western 转膜时marker 未转到膜上
2017-07-31
问题描述：
湿转,跑胶结束后能看到Marker,转膜条件：300mA,150min,因为目的蛋白160kd左右所以时间比较久.转完之后pvdf膜上却未看到marker,丽春红染色可隐约看到一个条带,请问有哪位高人晓得原因么
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ULYSSEESWB
用户
很有可能是膜和胶的位置反了。。。或是buffer问题
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tianzhuiye
用户你是不是夹子上的正负极和你砖模槽上面的放反了？正负极反了就反转了，我放反了以后就出现这种问题，一点都转不到膜上，还有就是你这个条件转，时间太长，电流太大，不知道你用的哪家抗体，反正我100V60min290kD蛋白次次稳出。
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sure果果二战
用户转膜方向顺序是负极，夹子黑色面，三层滤纸，胶，膜，三层滤纸，夹子白色面或透明面，负极。
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zh9394
用户楼主都说有Marker的印子了，所以我觉得不是正负极放反的原因，最大的原因可能是电转液的问题，建议把配电转的粉末全部换新的，还有用0.22微的PVDF膜
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迈杲迪
用户你好，请问找到原因了吗
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