那种高保真聚合酶比较好,想选PfuDNA聚合酶,查了查比较好的公司Promega生产的了,现在又查到TaKaRa生产的PyrobestDNA聚合酶,不知道这两种酶哪个比较好一些。请哪位高手指点一下。
A、若酶蛋白质其合包括转录翻译若RNA则转录程A错误;
B、酶细胞产能细胞内(外)起作用消化酶细胞外起作用B错误;
C、酶同需要适条件同胃蛋白酶与胰蛋白酶所需PH同C错误;
D、葡萄糖细胞质基质解丙酮酸需要酶催化D确.
故选:D.
请问RNA聚合酶抑制的药物,使mRNA水平下降,蛋白水平不变正常吗
我跑了30多个基因,大约30个下降,这个药物之前报道过有RNA聚合酶抑制
但是减少20倍的mRNA,跑蛋白,蛋白水平无明显变化,买了3个抗体,3个抗体都这样,PCR结果应该是准确的,换了3批样品,重复3次,都是一样的趋势,这种情况能解释吗?
谢谢各位。
Taq DNA Polymerase 和rTaq酶有什么区别
第一代热启动Taq酶是一种DNA聚合酶。 第一代指的是直接从Taq(这是一种细菌)体内提取的天然聚合酶,没有进行化学修饰的,为了达到更好的聚合催化效果,往往需要经过酶工程处理,得到的聚合酶催化效率更高。 热启动是指这种酶的反应温度条件
Taq DNA polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经过柱纯化分离出来的一个约94 KD的重组蛋白。无外源核酸酶和细菌DNA污染,稳定性好,特异性强,适用于常规PCR扩增。
最近准备做southern,但是提取的苜蓿基因组dna酶切总是不尽如人意
同一管dna有的酶可以切开,比如dra1,ecoR1,Hind111
有的酶又完全不能切动,如BamH1,sac1,xba1,xho1,pst1
请问高手这是什么原因??
各位好:
我在做5RACE,选用TaKaRa公司的RNA反转录酶(RNaseH-),不知道这个酶好不好,有什么需要注意的。
DNA即脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid),其基本组成单位是核苷酸,而核苷酸又是有核酸,戊糖和磷酸组成(DNA中的戊糖为脱氧核糖)。DNA水解酶为一类可以将组成DNA分子的脱氧核糖核苷酸之间的连接(3’,5’-磷酸二酯键)打开的酶。具体包括:DNA聚合酶α/引发酶(引发及后随链的部分合成),DNA聚合酶δ(DNA复制主要酶),增殖细胞核抗原(滑动夹子,与合成连接性有关),拓扑异构酶(母链DNA拓扑异构化),解(螺)旋酶(能解开DNA双螺旋),单链DNA结合蛋白及复制蛋白(单链DNA结合作用),复制因子C(参与滑动夹子的装配),DNA连接酶(连接冈崎片段及参与修复),核酸酶(去除RNA引物),侧翼核酸内切酶(去除RNA引物)。总体作用是在DNA复制过程中发挥的,在DNA复制过程中起到关键性的作用。
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